إزالة التعصيب الودي الكلوي هو علاج محتمل لارتفاع ضغط الدم ، والذي أثبته العديد من التجارب السريرية. تعمل هذه التقنية على إزالة الأعصاب الكلوية ذات التدفق الحر دون تلف الشريان الكلوي. علاوة على ذلك ، فهو نموذج بسيط وحرج وقابل للتكرار وموحد.
سيوضح الإجراء مينغ وانغ ، مساعد مختبر من مختبري. ابدأ بتطهير طاولة التشغيل بنسبة 70٪ من الإيثانول ، ثم اضبط درجة حرارة وسادة التدفئة على 37 درجة مئوية. قبل الجراحة ، قم بتعقيم جميع الأدوات الجراحية ، بما في ذلك مقص الجراحة المجهرية ، والملقط المستقيم الدقيق ، والملقط المنحني الدقيق ، والملقط المرقئ ، والشاش المعقم ، ووزن الورق عند 121 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.
بعد تخدير فأر C57BKL / 6 البالغ من العمر 14 أسبوعا ، قم بإزالة الشعر على الظهر باستخدام ماكينة حلاقة ، ثم ضع مرهم الطبيب البيطري على العينين لمنع الجفاف. ضع الماوس على طاولة العمليات في الوضع الظهري. اسحب وامسح المنطقة المحلوقة باستخدام بوفيدون اليود ، متبوعا بثلاث مناديل تحتوي على 70٪ من الإيثانول.
باستخدام شفرة مشرط معقمة ، قم بعمل شق سنتيمتر واحد عموديا على الذيل خلف الأذن فوق لوح الكتف في الساق الأمامية. بعد ذلك ، استخدم مرقئ معقم لعمل نفق تحت الجلد تحت الجلد وإنشاء جيب للمضخة. أدخل برفق مضخة تناضحية مملوءة بالأنجيوتنسين II في الجيب ، مما يضمن مساحة خالية كافية لخياطة الجرح دون شد الجلد.
خياطة العضلات مع الغرز Vicryl المتقطعة 6-0 وإغلاق الجلد مع الغرز النايلون 4-0 متقطعة. ثم مسحة ومسح موقع الجرح مع البوفيدون اليود. ضع جميع الأدوات الجراحية في جهاز التعقيم لمدة 10 ثوان واستبدل القفازات المعقمة بين العمليات الجراحية.
راقب الماوس حتى يتعافى تماما. راقب عن كثب وراقب التئام الجروح مرتين يوميا على الأقل خلال الأسبوع الأول ومرة كل يوم بعد ذلك ، بما في ذلك الاحمرار والتورم والعدوى. إجراء تشريح على الفور إذا مات الماوس أثناء ضخ الأنجيوتنسين الثاني.
قياس ضغط الدم عند خط الأساس وكل أسبوع بعد ضخ الأنجيوتنسين الثاني باستخدام طريقة تخطيط حجم الكفة في الفئران الواعية. بعد أسبوع واحد من تسريب الأنجيوتنسين الثاني ، حدد الفئران ذات ضغط الدم المرتفع وسجل وزنها. اختر الحيوانات التي لا يقل وزنها عن 24 جراما لجراحة إزالة التعصيب الكلوي.
بعد ذلك ، قم بإزالة الشعر الموجود على بطن فأر مخدر باستخدام ماكينة حلاقة ، ثم ضع الماوس على طاولة العمليات. الحفاظ على البطن وإصلاح الأطراف مع الشريط. تطهير جلد البطن مع البوفيدون اليود ، تليها ثلاث مناديل مع 70 ٪ من الإيثانول.
بعد إجراء شق بطني في خط الوسط البطني بطول سنتيمترين ، اسحب الأمعاء للخلف بشاش منقوع في محلول ملحي 37 درجة مئوية لكشف الشريان الكلوي الأيسر. بعناية ، ولكن بصراحة ، تشريح الدهون بعيدا عن الشريان الكلوي باستخدام ملاقط منحنية. باستخدام مقص حاد معقم ، قم بقص ورق الوزن إلى مستطيل بنفس حجم الشريان الكلوي.
قص عدة قطع من ورق الوزن في وقت واحد للحفاظ على الشكل كما هو. اغمس ورق الوزن في محلول إيثانول فينول 10٪ لمدة 30 ثانية على الأقل. قم بتغطية سطح الشريان الكلوي الأيسر ولف الوعاء بورق الوزن لمدة دقيقتين.
استخدم الشاش لحماية الأنسجة المحيطة لتجنب لمس ورق الوزن للكلى والأمعاء. كرر نفس الإجراء للشريان الكلوي الأيمن. بعد الجراحة ، أعد وضع العضلات في موضعها الأولي وأغلق الصفاق بخيوط 6-0 Vicryl في نمط خياطة متقطع ، ثم أغلق الجلد بخيوط نايلون 4-0 متقطعة.
راقب جميع الفئران حتى تتعافى تماما. لوحظت زيادة كبيرة في ضغط الدم الانقباضي بعد أسبوع واحد من تسريب الأنجيوتنسين الثاني. أظهرت مجموعة إزالة التعصيب الكلوي الودي ، أو RDN ، الأنجيوتنسين II انخفاضا كبيرا في ضغط الدم الانقباضي مقارنة بمجموعة الأنجيوتنسين الثانية الوهمية بعد 21 يوما من إجراء RDN.
لم يلاحظ أي فرق كبير بين المجموعات الوهمية و RDN بعد أسبوعين من إجراء RDN. يظهر هنا تلطيخ الهيماتوكسيلين واليوزين للعصب الودي الكلوي والشريان الكلوي. لم يلاحظ أي سماكة في الطبقة الداخلية للشريان الكلوي في المجموعات الأربع.
بالمقارنة مع مجموعة الشام ، والنواة المجزأة ، والنوى البيكنية ، لوحظ هضم وتورم الأنسجة العصبية في مجموعتي RDN. كشفت الكيمياء الهيستولوجية المناعية للحزم العصبية أن التعبير عن هيدروكسيلاز التيروزين قد انخفض بشكل ملحوظ في مجموعة RDN و RDN angiotensin II مقارنة بمجموعتي شمس. تم تخفيض محتوى النورإبينفرين القشري الكلوي في الكلى المعصبة في كل من المجموعة المعيارية وارتفاع ضغط الدم بشكل كبير مقارنة بالكلى المعصبة.
لم يظهر تلطيخ ماسون أي زيادة ملحوظة في الوسائط الداخلية للشريان الأورطي البطني بين المجموعات. يتم عرض صور تمثيلية لعضلة القلب في مجموعات مختلفة هنا. تم تحسين تضخم القلب الناجم عن ضخ الأنجيوتنسين II عن طريق علاج RDN من خلال انخفاض التليف الخلالي وحجم عضلة القلب.
أثناء العملية ، لا تلمس الفينول للأنسجة المحيطة باستثناء الشريان الكلوي لأنه قد يسبب انسدادا معويا وعدوى في البطن وتضيق الشريان الكلوي. يمكن لهذه الطريقة إنشاء نموذج RDN موحد للمساعدة في دراسة الآليات التي تتحكم في ارتفاع ضغط الدم. يمكن أن تساهم التطبيقات المستقبلية لهذه التقنية في توسيع المسارات التي تؤكد على عملية ارتفاع ضغط الدم وتضخم القلب.
