在小鼠体内的动态心电图记录

摘要

遥测心电图已成为一个必不可少的工具在评估心律失常和心脏猝死动物模型。在这里，我们提出了一个在长期的动态心电图监测在小鼠中的应用遥测心电图录音，逐步引导。

摘要

在小鼠体内的遥测心电图记录是必不可少的了解背后的机制性心律失常，传导障碍，心脏猝死。虽然体表心电图是利用短期测量波形的时间间隔，它是不实际的心率变异或捕获罕见的心律失常发作的长期研究。植入式心电遥测提供简单的植入手术，长期卧床小鼠电图的记录，并与多种动物的同步录音的可扩展性的优势。在这里，我们提出了动态心电图记录在小鼠植入遥测一步一步的指导。认真遵守无菌技术操作是必需的植入和记录的可能性，从几周到几个月的有利的生存结果。因此，植入式心电遥测是一个有价值的关键信息在日间的动物模型，如鼠标心脏电生理检测工具。

研究方案

1。遥测手术植入的制备

1. 插入鼠标心电图遥测之前，重要的是要确保遥测心电图是无菌的，在良好的工作秩序。通常是在无菌条件下由制造商提供新的遥测设备。可重复使用心电图遥测提供的设备是使用至少4个小时Tergazyme 1％溶液清洗。您可以用无菌水冲洗Tergazyme清洗后的遥测。此外，使用Wavicide - 01的消毒剂一夜之间消毒心电图遥测。请务必用无菌水冲洗消毒液植入到小鼠体内，48小时前。存放在无菌容器中。
2. 检查双方的导线和绝缘护套的完整性的遥测信息。开启遥测发射机使用磁铁在5厘米的遥测挥手，并测试一个AM广播电台，频率530信号。应强烈和明确的信号，并应不同强度和俯仰操纵的电线。记录型号，序号遥测，和心电图检查校准值。制造商通常建议的遥测应植入前24小时，为您的具体细节遥测说明书。在这个例子中，我们将使用数据科学国际（DSI）的遥测植入。
3. 可实现遥测导致准备削减负（白色）铅约为3.5厘米和2.5厘米积极的（红色）导致。这是在右胸负领先植入的最佳长度，并在左腹部积极的主导作用（见图2）。接下来，删除揭露7毫米的电线的绝缘护套。涂料用无菌的强力胶，如VET -债券，金属铅，然后将铅帽金属提示。这些上限将避免由于皮肤糜烂，导致安置。大约2-3毫米的金属丝应暴露电气传感本地心律。

2。手术植入的遥测

1. 为了在小鼠手术使用的无菌技术，您将需要无菌手套，无菌的悬垂性，和6-0普理灵缝线。您还需要消毒钳，以2对，1对钝剪刀，手术刀，针驱动程序。手术器械可能被加热到250摄氏度的玻璃珠灭菌消毒。可以肯定的消毒和清洗，以前使用前的遥测。
2. 首先使用3％异氟醚在0.5升/分钟100％O2感应鼠标麻醉，准备手术的鼠标。使用电热垫，如T型泵，循环温水，保持麻醉小鼠的温度。直肠探头可以监测温度，如果需要的话。当鼠标充分镇静，完全剃光鼠标电动快船的腹部和胸部。重新鼠标与异氟醚麻醉之前把鼠标一个恒定流管，平卧位，头对着，对你的尾巴。磁带加热手术台下来的老鼠的爪子。用酒精棉球擦拭腹部删除剃光头发和清洁术野。适用于三个单独大衣优碘棉签消毒腹部和胸部。验证正确的麻醉水平，通过鼠标上的指甲床施加压力。鼠标已经准备手术后，使用无菌手套，适用于无菌的悬垂性手术领域。
3. 腹腔遥测植入提供了运动生理学实验的优势。腹腔插入，开始用手术刀在皮肤上创建一个垂直的覆腹部正中切口长度大约2.5厘米的手术。仔细分离皮肤从底层的结缔组织，用钝剪刀。然后，创建一个在白线的垂直正中切口腹膜覆盖，大约1.5厘米长。此外，创建一个小的正上方（颅）腹膜切开，这将作为皮下插座导致腹膜洞。在手术的同时，保持手术部位的湿润，偶尔滴落到操作现场无菌生理盐水。
4. 插入右腹腔测距仪。优越的遥测孔插入钳和拉都导致通过铅孔，使他们从腹膜突起。连续使用6-0普理灵缝合关闭腹腔1.5厘米的垂直正中切口。

3。铅注入和关腹

1. 心电图信息被放置在导致II配置。率先与白色/透明鞘是否定的，是摆在左上腹。首先，创建一个鼠标的右上角胸部0.5厘米的皮肤切口。接下来，使用钝的剪刀，腹部切口，以创建一个隧道。通过隧道拉铅和使用6-0普理灵缝合锚导致胸肌。确保缝合的铅暴露部分的顶部，并创建一个良好的接触铅及相关肌肉之间的。使用第二个上述近端缝合，固定导致肌肉。关闭使用6-0普理灵缝合皮肤切口。
2. 正极（红色鞘）被放置在左腹部下方的左膜片及以下的心。铅是挂靠在底层6-0普理灵缝合腹膜组织，并应具有良好的接触与腹膜组织。另外一个切口在这一步不是必需的，因为导致植入的部位是接近垂直正中切口，因此可以很容易地与现有的外科手术领域的访问。注意：必须取消，以避免底层肠穿孔，腹膜组织。
3. 按顺序关闭腹部的筋膜和皮肤，用6-0层的普理灵。

4。术后护理

1. [1毫克/毫升]丁丙诺啡镇痛手术后立即给小鼠0.1毫升。让鼠标上加热垫手术恢复。如果鼠标已延长手术> 30分钟，或如果鼠标出现干燥，您可能会注入0.2-0.3毫升无菌生理盐水补液腹膜。对于继续手术后镇痛是标准的做法，提供与丁丙诺啡小鼠三天，每天两次，再根据需要每隔八小时。
2. 清洁用优碘酒精棉签，以避免手术后的刺激。记住记录的手术后的重量，随后确定手术后的健康。
3. 手术后8-24小时，给鼠标丁丙诺啡镇痛需要的时候，因为这将减轻疼痛和减少导致鼠标扣在手术后的网站放置失败。

5。代表性的成果

正确执行时，鼠标应该有关闭腹部切口皮下导致皮肤下。通常情况下，鼠标需要10-30分钟，从麻醉中恢复。它大约需要7-10天之前，老鼠已经完全从手术中恢复，手术后的重量损失和流动性正常化的恢复可见一斑。

从手术中最常见的并发症是通过皮肤的侵蚀，肢体导联在手术后第10天。坚持皮下导致皮下组织或腹膜，可避免这种常见的并发症。这种技术可避免松弛信息，创建的压力和对皮肤的摩擦，当鼠标ambulates。虽然不太常见，感染和败血症，可能会出现在无菌技术，或不完整的清洁使用遥测的错误。

心电图输出可能会被记录与数据采集软件，如数据科学国际（DSI），加上一个接收器矩阵。波形结果应包括一个明确界定的P波，表示心房去极化，而且也是一个QRS波，这标志着心室除极，在图3所示。良好的品质心电图跟踪应该有一个明确界定的P波前一个明确界定的QRS波以1:1的比例。应该有低背景信号和RR间隔应定期在野生型小鼠。质量差的心电图跟踪可能有模糊P或QRS波，或背景信号，这可能使后续的计算机分析困难。一个贫穷的心电图跟踪可能会被重新植入遥测信息，通常在一次固定。要重新植入遥测导致，在麻醉状态下放置鼠标，采用手术方法，使皮肤切口直接覆在问题导致。当铅访问，切割缝合固定带头，导致前锚再次领先移动到所需位置。最后，关闭与手术部位6-0普理灵。

图1：具有正面和负面信息的小动物遥测的一个例子。在一般情况下，红铅是正极，白铅是负极。每一个领导应该有裸露电线的绝缘护套，5-7毫米，和一个塑料皑皑的提示，从而阻止导致通过皮肤的侵蚀。

图2：卡通表现出适当的遥测植入网站上的鼠标。白色（负）导致植入老鼠的右上胸，和红色（正）导致放置在左侧腹部，遥测感官“导致了两个”配置。

图3：鼠标在正常的窦性节律的代表波形。 P波代表心房去极化，QRS波群代表心室除极。一个高品质的波形应该有一个明显的P波前以1:1的比例每个Q​​RS波群。

讨论

此过程的关键步骤是正确的清洗和小鼠生存手术前的准备。当遥测和鼠标手术部位被正确地清理，有一个更好的手术后的结果。此外，密切关注导致安置，减少手术后的皮肤糜烂。可能修改的技术包括替代的配置，以评估横向左心室壁功能（导致我的配置），或使用不仅为遥测心电波形分析，也超出了本文的范围温度，甚至血压分析[] 。心电遥测记录的一个替代的位置是皮下导致外部导线的位置?...

材料

Name	Company	Catalog Number	Comments
Steri 250 Bead Sterilizer	Inotech	IS-250
Blunt-Ended Scissors	Roboz Surgical Instruments Co.	RS-5980
Blunt-Ended Forceps (x2)	Roboz Surgical Instruments Co.	RS-5138
Veterinary Anesthesia Vaporizer	Surgivet	Isotec 4
T/Pump	Gaymar Industries	P/N11184-000
Propylene Blue Monofilament Suture	Ethicon Inc.	8718
Povodone Iodine, 10%	Equate	N/A
Alcohol Swabs	PDI	B339
Tergazyme	Alconox, Inc.	21837-118
Wavidicde-01	Medical Chemical Corporation	Wavicide-01
ECG Telemeter	DataSciences International	EA-F20