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Immunology and Infection

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펩타이드를 이용한 생쥐 폐의 희귀 항원 특이적 T 세포 식별: 주요 조직적합성 복합체 테트라머

필기록

우리 연구실은 내성과 면역의 다양한 맥락에서 CD4 T 세포의 발달을 연구합니다. 프로젝트 전반에 걸쳐 우리는 주로 항원 노출이 자체에 대한 내성 또는 병원체에 대한 면역을 향상시킬 수 있는 면역 기억을 확립하는 T 세포의 표현형 하위 집합의 개발을 주도하는 방법에 관심이 있습니다. 최근에는 폐 조직에 존재하는 조절 및 기억 T 세포 subset의 개발에 중점을 두고 있습니다.

이러한 조직 상주 T 세포는 조직 손상 중 자기 항원에 대한 내성을 강화하거나 재감염 시 병원체에 대한 염증 반응을 촉진하는 데 중요한 역할을 합니다. 우리 연구실은 항원 특이적 T 세포에 대한 직접 연구를 전문으로 하지만 맞춤형 펩타이드 MHC 테트라머 시약입니다. 이를 통해 TCR 형질전환 모델이나 실험적 인공물을 유발하는 것으로 알려진 기타 실험적 조작을 사용하지 않고도 이러한 T 세포를 연구할 수 있습니다.

우리는 사량체로 항원 특이적 T 세포를 쉽게 식별할 수 있지만, 이러한 T 세포는 특히 미성숙 상태나 기억 상태에 있을 때 매우 낮은 빈도로 존재하는 경우가 많습니다. 또한 면역 반응 후 종종 존재하는 비림프 조직에서 이러한 T 세포를 분리하는 것도 어렵습니다. 쥐의 폐에서 T 세포를 분리하기 위한 몇 가지 확립된 프로토콜이 있지만, 여기에서 제시하는 프로토콜은 tetramer 염색에 의한 저주파 항원 특이적 T 세포의 후속 검출을 위해 최적화되었습니다.

이 프로토콜에는 도서관 자원을 더 잘 수용하기 위해 조직 결합에 대한 두 가지 옵션도 포함되어 있습니다. 당사의 프로토콜은 연구자들이 폐 조직의 항원 특이적 T 세포로 테트라머의 사용을 확대하는 데 도움이 될 것입니다. 이를 통해 이 분야에서 큰 관심을 끌고 있는 주제인 조직 거주 기억 T 세포 발달 및 기능에 대한 보다 강력한 생체 내 연구로 이어질 것입니다.

자사는 자기 비드 기반 T 세포 농축 및 펩타이드:주요 조직 적합성 복합체(MHC) 사량체를 통해 쥐 폐에서 희귀 항원 특이적 T 세포 집단을 분리하고 식별하기 위한 상세한 프로토콜을 제공합니다.

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