تصوير الكالسيوم الحي للطبقات العضوية المعوية البشرية المصابة بالفيروس باستخدام مؤشرات الكالسيوم المشفرة وراثيا

من خلال عملنا ، نهدف إلى فهم كيف تعطل الفيروسات الإشارات داخل ظهارة الأمعاء. نحن مهتمون بشكل خاص بفهم الطرق التي تقوم بها الخلايا المصابة بالفيروس بخلل تنظيم الخلايا المجاورة غير المصابة للمساهمة في التسبب في المرض. لقد اكتشفنا مؤخرا أن الخلايا المصابة بفيروس الروتا تطلق نبضات من ADP ، الذي يخلل تنظيم الخلايا المجاورة غير المصابة ويسهل انتشار الفيروس ويؤدي إلى تفاقم المرض.

في حين أن تصوير الكالسيوم يحظى بشعبية كبيرة في مجالات مثل علم الأعصاب ، إلا أنه لم يستخدم على نطاق واسع لدراسة البيولوجيا الظهارية أو علم الفيروسات. يقدم هذا البروتوكول نهجا لتكييف التقنيات الحالية والأنظمة النموذجية لدراسة إشارات الكالسيوم والأنسجة الظهارية الحية المصابة بالفيروس. من خلال هندسة المواد العضوية للتعبير عن مؤشرات الكالسيوم المشفرة وراثيا ، يسمح نهجنا بتصوير طويل المدى متسق وقابل للتكرار في نظام نموذجي يلخص التنوع الخلوي لظهارة الأمعاء البشرية.

نحن نهدف إلى فهم آثار إشارات الباراكرين البيورينرجية التي يسببها الفيروس لكل من المضيف والفيروس. سيحدد عملنا المستقبلي أيضا ما إذا كان هذا النوع من الإشارات محفوظا على نطاق واسع عبر الفيروسات الأخرى وما إذا كانت التأثيرات متشابهة.