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Method Article
描述了使用自体血凝块建立肺栓塞微创大鼠模型的详细方法。还提供了量化梗死区域和可视化肺动脉树的其他方法。
肺栓塞 (PE) 是心血管死亡的主要原因之一,导致沉重的社会经济负担。尽管目前的治疗主要集中在抗凝和溶栓上,但迫切需要更好地了解其病理生理学并开发新的治疗策略。动物模型在了解 PE 和开发针对该疾病的新疗法方面发挥着至关重要的作用,出于道德和成本考虑,通常使用啮齿动物。然而,现有的 PE 啮齿动物模型受到缺乏标准化程序的限制,这阻碍了可重复性和交叉研究比较。本研究旨在建立使用自体血栓的微创大鼠 PE 模型。该模型采用微创采血技术、标准化血栓生成程序和微创静脉通路。此外,还提供了量化梗死区域和可视化肺动脉树的方案。这些程序旨在提高用于研究 PE 进展的啮齿动物模型的可靠性,并促进新疗法的开发。
肺栓塞 (PE) 是院内死亡的主要原因,也是心血管死亡的第三大常见原因。尽管发病率高,但预防和及时诊断仍然具有挑战性 1,2。抗凝和溶栓疗法对于治疗 PE 至关重要,但更深入地了解疾病进展和新的治疗方法对于改善疾病管理至关重要3。
在现代生物医学研究中,动物模型在阐明人类疾病机制和开发新疗法方面发挥着关键作用 4,5。出于道德考虑和成本效益,小鼠、大鼠、仓鼠和兔子经常用于 PE 建模 6,7,8,9,10。PE 建模方法通常分为三类:体内血栓形成、体外血凝块注射和非血栓形成颗粒的给药。动物物种和建模技术的选择取决于具体的研究目标,因为没有一个模型适合所有目的。例如,专注于探索新的溶栓疗法的研究通常采用涉及自体血栓而不是非血栓颗粒的模型。
由于缺乏详细的标准化方法,当前对啮齿动物 PE 进行建模的方法面临挑战。这会影响关键过程,例如血液采样、血凝块形成和随后的栓塞,所有这些都对于确保研究结果的可重复性至关重要。此外,在量化栓塞面积和准确绘制栓塞后栓子分布的能力方面存在很大差距。解决这些缺点对于提高啮齿动物模型在 PE 研究中的可靠性和实用性至关重要。
在这项研究中,描述了使用自体血凝块建立大鼠 PE 模型的详细方案。该模型采用微创采血技术、标准化血栓生成程序和微创静脉通路。此外,还提供了量化肺部梗塞区域和可视化肺动脉树的方案,这可能有助于进一步的研究发现。
所有动物实验均经中国医学科学院和北京协和医学院动物护理和使用委员会批准进行(批准编号:IRM/2-1ACUC-2311-015)。本研究使用雄性 Sprague-Dawley 大鼠,6 周龄,体重约 250 g。这些动物被安置在特定的无病原体环境中,可以随意获得均衡的食物饮食和水。将它们在 22 °C ± 2 °C 的室温下保持 12 小时的光照/黑暗循环。 在接受任何外科手术之前,让动物适应环境 1 周。本研究中使用的试剂和设备的详细信息列在 材料表中。
1. 设备和材料
2. 自体血凝块制备
3. 静脉通路准备
4. 栓塞
5. 梗死面积的定量
6. 肺动脉树的可视化
PE 模型的症状和病理
栓塞过程中,大鼠出现呼吸急促,胸部波动扩大。当注射少于 10 cm 的血凝块时,几乎所有动物都在肺栓塞发作中幸存下来(15 只建模动物中有 14 只)。被送回笼子后,这些动物蜷缩在角落里,对食物和水的兴趣降低。然而,这些症状很快就消退了,几个小时内,动物的行为就恢复正常了。基线和栓塞后 24 小时的体重没有显着差异 (34...
在这项研究中,成功建立了使用自体血凝块的 PE 微创大鼠模型。掌握后,此建模过程可在 30 分钟内完成。该模型有效地捕捉了临床 PE 的关键特征,经病理检查证实。因此,它为阐明 PE 后并发症的血流动力学变化和发病机制、开发新的诊断生物标志物和治疗靶点以及测试新的抗血栓治疗提供了有价值的工具。
几十年来,人们为开发 PE 动物模型做出?...
作者声明没有利益冲突。
这项研究得到了吴阶平医学基金会 (320.6750.19089-36) 的资助。
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Analytical balance | METTLER TOLEDO | MA55/A | None |
Dispensing needle | Jinrong electronics | None | 19 G and 18 G |
Fine scissors | Stronger | XGJ1300 | None |
Heparin sodium salt | Solarbio | 01-08-9041 | 140U/mg |
Isoflurane | RWD | R510-22-10 | None |
Methyl salicylate | Macklin | M813577 | AR, 99% |
Micro clamp | JZ | W40160 | None |
Micro tweezers | Stronger | XGN1310 | None |
Silicone casting compound | Flow Tech | MV-130 | None |
Sprague-Dawley rats | Vital River | SD-IGS | None |
Stereo microscope | Murzider | MSD204 | None |
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