الهدف العام من هذه الطريقة هو تصور اليسار الأمامي الأمامي وظيفة الشريان التاجي في الفئران باستخدام تخطيط صدى القلب لحساب احتياطي تدفق التاجي. تقدم هذه الطريقة أداة تقييم مهمة لتشخيص الخلل الوعائي الدقيق في القلوب المريضة وتقييم العلاجات المحتملة طوال فترة الدراسة. على الرغم من أن العلاج reperfusion قد ثبت لإنقاذ منظار القلب للخطر وتحسين وظيفة البطين الأيسر, قد تحدث تشوهات وظيفية من الأوعية التاجية الصغيرة بعد إعادة المكنين الشريان التاجي.
يمكن أن توفر هذه الطريقة نظرة ثاقبة في الأوعية الدقيقة التاجية للفئران، وكذلك في نماذج أخرى، بما في ذلك احتشاء عضلة القلب، وحجم الضغط الزائد من البطين الأيسر. قبل ما قبل الإقفار جراحة إعادة الحقن التصوير بالموجات فوق الصوتية، تأكيد عدم وجود استجابة لقرصة إصبع القدم في جرذ فيشر 344 تخدير. حلق الشعر من الصدر.
تطبيق مرهم على عيون الحيوان ووضع الحيوان في موقف supine على 37 إلى 38 درجة مئوية المدمج في منصة الاحترار. قم بتوصيل المسبار الخطي 13 إلى 24 ميجاهرتز بجهاز الموجات فوق الصوتية. تعيين التطبيق مسبقا لإعداد التصوير القلبي واستخدام نظام السكك الحديدية لوضع المسبار للحصول على عرض محور قصير parasternal.
استخدم المحور XY micromanipulator لتحريك المسبار في الاتجاه الرستري لتحديد موقع الشريان الرئوي. حرّك المجس، مما يجعل البطين الأيسر أكثر وضوحًا. بمجرد التقاط صورة وضع B وتخزين Cine ، انقر فوق دوبلر اللون وتصور الشريان التاجي في المحور القصير.
اللون الأحمر، كما لوحظ في الوقت الحقيقي، يدل على اتجاه التدفق. بعد تصور الشريان التاجي السفلي السفلي التنازلي في وضع دوبلر اللون، قم بتغيير الوضع إلى موجة النبض وابحث عن وجود خط مؤشر أصفر على الشريان التاجي. ضع خط موجة النبض الأصفر في منتصف الشريان التاجي ، مع الحرص على أن الزاوية موازية لاتجاه التدفق واستخدم متجر Cine لالتقاط سرعة الراحة اليسرى الأمامية تنازلية تدفق التاجية وذروة أشكال الموجة.
بعد الحصول على راحة غادر سرعة التدفق التنازلي الأمامي، وضع شريط صغير من الشاش حول قاعدة الذيل واستخدام الهيموستات للاستيلاء على وتلوي tourniquet لتطبيق الضغط، مما تسبب في الوريد لتكبير. ضع بعناية إبرة فراشة ضخ 25 قياسًا متصلة بحقنة 10 ملليلتر محملة بال dobutamine في الوريد الذيل المتوسع وقم بتثبيت الإبرة مع الغراء وقطعة من الشريط الجراحي. عندما تم تأمين خط التسريب، وإزالة الهيموستات وtourniquet لاسترداد تدفق ووضع حقنة في مضخة ضخ تعيين لحقن 20 ميكروغرام لكل كيلوغرام في الدقيقة الواحدة.
أثناء التسريب، مراقبة بعناية في اليسار الأمامي المنحدر الشريان الذروة ومعدل ضربات القلب، تسجيل دوري في اليسار الأمامي الأمامي هبوط موجة نبض الشريان قمم في وضع دوبلر تحت ظروف الإجهاد الناجمة عن dobutamine. بعد أن تستقر قمم الشريان التاجي الأمامي التنازلي ومعدل ضربات القلب أثناء التحدي ، أوقف التسريب ، وأزل مجموعة ضخ الوريد الذيل ، وأزل الحيوان من المنصة. ثم، استخدم أداة السرعة القصوى للحصول على سرعات الذروة الانبساطي من الصور وحساب مؤشر احتياطي التدفق التاجي كنسبة من اليسار الأمامي الأمامي الإجهاد الإجهاد ذروة سرعة التدفق الانبساطي إلى يستريح غادر الأمامي نزولا الشريان ذروة سرعة التدفق الانقباطي.
باستخدام مصدر ضوء الألياف البصرية، الفئران intubate مع قسطرة الرابع 18 قياس والاتصال بالقسطرة إلى جهاز التنفس الصناعي. بعد ذلك، استخدم 8-0 خياطة أحادية اللون ل ligate الشريان الأمامي الأيسر المنحدر من خلال فتحة 15 ملليمتر في الفضاء ال Intercostal الخامس مع عقدة عادية لمدة 30 دقيقة. في نهاية فترة نقص التروية ، يؤكد بصريًا نقص التروية عن طريق تلون سطح القلب ويطلق الأربطة.
يمكن التحقق من إعادة التسريب عن طريق احمرار المنطقة التي تم تغيير لونها سابقًا من عضلة القلب. بعد 72 ساعة من الجراحة، قم بقياس تدفق الشريان التاجي واحتياطي تدفق التاجي كما هو موضح، وقارن القياسات بتلك التي تم الحصول عليها قبل الإصابة. في هذه التجربة التمثيلية، قبل جراحة إعادة ضخ الإقفار، تم قياس الراحة الخلفية المنحدرة من سرعة الشريان التاجي بما يقرب من 423 ملليمترًا في الثانية إلى أكثر من ضعف السرعة بعد ضخ الدوبوتامين.
بعد 72 ساعة من إعادة ضخ الإقفار، كانت سرعة الشريان التاجي الخلفية المستريحة تنحدر بشكل ملحوظ مقارنة بالراحات اليسرى الهابطة سرعة الشريان التاجي قبل الجراحة. تم تقليل استجابة الإجهاد لاختبار الـ dobutamine بعد الإصابة بشكل كبير مقارنة بالاستجابة قبل الاستجابة للجراحة. ويُحسب احتياطي التدفق التاجي كنسبة من سرعة التدفق القصوى أثناء الإجهاد إلى سرعة التدفق المستريحة، وكان حوالي 2.1 في الجرذان الصغيرة قبل الجراحة، ولكنه انخفض بشكل كبير بعد 72 ساعة من الإصابة.
بالإضافة إلى ذلك، لم تحدث تغييرات كبيرة في وظيفة الانقباضي للبطين الأيسر بعد 72 ساعة من الإصابة. بعد تطورها، ستسمح هذه التقنية للباحثين باستكشاف واستخدام التصوير بالموجات فوق الصوتية للشرايين التاجية في نماذج حيوانية صغيرة تحاكي بدقة حالات الأمراض البشرية. بعد مشاهدة هذا الفيديو، يجب أن يكون لديك فهم جيد جداً لكيفية قياس تدفق الدم التاجي وتقييم الأوعية الدقيقة التاجية في نموذج مرض القلب الحيوانية الصغيرة.