تسليط الضوء على المؤلف: بروتوكول محسن للكشف عن الخلايا التائية الخاصة بالمستضد في رئتي الفأر باستخدام Tetramers

يدرس مختبرنا تطور الخلايا التائية CD4 في سياقات مختلفة من التسامح والمناعة. عبر مشاريعنا ، نحن مهتمون في المقام الأول بكيفية دفع التعرض للمستضد إلى تطوير مجموعات فرعية من النمط الظاهري للخلايا التائية التي تنشئ ذاكرة مناعية يمكنها تعزيز التسامح مع نفسها أو المناعة ضد مسببات الأمراض. لقد ركزنا مؤخرا على تطوير مجموعات فرعية من الخلايا التائية التنظيمية والذاكرة الموجودة في أنسجة الرئة.

تلعب هذه الخلايا التائية المقيمة في الأنسجة دورا مهما في تعزيز تحمل مولدات الضد الذاتية أثناء إصابة الأنسجة ، أو تعزيز الاستجابات الالتهابية لمسببات الأمراض أثناء الإصابة مرة أخرى. يتخصص مختبرنا في الدراسة المباشرة للخلايا التائية الخاصة بالمستضد ، ولكن كواشف رباعي الببتيد MHC المخصصة. هذا يسمح لنا بدراسة هذه الخلايا التائية دون استخدام نماذج TCR المعدلة وراثيا أو غيرها من التلاعبات التجريبية المعروفة بأنها تسبب القطع الأثرية التجريبية.

على الرغم من أنه يمكننا بسهولة تحديد الخلايا التائية الخاصة بمولد الضد باستخدام رباعيات الترامير ، إلا أن هذه الخلايا التائية غالبا ما تكون موجودة بترددات منخفضة للغاية ، خاصة عندما تكون في حالة ساذجة أو ذاكرة. من الصعب أيضا عزل هذه الخلايا التائية عن الأنسجة غير اللمفاوية حيث توجد غالبا بعد الاستجابة المناعية. في حين أن هناك العديد من البروتوكولات المعمول بها لعزل الخلايا التائية من رئتي الفأر ، فقد تم تحسين البروتوكول الذي نقدمه هنا للكشف اللاحق عن الخلايا التائية الخاصة بالمستضد منخفض التردد عن طريق تلطيخ رباعي.

ضمن هذا البروتوكول ، قمنا أيضا بتضمين خيارين لربط الأنسجة لاستيعاب موارد المكتبة بشكل أفضل. سيساعد بروتوكولنا الباحثين على توسيع استخدام tetramers للخلايا التائية الخاصة بالمستضد في أنسجة الرئة. سيؤدي ذلك إلى دراسات أكثر قوة في الجسم الحي لتطور الخلايا التائية ووظيفتها في الذاكرة المقيمة للأنسجة ، وهي موضوعات ذات أهمية كبيرة في هذا المجال.