ניתוק עצבים סימפתטי כלייתי הוא טיפול פוטנציאלי ליתר לחץ דם, אשר הוכחו בניסויים קליניים רבים. טכניקה זו מונעת עצבים כלייתיים בזרימה חופשית ללא נזק לעורק הכליה. יתר על כן, זהו מודל פשוט, קריטי, ניתן לחזרה וסטנדרטי.
מי שידגים את ההליך יהיה מינג וואנג, עוזר מעבדה מהמעבדה שלי. התחל על ידי חיטוי שולחן הניתוחים עם 70% אתנול, ולאחר מכן להתאים את טמפרטורת כרית החימום ל 37 מעלות צלזיוס. לפני הניתוח, יש לעקר את כל מכשירי הניתוח, כולל מספריים מיקרו-כירורגיים, מלקחיים ישרים עדינים, מלקחיים מעוקלים עדינים, מלקחיים המוסטטיים, גזה סטרילית ונייר שקילה ב-121 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות.
לאחר הרדמת עכבר C57BKL/6 זכר בן 14 שבועות, הסר את השיער על הגב עם מכונת גילוח, ולאחר מכן מרח משחה וטרינרית על העיניים כדי למנוע יובש. הנח את העכבר על שולחן ניתוחים במצב הגבי. החליקו ונגבו את האזור המגולח עם פובידון-יוד, ולאחר מכן שלושה מגבונים עם 70% אתנול.
באמצעות להב אזמל סטרילי, לבצע חתך של סנטימטר אחד בניצב לזנב מאחורי האוזן מעל להב הכתף של הרגל הקדמית. לאחר מכן, להשתמש hemostat סטרילי לעשות מנהרה תת עורית מתחת לעור וליצור כיס עבור המשאבה. הכנס בעדינות משאבה אוסמוטית מלאה אנגיוטנסין II לתוך הכיס, להבטיח מספיק מקום פנוי כדי לתפור את הפצע מבלי למתוח את העור.
לתפור את השריר עם תפרי ויקריל מופרעים 6-0 ולסגור את העור עם תפרים 4-0 ניילון מופרעים. ואז ספוגית ולנגב את אתר הפצע עם פובידון-יוד. מכניסים את כל כלי הניתוח לתוך חומר מעקר למשך 10 שניות ומחליפים את הכפפות הסטריליות בין הניתוחים.
נטר את העכבר עד להחלמתו המלאה. לעקוב מקרוב אחר ריפוי פצעים לפחות פעמיים ביום במהלך השבוע הראשון ופעם אחת בכל יום לאחר מכן, כולל אדמומיות, נפיחות וזיהום. בצע דיסקציה מיד אם העכבר מת במהלך עירוי אנגיוטנסין II.
יש למדוד את לחץ הדם בנקודת ההתחלה ובכל שבוע לאחר עירוי אנגיוטנסין II בשיטת הפלתיסמוגרפיה של שרוול הזנב בעכברים מודעים. שבוע לאחר עירוי אנגיוטנסין II, בחר את העכברים עם לחץ דם גבוה ולרשום את משקלם. בחר בעלי חיים עם משקל מינימלי של 24 גרם עבור ניתוח ניתוק עצבים הכליות.
לאחר מכן, הסר את השערות על בטנו של עכבר מורדם עם מכונת גילוח, ולאחר מכן הנח את העכבר על שולחן הניתוחים. שמור על הבטן למעלה לתקן את הגפיים עם קלטת. יש לחטא את עור הבטן עם פובידון-יוד, ואחריו שלושה מגבונים עם 70% אתנול.
לאחר ביצוע חתך בטן גחון של שני סנטימטרים בקו האמצע, משכו בחזרה את המעי עם גזה ספוגה במלח של 37 מעלות צלזיוס כדי לחשוף את עורק הכליה השמאלי. בזהירות, אך בבוטות, לנתח את השומן הרחק מעורק הכליה באמצעות פינצטה מעוקלת. באמצעות מספריים חדים סטריליים, חותכים את נייר השקילה למלבן בגודל זהה לעורק הכליה.
חותכים כמה חתיכות של נייר השקילה בכל פעם כדי לשמור על צורה זהה. טבלו את נייר השקילה בתמיסת אתנול 10% פנול למשך 30 שניות לפחות. מכסים את פני השטח של עורק הכליה השמאלי ועוטפים את כלי השיט בנייר השקילה במשך שתי דקות.
השתמש גזה כדי להגן על הרקמות שמסביב כדי למנוע את נייר השקילה מלגעת בכליות ובמעי. חזור על אותו הליך עבור עורק הכליה הימני. לאחר הניתוח, מקם מחדש את השרירים למקומם הראשוני וסגור את הצפק עם 6-0 תפרי Vicryl בתבנית תפר מופרעת, ולאחר מכן סגור את העור עם תפרים ניילון 4-0 מופרעים.
נטר את כל העכברים עד להחלמה מלאה. עלייה משמעותית בלחץ הדם הסיסטולי נצפתה בשבוע לאחר עירוי אנגיוטנסין II. ניתוק העצבים הסימפתטי הכליתי, או RDN, קבוצת אנגיוטנסין II הראה ירידה משמעותית בלחץ הדם הסיסטולי בהשוואה לקבוצת האנגיוטנסין II של שאם, 21 יום לאחר הליך ה-RDN.
לא נצפה הבדל משמעותי בין קבוצות ה-sham וה-RDN בשבועיים שלאחר הליך ה-RDN. המטוקסילין וכתמי אוזין של עצב סימפתטי כלייתי ועורק הכליה מוצגים כאן. לא נצפתה עיבוי של שכבת האינטימה של עורק הכליה בארבע הקבוצות.
בהשוואה לקבוצת שמס, גרעינים מקוטעים ופיקנוטיים, עיכול ונפיחות של רקמות אנדונוריאליות נצפו בשתי קבוצות ה- RDN. אימונוהיסטוכימיה של צרורות העצבים גילתה כי הביטוי של טירוזין הידרוקסילאז ירד באופן משמעותי בקבוצת RDN ו-RDN אנגיוטנסין II בהשוואה לשתי קבוצות השמס. תכולת נוראדרנלין בקליפת הכליה בכליות המנופצות הן בקבוצת הנורמטנסיביים והן בקבוצת יתר לחץ הדם הופחתה באופן משמעותי בהשוואה לכליה הפנימית.
הכתמת מסון לא הראתה עלייה יוצאת דופן באינטימה מדיה של אבי העורקים הבטני בקרב הקבוצות. תמונות מייצגות של שריר הלב בקבוצות שונות מוצגות כאן. אנגיוטנסין II היפרטרופיה לבבית המושרה בעירוי שופרה על ידי טיפול RDN על ידי הירידה בפיברוזיס אינטרסטיציאלי ובגודל קרדיומיוציטים.
במהלך ההליך, אין לגעת בפנול לרקמה הסובבת אלא לעורק הכליה מכיוון שהוא עלול לגרום לחסימת מעיים, זיהום בבטן והיצרות עורק הכליה. שיטה זו יכולה ליצור מודל RDN סטנדרטי כדי לעזור לחקור את המנגנונים השולטים יתר לחץ דם. יישומים עתידיים של טכניקה זו יכולים לתרום להרחבת המסלולים המדגישים את תהליך יתר לחץ דם והיפרטרופיה לבבית.