تم دعم هذه الدراسة من قبل التخصصات السريرية الرئيسية رفيعة المستوى لمقاطعة قوانغدونغ (SZGSP014) ومؤسسة شنتشن للعلوم الطبيعية (JCYJ20210324125805012).

يتم إجراء جميع التجارب على التي يتم إجراؤها وفقا لهذا البروتوكول بموجب موافقة اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام (IACUC).
1. إعداد
<ol><li>قم بإعداد 12 فئران صحية من نوع SPF Wistar تبلغ من العمر 6 أسابيع تزن 160 جم ± 20 جم.</li>
	<li>استخدم مصباح الشق ومنظار العين لفحص حالات العين لجميع الفئران ، والتأكد من عدم وجود أمراض في الجزء الأمامي أو الشبكية.</li>
	<li>رفع جميع الفئران لمدة 1 أسبوع مع ما يكفي من الغذاء ومصادر المياه.</li>
	<li>قسمت جميع الفئران عشوائيا إلى مجموعات طبيعية ، وتركيز دواء سكوبولامين 2.5 مجم / مل ، وتركيز دواء سكوبولامين 5 مجم / مل ، وتركيز دواء سكوبولامين 7.5 مجم / مل ، مع ثلاثة في كل مجموعة.</li>
</ol>2. إعداد الحل
<ol><li>تحضير هيدروبروميد سكوبولامين عن طريق إذابته في محلول كلوريد الصوديوم 0.9٪ لعمل محلول بتركيزات 7.5 ملغم / مل و 5 ملغم / مل و 2.5 ملغم / مل.</li>
	<li>تحضير محلول كلوريد الصوديوم 0.9٪ بدون هيدروبروميد سكوبولامين لاستخدامه كحقن لمجموعة التحكم من الفئران.</li>
</ol>3. إعداد المعدات والمواد
<ol><li>تحضير مجهر صغير.</li>
	<li>تحضير المواد للتجربة ، بما في ذلك حقنة 1 مل يمكن التخلص منها بإبرة (26 جم) ؛ شرائط الفلوريسئين الصوديوم للعيون. شريط اختبار المسيل للدموع شيرمر ؛ الإيثانول المطلق 4 ٪ بارافورمالدهيد. زيلين. بلسم محايد الهيماتوكسيلين ، يوزين. ومجموعة تلطيخ حمض شيف الدورية.</li>
</ol>4. الحقن تحت الجلد
ملاحظة: يتطلب هذا الإجراء مساعدة من شخص ثان للمساعدة في تأمين الفئران.
<ol><li>امسك جسم الجرذ بثبات وامسكه وامتد ساقيه الخلفيتين اليسرى (أو اليمنى). ملاحظة: يمكن أن يساعد المساعد في حمل.</li>
	<li>تنظيف موقع الحقن بالكحول.</li>
	<li>أدخل حقنة سعة 1 مل يمكن التخلص منها بإبرة (26 جم) في قاعدة طية الجلد بين الإبهام والإصبع.</li>
	<li>نضح المحقنة عن طريق سحب مكبس المحقنة. أي دم في المحقنة يشير إلى وضع إبرة غير لائق ؛ قم بإزالة الإبرة وإعادة وضعها.</li>
	<li>يتم تطبيق محلول كلوريد الصوديوم 0.9٪ مع أو بدون سكوبولامين هيدروبروميد بحركة سائلة ثابتة.</li>
	<li>حقن جميع الفئران وفقا لتركيزات مختلفة ، مع حقن 0.5 مل في كل مرة وأربع مرات يوميا (في الساعة 9:00 و 12:00 و 15:00 و 18:00) لفترة متتالية مدتها 19 يوما ، بالتناوب بين الأطراف اليسرى واليمنى. ملاحظة: يتم تسمية المجموعات على النحو التالي: مجموعة بدون هيدروبروميد سكوبولامين: 0 مجموعة (تحكم) المجموعة مع سكوبولامين هيدروبروميد 2.5 ملغ/مل: 2.5 مجموعة المجموعة مع سكوبولامين هيدروبروميد 5 ملغ / مل: 5 مجموعة المجموعة مع سكوبولامين هيدروبروميد 7.5 ملغم / مل: 7.5 مجموعة</li>
	<li>أعد إلى قفصه وراقب التنفس والسلوك لمدة 5-10 دقائق.</li>
</ol>5. اختبار إفراز المسيل للدموع (اختبار شيرمر المسيل للدموع ، STT)
<ol><li>قم بإنشاء شريط ورق ترشيح معدل للفئران11. اقطع نصف شريط ورق الترشيح المستخدم للبشر على طول خط الوسط (1 مم × 15 مم) ، وقم بقص رأس الشريط لجعله ناعما. ملاحظة: قبل إجراء اختبار إفراز الدموع ، قم بتقييد جسم الجرذ يدويا لمنع الحركة وضمان تعرض عيون الفئران.</li>
	<li>ضع شريط ورق الترشيح على 1/3 الخارجي من كيس الملتحمة السفلي للفئران.</li>
	<li>حدد وقت الاختبار لمدة 5 دقائق. السيطرة على إغلاق عيون الفئران طوال العملية.</li>
	<li>بعد القياس ، استخدم الملقط لتثبيت شريط ورق الترشيح في أنبوب طرد مركزي دقيق وتسجيل حجم المسيل للدموع عن طريق وضع علامة على جدار الأنبوب.</li>
	<li>قم بقياس إفراز الدموع في اليوم 0 واليوم 1 واليوم 3 واليوم 5 واليوم 7 واليوم 11 واليوم 15 واليوم 19.</li>
</ol>6. تلطيخ القرنية الفلوريسئين
<ol><li>إسقاط 0.5 ميكرولتر من محلول الصوديوم فلوريسئين 0.5 ٪ في كيس الملتحمة السفلي لكل فئران.</li>
	<li>راقب القرنية تحت الضوء الأزرق لمدة 3 دقائق بعد تقطير الفلوريسين.</li>
	<li>سجل تلطيخ مضان قرنية كل فأر ولاحظ ما إذا كان هناك عيب في القرنية.</li>
	<li>قم بإجراء تلطيخ فلوريسئين القرنية في اليوم 0 واليوم 1 واليوم 3 واليوم 5 واليوم 7 واليوم 11 واليوم 15 واليوم 19.</li>
</ol>7. الملاحظة النسيجية لأنسجة الملتحمة
<ol><li>بعد الانتهاء من تطوير النموذج ، قم بتخدير الفئران بعمق بحقن داخل الصفاق يبلغ 0.4 مل / 100 جم من 10٪ هيدرات الكلورال المائية لتخفيف توتر. ثم القتل الرحيم للفئران عن طريق خلع عنق الرحم.</li>
	<li>خذ الملتحمة البصلية من نفس المناطق لكل فأر ، بحجم حوالي 2 مم × 2 مم.</li>
	<li>ثبت الأنسجة على الفور في 4٪ بارافورمالدهيد لمدة 24 ساعة وقم بتضمينها في البارافين13.</li>
	<li>قطع أقسام سمك 5 ميكرومتر وصمة عار مع الهيماتوكسيلين ويوزين (HE)14 وحمض شيف الدوري (PAS) وصمة عار (اتبع تعليمات الشركة المصنعة).</li>
</ol>8. الملاحظة النسيجية لأنسجة القرنية والغدة الدمعية
<ol><li>بعد الانتهاء من تطوير النموذج ، القتل الرحيم للفأر كما هو موضح في الخطوة 7.1.</li>
	<li>خذ القرنية على الجانب الأيمن من كل فأر وقم بإصلاحه على الفور في محلول بارافورمالدهايد 4٪.</li>
	<li>قطع البشرة الرأسية والأنسجة تحت الجلد على طول الخط الذي يربط الأذن والزاوية الخارجية للعين ، وتوسيع شق لكلا الجانبين وزيادة عزل الغدة المدارية الصفراء الزائدة.</li>
	<li>قم بإزالة فراء الفئران تماما وفصل الغدة خارج الحجاج بمحلول كلوريد الصوديوم بنسبة 0.9٪.</li>
	<li>ضع الغدد خارج الحجاج المعزولة في محلول بارافورمالدهايد 4٪ لمدة 24 ساعة وقم بتضمينها في البارافين.</li>
	<li>قطع المقاطع المستمرة بسمك ~ 5 ميكرومتر وتلطيخها ب HE لعينات أنسجة القرنية والغدة خارج الحجاج.</li>
</ol>9. التحليل الإحصائي
<ol><li>استخدام البرامج المناسبة للتحليل الإحصائي للبيانات.<ol><li>إجراء تحليل التباين أحادي الاتجاه (ANOVA) لتحليل البيانات واختبار الفرق الأقل أهمية (LSD) للمقارنة بين المجموعات. اضبط مستوى الدلالة الإحصائية على α = 0.05 ، مع P < 0.05 للإشارة إلى الأهمية الإحصائية. ملاحظة: تم استخدام برنامج SPSS 20 للتحليل الإحصائي للبيانات التجريبية.</li>
	</ol></li>
</ol>

خلل الغدة الدمعية الناجم عن سكوبولامين في الفئران

<ol>
	<li>Papas, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+global+prevalence+of+dry+eye+disease:+A+Bayesian+view.">The global prevalence of dry eye disease: A Bayesian view.</a> Ophthalmic Physiol Opt. 41 (6), 1254-1266 (2021).</li><li>Sy, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expert+opinion+in+the+management+of+aqueous+deficient+dry+eye+disease+(DED).">Expert opinion in the management of aqueous deficient dry eye disease (DED).</a> BMC Ophthalmol. 15 (1), 133 (2015).</li><li>Seo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+HIF-1alpha+(hypoxia+inducible+factor-1alpha)+prevents+dry+eye-induced+acinar+cell+death+in+the+lacrimal+gland.">Activation of HIF-1alpha (hypoxia inducible factor-1alpha) prevents dry eye-induced acinar cell death in the lacrimal gland.</a> Cell Death Dis. 5 (6), 1309 (2014).</li><li>Rahman, M. M., Kim, D. H., Park, C. -. K., Kim, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+models,+induction+protocols,+and+measured+parameters+in+dry+eye+disease:+Focusing+on+practical+implications+for+experimental+research.">Experimental models, induction protocols, and measured parameters in dry eye disease: Focusing on practical implications for experimental research.</a> Int J Mol Sci. 22 (22), 12102 (2021).</li><li>Sullivan, D. A., Bloch, K. J., Allansmith, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hormonal+influence+on+the+secretory+immune+system+of+the+eye:+androgen+regulation+of+secretory+component+levels+in+rat+tears.">Hormonal influence on the secretory immune system of the eye: androgen regulation of secretory component levels in rat tears.</a> J Immunol. 132 (3), 1130-1135 (1984).</li><li>Sullivan, D. A., Allansmith, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hormonal+modulation+of+tear+volume+in+the+rat.">Hormonal modulation of tear volume in the rat.</a> Exp Eye Res. 42 (2), 131-139 (1986).</li><li>Maitchouk, D. Y., Beuerman, R. W., Ohta, T., Stern, M., Varnell, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tear+production+after+unilateral+removal+of+the+main+lacrimal+gland+in+squirrel+monkeys.">Tear production after unilateral removal of the main lacrimal gland in squirrel monkeys.</a> Arch Ophthalmol. 118 (2), 246-252 (2000).</li><li>Barabino, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+controlled-environment+chamber:+a+new+mouse+model+of+dry+eye.">The controlled-environment chamber: a new mouse model of dry eye.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 46 (8), 2766-2771 (2005).</li><li>Viau, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+course+of+ocular+surface+and+lacrimal+gland+changes+in+a+new+scopolamine-induced+dry+eye+model.">Time course of ocular surface and lacrimal gland changes in a new scopolamine-induced dry eye model.</a> Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 246 (6), 857-867 (2008).</li><li>Altinors, D. D., Bozbeyoglu, S., Karabay, G., Akova, Y. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+ocular+surface+changes+in+a+rabbit+dry+eye+model+using+a+modified+impression+cytology+technique.">Evaluation of ocular surface changes in a rabbit dry eye model using a modified impression cytology technique.</a> Curr Eye Res. 32 (4), 301-307 (2007).</li><li>Daull, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+a+new+topical+cationic+emulsion+of+cyclosporine+A+on+dry+eye+clinical+signs+in+an+experimental+mouse+model+of+dry+eye.">Efficacy of a new topical cationic emulsion of cyclosporine A on dry eye clinical signs in an experimental mouse model of dry eye.</a> Exp Eye Res. 153, 159-164 (2016).</li><li>Dursun, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+keratoconjunctivitis+sicca.">A mouse model of keratoconjunctivitis sicca.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 43 (3), 632-638 (2002).</li><li>Fischer, A. H., Jacobson, K. A., Rose, J., Zeller, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cutting+sections+of+paraffin-embedded+tissues.">Cutting sections of paraffin-embedded tissues.</a> CSH Protoc. 2008, (2008).</li><li>Fischer, A. H., Jacobson, K. A., Rose, J., Zeller, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematoxylin+and+eosin+staining+of+tissue+and+cell+sections.">Hematoxylin and eosin staining of tissue and cell sections.</a> CSH Protoc. 2008, (2008).</li><li>Shinomiya, K., Ueta, M., Kinoshita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+dry+eye+mouse+model+produced+by+exorbital+and+intraorbital+lacrimal+gland+excision.">A new dry eye mouse model produced by exorbital and intraorbital lacrimal gland excision.</a> Sci Rep. 8 (1), 1483 (2018).</li><li>Ramos, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonproliferative+and+Proliferative+Lesions+of+the+Rat+and+Mouse+Special+Sense+Organs(Ocular+[eye+and+glands],+Olfactory+and+Otic).">Nonproliferative and Proliferative Lesions of the Rat and Mouse Special Sense Organs(Ocular [eye and glands], Olfactory and Otic).</a> J Toxicol Pathol. 31, (2018).</li><li>Stapleton, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TFOS+DEWS+II+Epidemiology+report.">TFOS DEWS II Epidemiology report.</a> Ocul Surf. 15 (3), 334-365 (2017).</li><li>Foulks, G. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+guidelines+for+management+of+dry+eye+associated+with+Sjogren+disease.">Clinical guidelines for management of dry eye associated with Sjogren disease.</a> Ocul Surf. 13 (2), 118-132 (2015).</li><li>Huang, W., Tourmouzis, K., Perry, H., Honkanen, R. A., Rigas, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+dry+eye+disease:+Useful,+varied+and+evolving+(Review).">Animal models of dry eye disease: Useful, varied and evolving (Review).</a> Exp Ther Med. 22 (6), 1394 (2021).</li><li>Brayer, J. B., Humphreys-Beher, M. G., Peck, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sjogren's+syndrome:+immunological+response+underlying+the+disease.">Sjogren's syndrome: immunological response underlying the disease.</a> Arch Immunol Ther Exp (Warsz. 49 (5), 353-360 (2001).</li><li>Lin, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+dry+eye+model+induced+by+topical+administration+of+benzalkonium+chloride).">A mouse dry eye model induced by topical administration of benzalkonium chloride).</a> Mol Vis. 17, 257-264 (2011).</li></ol>

ليس لدى المؤلفين أي تضارب محتمل في المصالح يتعلق بالأدوية والمواد المستخدمة في هذا الإجراء.

العين الجافة التي تعاني من نقص مائي (ADDE) هي نوع مهم من جفاف العين ، حيث تمثل حوالي 1/3 من إجمالي عدد سكان العين الجافة17 ، والسبب الرئيسي ل ADDE هو الضرر المرضي للغدة الدمعيةوالالتهاب 13. بالنسبة لهذا النوع من جفاف العين ، فإن طرق العلاج السريري الأكثر شيوعا هي الدموع ال?...

بحلول عام 2021 ، يتأثر ما يقرب من 12٪ من الأشخاص بشكل كبير بجفاف العين1 ، مما يجعله أحد أكثر أمراض العيون المزمنة شيوعا. يمكن تقسيم جفاف العين إلى نوعين: العين الجافة التي تعاني من نقص مائي (ADDE) والعين الجافة التبخيرية (EDE)2 ، اعتمادا على العوامل المختلفة التي تؤثر على المرض. ينقسم ADDE أيضا إلى متلازمة سجوجرن (SS) وغير SS ، ولكن غالبية مرضى جفاف العين هم مرضى غير SS في السريرية3. تؤثر أعراض جفاف العين المزمنة بشكل خطير على الجودة البصرية للمرضى. حاليا ، يتضمن العلاج التقليدي لدائرة التنمية الاقتصادية تطبيق الدموع الاصطناعية لتليين سطح العين والعلاج الطبيعي للجفون. ومع ذلك، قد لا تقدم متلازمة العين الجافة علاجا كاملا في كثير من الحالات. لذلك ، فإن دراسة التسبب في مرض جفاف العين أمر بالغ الأهمية لتطوير علاجات وأدوية جديدة. توفر النماذج الحيوانية لمتلازمة العين الجافة أساسا لمزيد من البحث.
هناك العديد من الطرق لبناء نماذج حيوانية لمتلازمة العين الجافة4 ، بما في ذلك تغيير مستويات إفراز الدموع عن طريق تغيير مستويات الهرمون. على سبيل المثال ، يمكن أن تؤدي إزالة خصيتي الفئران إلى تقليل إفراز الأندروجين ، وزيادة إفراز الدموع ، وتقليل تركيز المكون الإفرازي الحر (SC) و IgA في الدموع 5,6. طريقة أخرى هي الإشارة إلى تفاعلات المناعة الذاتية في الغدة الدمعية عن طريق إزالة أعصاب سطح العين التي تتحكم في الغدة. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن تحقيق الحد المباشر من إفراز الدموع عن طريق إزالة الغدة الدمعية7 جراحيا. يمكن أن تؤدي الظروف البيئية المتغيرة أيضا إلى تسريع تبخر الدموع. على سبيل المثال ، يمكن أن يؤدي استزراع في ظروف الرطوبة المنخفضة والتهوية الجافة إلى إنشاء نموذج للعين الجافة التبخيريةالمفرطة 8 ، والتي يمكن دمجها مع طرق أخرى لزيادة شدة جفاف العين. الأدوية الرئيسية المستخدمة للحث على النماذج التجريبية لجفاف العين هي الأتروبين والسكوبولامين9. كمثبطات السمبتاوي ، يمكن لكليهما أن يحفز الحصار الدوائي للمستقبلات الكولينية (المسكارينية) في الغدة الدمعية ويمنع إفراز الدموع. بالمقارنة مع جفاف العين الناجم عن حقن عضلات الأتروبين10 ، فإن سكوبولامين له تأثير مثبط أقوى على غدد الإفراز ، ومدة أطول من عمل الدواء ، وتأثيرات أضعف على عضلات القلب والأمعاء الصغيرة والشعب الهوائية الملساء. إنه أحد أكثر الأدوية نضجا لنماذج الجافة العين.
يمكن استخدام طرق مختلفة للحث على جفاف العين باستخدام سكوبولامين ، مثل الحقن تحت الجلد أو مضخة الدواء أو تطبيقالتصحيح 4،11،12. من أجل تقليل وتيرة إعطاء الدواء لحيوانات التجارب ، يطبق العديد من الباحثين بقع عبر الجلد على ذيول الفئران أو يستخدمون مضخات الدواء. ومع ذلك ، فإن كلتا الطريقتين لهما قيود. على سبيل المثال ، يجب أن يأخذ امتصاص البقع عبر الجلد في الاعتبار الامتصاص الفردي للفئران ، مما قد يؤدي إلى جرعة دواء غير متسقة. على الرغم من أن مضخات الدواء يمكنها التحكم بدقة في جرعة كل إدارة ، إلا أنها لا تتوافق دائما مع الدواء الذي يتم تسليمه أو التركيز المستخدم. كما يجب وضعها جراحيا - وهو أكثر توغلا للحيوان ، ويتطلب حدثا مخدرا ، وهناك احتمال حدوث مضاعفات ما بعد الجراحة مثل التفكك. الحقن تحت الجلد ، على الرغم من أنه أكثر تعقيدا ، يمكن أن يضمن جرعة دقيقة لكل إدارة والحفاظ على الاتساق في إدارة الدواء بين الفئران المختلفة. في الوقت نفسه ، لديها تكلفة أقل ومناسبة لإجراء عدد كبير من التجارب على.
تطبق هذه الدراسة الحقن المتكرر تحت الجلد من سكوبولامين لإنشاء نموذج فأر العين الجافة. نقوم بتحليل مؤشرات جفاف العين مثل عيوب القرنية ومستويات إفراز الدموع والتشكل المرضي للقرنية والملتحمة والغدة الدمعية. من خلال الجمع بين تركيز الدواء والمظاهر المرضية وأعراض جفاف العين ، فإننا نوضح بشكل أكبر نموذج فأر العين الجافة بالتفصيل ، مما يوفر بيانات تجريبية أكثر دقة لدراسة علاج جفاف العين والآليات المرضية. كما وصفنا عملية النمذجة بالتفصيل للباحثين في المستقبل.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.9% sodium chloride solution</td>
			<td>SJZ No.4 Pharmaceutical</td>
			<td>H13023201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4% paraformaldehyde</td>
			<td>Wuhan Servicebio Technology Co., Ltd</td>
			<td>G1113</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Absolute ethanol</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td>10009218</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescein sodium ophthalmic strips</td>
			<td>Tianjin Yinuoxinkang Medical Device Tech Co., Ltd</td>
			<td>YN-YG-I</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin and eosin</td>
			<td>Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute</td>
			<td>D006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral balsam</td>
			<td>Beijing Solarbio Science &#38; Technology Co., Ltd.&#160;</td>
			<td>G8590</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraffin</td>
			<td>Beijing Solarbio Science &#38; Technology Co., Ltd.</td>
			<td>YA0012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Periodic Acid-Schiff Staining Kit</td>
			<td>Beyotime Biotechnology</td>
			<td>C0142S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Schirmer tear test strips</td>
			<td>Tianjin Yinuoxinkang Medical Device Tech Co., Ltd</td>
			<td>YN-LZ-I</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scopolamine hydrobromide</td>
			<td>Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd</td>
			<td>S860151</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal microscope</td>
			<td>Head Biotechnology Co,. Ltd</td>
			<td>ZM191</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td>10023418</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a rat dry eye model with lacrimal gland dysfunction induced by scopolamine

جفاف العين المائي (ADDE) هو نوع من أمراض جفاف العين التي يمكن أن تؤدي إلى تقليل كمية ونوعية إفراز الدموع. يمكن أن يؤدي إنتاج الدموع غير الطبيعي لفترات طويلة إلى اضطراب في بيئة سطح العين ، بما في ذلك تلف القرنية والالتهاب. في الحالات الشديدة ، يمكن أن يسبب ADDE فقدان البصر أو حتى العمى. في الوقت الحالي ، يقتصر علاج جفاف العين على قطرات العين أو العلاج الطبيعي ، والذي يمكن أن يخفف فقط من أعراض عدم الراحة في العين ولا يمكنه علاج متلازمة العين الجافة بشكل أساسي. لاستعادة وظيفة الغدة الدمعية في جفاف العين ، أنشأنا نموذجا حيوانيا لخلل الغدة الدمعية في الفئران التي يسببها سكوبولامين. من خلال التقييم الشامل للغدة الدمعية والقرنيات والملتحمة وعوامل أخرى ، نهدف إلى توفير فهم كامل للتغيرات المرضية ل ADDE. بالمقارنة مع نموذج فأر العين الجافة الحالي ، يتضمن نموذج ADDE الحيواني هذا تقييما وظيفيا للغدة الدمعية ، مما يوفر منصة أفضل لدراسة خلل الغدة الدمعية في ADDE.

By 2021, approximately 12% of people are significantly affected by dry eyes1, making it one of the most common chronic eye diseases. Dry eye can be divided into two types: aqueous-deficient dry eye (ADDE) and evaporative dry eye (EDE)2, depending on the different factors that affect the disease. ADDE is further divided into Sj&#246;gren&#39;s syndrome (SS) and non-SS, but the majority of dry eye patients are non-SS patients in clinical3. Chronic dry eye symptoms seriously affect the visual quality of patients. Currently, the conventional treatment of DED involves the application of artificial tears to lubricate the ocular surface and physical therapy of the eyelids. However, dry eye syndrome may not offer a complete cure in many cases. Therefore, studying the pathogenesis of dry eye disease is crucial for the development of new therapies and drugs. Animal models of dry eye syndrome provide a foundation for further research.
There are many ways to construct animal models of dry eye syndrome4, including changing tear secretion levels by altering hormone levels. For example, removing the testes of rats can reduce androgen secretion, increase tear secretion, and decrease the concentration of free secretory component (SC) and IgA in tears5,6. Another method is to indicate autoimmune reactions in the lacrimal gland by removing the eye surface nerves that control the gland. Additionally, directly reducing tear secretion can be achieved by surgically removing the lacrimal gland7. Changing environmental conditions can also accelerate tear evaporation. For example, culturing animals in low humidity and dry ventilation conditions can establish a model of excessive evaporative dry eye8, which can be combined with other methods to increase the severity of dry eye. The main drugs used to induce dry eye experimental models are atropine and scopolamine9. As parasympathetic inhibitors, both can induce pharmacological blockade of cholinergic (muscarinic) receptors in the lacrimal gland and inhibit tear secretion. Compared with dry eyes caused by atropine muscle injection10, scopolamine has a stronger inhibitory effect on secretion glands, a longer duration of drug action, and weaker effects on cardiac, small intestinal, and bronchial smooth muscles. It is one of the most mature drugs for dry-eye animal models.
Different methods can be used to induce dry eye with scopolamine, such as subcutaneous injection, drug pump, or patch application4,11,12. In order to reduce the frequency of drug administration to experimental animals, many researchers apply transdermal patches to the tails of mice or use drug pumps. However, both of these methods have limitations. For example, the absorption of transdermal patches needs to take into account the individual absorption of mice, which can lead to inconsistent drug dosage. Although drug pumps can accurately control the dosage of each administration, they are not always compatible with the drug being delivered or the concentration being used. They also need to be placed surgically &#8211; which is more invasive to the animal, requiring an anesthetic event, and there is potential for post-surgical complications such as dehiscence. Subcutaneous injection, although more cumbersome, can ensure accurate dosage for each administration and maintain consistency in drug administration among different rats. At the same time, it has a lower cost and is suitable for conducting a large number of animal experiments.
This study applies repeated subcutaneous injection of scopolamine to establish a dry eye rat model. We analyze dry eye indicators such as corneal defects, tear secretion levels, and pathological morphology of the cornea, conjunctiva, and lacrimal gland. By combining drug concentration, pathological manifestations, and dry eye symptoms, we further elaborate on the dry eye rat model in detail, providing more accurate experimental data for the study of dry eye treatment and pathological mechanisms. We also describe the modeling process in detail for future researchers.

تسليط الضوء على المؤلف: التحديات في تطوير نماذج جفاف العين واتجاهات البحث المستقبلية

نموذج جفاف العين للفئران مع خلل في الغدة الدمعية الناجم عن سكوبولامين

The process of developing a dry eye animal model is a long one. It requires continuous subcutaneous injection of scopolamine in the hind legs of rice to suppress the secretion of the lacrymal gland in rice. So, experimenters need to have enough patience to administer the medication regularly over a long period of time.Our protocol is a very useful method that can created different degrees of dry eye models based on different drug concentrations. It can make it easiest for the future researchers to study the treatment of dry eye disease. Our team will continue to explore the field of lacrimal gland regeneration, very excited to work on reconstructing 3D and conducting transplantation experiments.Our ultimate goal is to develop more advanced and efficient treatment options for individuals suffering from dry eye syndrome.

اختبار شيرمر الأول ، SIT I تم قياس حجم دموع الفئران في الأيام 0 و 3 و 5 و 7 و 11 و 15 و 19 بعد بدء التجربة. أظهرت النتائج التجريبية أن إفراز الدموع لمجموعة سكوبولامين (مجموعة 2.5 ، مجموعة 5 ، مجموعة 7.5) ، مقارنة مع المجموعة الضابطة (مجموعة 0) ، انخفض بشكل ملحوظ ، وكان الفرق ذا دلالة إحصائية (P < 0.01...

Watch this Scientific Journal Video about A Rat Dry Eye Model with Lacrimal Gland Dysfunction Induced by Scopolamine at JoVE.com

هنا ، نقوم بإنشاء نموذج الفئران لخلل الغدة الدمعية لتوفير أساس لدراسة جفاف العين المائي.

Aqueous-deficient dry eye (ADDE) is a type of dry eye disease that can result in the reduction of tear secretion quantity and quality. Prolonged abnormal ...

عملية تطوير نموذج العين الجافة هي عملية طويلة. يتطلب الحقن المستمر تحت الجلد من سكوبولامين في الساقين الخلفيتين للأرز لقمع إفراز الغدة الدمعية في الأرز. لذلك ، يحتاج المجربون إلى الصبر الكافي لإدارة الدواء بانتظام على مدى فترة طويلة من الزمن.بروتوكولنا هو طريقة مفيدة للغاية يمكنها إنشاء درجات مختلفة من نماذج جفاف العين بناء على تركيزات مختلفة من الأدوية. يمكن أن يسهل على الباحثين في المستقبل دراسة علاج مرض جفاف العين. سيواصل فريقنا استكشاف مجال تجديد الغدة الدمعية ، متحمس جدا للعمل على إعادة بناء 3D وإجراء تجارب الزرع.هدفنا النهائي هو تطوير خيارات علاج أكثر تقدما وكفاءة للأفراد الذين يعانون من متلازمة العين الجافة.

a-rat-dry-eye-model-with-lacrimal-gland-dysfunction-induced

Research

JoVE Journal

Medicine

A Rat Dry Eye Model with Lacrimal Gland Dysfunction Induced by Scopolamine

1.3K Views.  Jinan University. عملية تطوير نموذج العين الجافة هي عملية طويلة. يتطلب الحقن المستمر تحت الجلد من سكوبولامين في الساقين الخلفيتين للأرز لقمع إفراز الغدة الدمعية في الأرز. لذلك ، يحتاج المجربون إلى الصبر الكافي لإدارة الدواء بانتظام على مدى فترة طويلة من الزمن.بروتوكولنا هو طريقة مفيدة ?...

Video: تسليط الضوء على المؤلف: التحديات في تطوير نماذج جفاف العين واتجاهات البحث المستقبلية

Aqueous-deficient dry eye (ADDE) is a type of dry eye disease that can result in the reduction of tear secretion quantity and quality. Prolonged abnormal tear production can lead to a disturbance in the ocular surface environment, including corneal damage and inflammation. In severe cases, ADDE can cause vision loss or even blindness. Currently, dry eye treatment is limited to eye drops or physical therapy, which can only alleviate eye discomfort symptoms and cannot fundamentally cure dry eye syndrome. To restore the function of the lacrimal gland in dry eye, we have created an animal model of lacrimal gland dysfunction in rats induced by scopolamine. Through the comprehensive evaluation of the lacrimal gland, corneas, conjunctivas, and other factors, we aim to provide a full understanding of the pathological changes of ADDE. Compared with the current dry eye mouse model, this ADDE animal model includes a functional evaluation of the lacrimal gland, providing a better platform for studying lacrimal gland dysfunction in ADDE.

Here, we establish a rat model of lacrimal gland dysfunction to provide a basis for the study of aqueous-deficient dry eye.