氨甲环酸治疗消耗性狨猴综合征的改良及支持措施

摘要

在这里，我们描述了氨甲环酸治疗消耗性狨猴综合征 （WMS，也称为炎症性肠病 （IBD） 样疾病）的改良治疗方法。我们还介绍了如何口服、皮下和静脉注射治疗药物。

摘要

消耗性狨猴综合征 （WMS） 是圈养普通狨猴 （Callithrix jacchus） 群体的一种严重疾病，与高死亡率相关。WMS 的具体原因尚不清楚，有效的治疗方法很少。之前，我们报道了一种氨甲环酸疗法联合支持措施是 WMS 的有效治疗方法。在本研究中，我们描述了修改后的方法：每周 5 次皮下注射 0.1 mL 5% 氨甲环酸，每周 3 次静脉注射 2.0 mL 氨基酸制剂，每周 3 次，5.0 mL 乳酸林格氏液与 0.1 mL 维生素制剂，每周 3 次皮下注射，以及每周 5 次口服 0.1 mL 铁制剂。我们还描述了如何通过大隐静脉静脉内施用溶液，并带有束缚动物的尖端，以及口服和皮下给药的详细方法。修改后的方法具有与原始 WMS 处理方法相当的效率。

引言

消耗性狨猴综合征 （WMS） 是一种严重的疾病，是圈养普通狨猴群落所特有的。主要症状是体重减轻、肌肉量减少、贫血、低白蛋白血症和慢性肠炎 1,2,3,4。一些研究报告说，60.5% 的安乐死圈养狨猴有慢性肠炎的证据 5,31-44% 的死亡与这种疾病有关⁶。这种疾病的高患病率需要其有效治疗。

2016 年，我们报道了氨甲环酸联合支持措施是 WMS⁷ 的有效治疗方法。此外，这种处理显着减轻了受 WMS 影响的狨猴的肠道蛋白丢失⁸。虽然最初的治疗方案肯定有效，但它包括一些高容量的静脉注射、高剂量的维生素制剂和日常约束。由于狨猴容易受到手捕捉和束缚，因此这些动作必须不那么频繁。因此，我们的目标是通过一些修改来减轻动物的负担。

在本文中，我们将提供修改后的方法：每周 5 次皮下注射未稀释的氨甲环酸（代替腹膜内注射 5 倍稀释的氨甲环酸溶液，每周 7 次），静脉注射 2.0 mL 氨基酸制剂（代替 3.0 mL），皮下注射维生素 0.1 mL（代替 0.5 mL）， 和每周 5 次口服铁制剂（而不是每周 7 次）。

研究方案

本研究经 RIKEN（日本埼玉县）动物实验委员会批准 （W2023-2-041） 进行，并根据动物实验机构指南进行。在本研究中，使用了 6 只雌性狨猴 （2-6 岁）。

1. 开始治疗的标准

1. 当符合以下任何一项标准时开始治疗： i） 体重< 300 克或每月体重减少 >20 克;ii） 低白蛋白血症（血清白蛋白 < 3.8 g/dL）;iii） 贫血（血细胞比容< 35%）;iv） 无 艰难梭菌、肠致病性 大肠杆菌或肠道原生动物的慢性腹泻;v） 肌肉质量明显减少。
   注意：由于脱水和随后的血液浓缩伴随着 WMS，受影响动物的血清白蛋白和血细胞比容值可能会人为升高。

2. 口服

1. 将 0.1 mL 铁制剂（参见 材料表）与一块海绵蛋糕混合。
2. 将土豆泥喂给处理过的狨猴。
   注意： 确保处理过的狨猴已完全吞下醪糟。

3. 皮下给药

1. 轻轻握住尾巴，将受 WMS 影响的狨猴捕捉到家笼中。
2. 用另一只手从后面握住动物的上半身。
3. 将动物带到治疗室。
4. 让动物紧贴助手的胸部或手臂。
5. 用酒精棉签清洁动物的背部区域。
6. 使用 0.1 G 针头将 26 mL 氨甲环酸（5% 溶液，参见 材料表）皮下注射到背部，每周 5 次。
7. 使用 5.0 G 针头皮下注射 0.1 mL 乳酸林格氏液（见 材料表）和 26 mL 维生素制剂（见 材料表），每周 3 次。
   注意：每次注射应在 1 分钟内在每个不同的位置进行。

4. 氨基酸制剂的静脉给药

1. 轻轻握住尾巴，将受 WMS 影响的狨猴捕捉到家笼中。
2. 用另一只手从后面握住动物的上半身。
3. 将动物带到治疗室。
4. 让助手握住双臂的根部来约束动物的上半身，用另一只手握住双腿的根部来约束下半身。让助手将束缚动物下半身的拇指放在动物膝盖的前侧，以防止其弯曲。
5. 用酒精棉签清洁动物的小腿。
6. 使用 2.0 G 蝶形针每周 3 次，通过大隐静脉静脉注射 27 mL 氨基酸制剂（参见 材料表）。
   注意：注射必须尽可能缓慢地进行，最长可达 2 分钟。
7. 注射后，让助手用脱脂棉按压该区域，直到出血停止。

5. 体重测量

1. 治疗后（静脉内和/或皮下注射），每周用手提箱称量动物体重以监测体重。
   注意：大约在同一时间称量狨猴的体重，因为体重会受到食物存在的影响。

6. 全血细胞计数 （CBC） 分析和血清化学测试

1. 轻轻握住尾巴，将受 WMS 影响的狨猴捕捉到家笼中。
2. 用另一只手从后面握住动物的上半身。
3. 将动物带到治疗室。
4. 让助手握住双臂的根部来约束动物的上半身，用另一只手握住任一条腿的根部来约束下半身。
5. 请医生握住没有束缚的动物腿。
6. 用酒精棉签清洁动物的腹股沟区域。
7. 每月使用 0.4 G 针头从股静脉收集 26 mL 血液。
8. 使用 0.05 mL 血样进行 CBC 分析，包括血细胞比容。
9. 让其余的血样在室温下静置 1 小时，并以 1,800 × g 离心 20 分钟。
10. 使用血清进行化学测试，包括白蛋白。
    注：通过尽量减少血清化学测试的参数数量，可以减少血样的体积。根据个体狨猴的情况调整血样的体积。

讨论

2016 年，我们报道了氨甲环酸联合支持措施是 WMS 的有效治疗方法，这是第一篇证明 WMS 治疗不使用糖皮质激素的报告。在人类中，糖皮质激素被认为是治疗 IBD 最有效的药物。然而，普莱多唑酮是最常用的糖皮质激素之一，由于其不良反应，不适合 WMS 治疗。尽管据报道，布地奈德是一种糖皮质激素，用于治疗 WMS⁹，但该疗法对急性 WMS 的动物相对无效。氨甲环酸是一种具有抗炎作用的纤溶酶抑制剂，在我们原来的方法中没有发现明显的副作用。然而，尽管最初的治疗方案肯定有效，但它给动物和护理人员带来了沉重的负担。

在本研究中，进行了改良的 WMS 治疗方法，以减少动物的生理负荷和照顾者的工作量。在改良的方法中，氨甲环酸的给药途径发生了变化 （从腹膜内到皮下），这有助于降低腹部器官损伤的风险。在本实验步骤中未稀释氨甲环酸溶液，以降低污染风险和制备时间。在原始方法中，静脉注射 3.0 mL 氨基酸制剂。然而，体积有点大，因为建议以 5.0 mL/kg 作为¹⁰ 次推注给药。因此，在修改后的方法中体积减小。

该方案中使用的维生素制剂含有维生素 B 和 C。在原始方法中，0.5 mL 的维生素制剂含有 2.5 mg 盐酸硫胺素，是实验室饲养的断奶后非人灵长类动物所需量的 2.5 倍¹¹。在本方法中，施用 0.1 mL 维生素制剂，其中含有 1.0 mg 盐酸硫胺素。在改良的方法中，铁制剂和氨甲环酸溶液的给药频率降低，这有助于减轻动物和护理人员的负担。

如代表性结果部分所述，修改后的方法具有显著的处理效果。平均治疗期限为 37.8 ± 25.34 d，短于原始方法 （56 d）。由于狨猴对精神压力敏感，因此长期治疗对动物产生相反的效果，例如食欲下降。因此，我们建议护理人员不仅应根据每个参数的值，还应根据动物的行为来全面决定治疗终止的时间。

材料

Name	Company	Catalog Number	Comments
1.0 mL Syringe	Terumo Corporation, Tokyo, Japan	SS-01T	For subcutaneously injection of Tranexamic acid
10 mL Syringe	Terumo Corporation, Tokyo, Japan	SS-10SZ	For Intravenous Administration of Amino acid formulation
26 G Needle	Terumo Corporation, Tokyo, Japan	NN-2613S	For subcutaneously injection
27 G Butterfly Needle Type D	Terumo Corporation, Tokyo, Japan	SV-27DL	For Intravenous Administration of Amino acid formulation
5 mL Syringe	Terumo Corporation, Tokyo, Japan	SS-05SZ	For subcutaneously injection of Ringer's lactate and Vitamin formulation
Aminoleban Injection	Otsuka Pharma Factory Inc., Tokyo, Japan	1942	For subcutaneously injection of Ringer's lactate and Vitamin formulation
C-PARA	Takata Pharma Co., Ltd., Saitama, Japan	120-31960-0	Vitamin formulation
FCV Liquid	Minerva Corporation, Saitama, Japan		Iron formulation
Lactec Injection	Otsuka Pharma Factory Inc., Tokyo, Japan	0714	Ringer’s lactate
Vasolamin Injection	Meiji Seika Pharma Co., Ltd., Tokyo, Japan	DBASOS	Tranexamic acid