このコンテンツを視聴するには、JoVE 購読が必要です。 サインイン又は無料トライアルを申し込む。
Method Article
自家血栓を使用した肺塞栓症の低侵襲ラットモデルを確立するための詳細な方法論について説明します。梗塞領域を定量化し、肺動脈樹を視覚化するための追加の方法も提供されています。
肺塞栓症(PE)は、心血管死の主な原因の1つであり、重大な社会経済的負担をもたらします。現在の治療法は主に抗凝固療法と血栓溶解療法に焦点を当てていますが、その病態生理学の理解を深め、新しい治療戦略の開発が急務となっています。動物モデルは、PEを理解し、この疾患の新しい治療法を開発する上で重要な役割を果たしており、倫理的およびコスト上の考慮事項からげっ歯類が一般的に使用されています。しかし、PEの既存のげっ歯類モデルは、標準化された手順がないために限られており、再現性や研究間の比較が妨げられています。この研究は、自家血栓を使用したPEの低侵襲ラットモデルを確立することを目的としています。このモデルは、低侵襲採血技術、標準化された血栓生成手順、および低侵襲静脈アクセスを特徴としています。さらに、梗塞領域を定量化し、肺動脈樹を視覚化するためのプロトコルが提供されます。これらの手順は、PEの進行を研究するためのげっ歯類モデルの信頼性を向上させ、新しい治療法の開発を促進することを目的としています。
肺塞栓症(PE)は、院内死亡の主な原因であり、心血管死の3番目に多い原因です。その高い発生率にもかかわらず、予防と迅速な診断は依然として困難です1,2。PEの治療には抗凝固療法と血栓溶解療法が重要ですが、疾患の進行と新しい治療アプローチをより深く理解することは、疾患管理を改善するために不可欠です3。
現代の生物医学研究では、動物モデルはヒトの疾患のメカニズムを解明し、新しい治療法を開発する上で極めて重要な役割を果たしています4,5。マウス、ラット、ハムスター、およびウサギは、倫理的配慮と費用対効果のために、PEモデリングで頻繁に使用されます6,7,8,9,10。PEモデリングアプローチは、一般に、in vivo血栓形成、in vitro血栓注射、および非血栓性粒子の投与の3つのカテゴリに分類されます。動物種とモデリング技術の選択は、特定の研究目的によって決定され、単一のモデルがすべての目的に適しているわけではありません。例えば、新しい血栓溶解療法の探求に焦点を当てた研究では、非血栓性粒子の代わりに自家血栓を含むモデルがよく採用されています。
げっ歯類のPEをモデル化する現在の方法は、詳細で標準化された方法論が不足しているため、課題に直面しています。これは、採血、血栓形成、その後の塞栓術などの主要なプロセスに影響を及ぼし、これらはすべて、研究間で再現性のある結果を確保するために重要です。さらに、塞栓された領域を定量化し、塞栓後の塞栓の分布を正確にマッピングする能力には大きなギャップがあります。これらの欠点に対処することは、PE研究におけるげっ歯類モデルの信頼性と有用性を向上させるために不可欠です。
この研究では、自家血栓を使用してPEのラットモデルを確立するための詳細なプロトコルについて説明します。このモデルは、低侵襲採血技術、標準化された血栓生成手順、および低侵襲静脈アクセスを特徴としています。さらに、肺の梗塞領域を定量化し、肺動脈樹を視覚化するためのプロトコルが提供されており、さらなる研究発見を促進する可能性があります。
すべての動物実験は、中国医学院および北京連合医科大学の動物管理および使用委員会の承認を得て行われました(承認番号:IRM/2-1ACUC-2311-015)。この研究では、生後6週間、体重約250gの雄のSprague-Dawleyラットを使用しました。動物は、バランスの取れた食事と水を自由に利用できる特定の病原菌を含まない環境で飼育されました。室温22°C±2°Cで12時間の明暗サイクルで保管しました。 動物は、外科的処置を受ける前に1週間環境に適応することが許されました。本試験で使用した試薬および装置の詳細は、 材料表に記載されています。
1. 設備・資材
2. 自家血栓製剤
3. 静脈アクセスの準備
4.塞栓術
5. 梗塞領域の定量化
6. 肺動脈樹の可視化
PEモデルの症状と病理
塞栓術中、ラットは息切れを経験し、胸部は変動が拡大しました。肺塞栓症のエピソードでは、投与された血栓が10cm未満であったため、ほぼすべての動物が生存した(モデル化された動物15匹中14匹)。ケージに戻された後、動物たちは隅で丸くなり、食べ物や水への興味が薄れました。しかし、これらの症状はすぐに治まり、数時...
この研究では、自家血栓を使用したPEの低侵襲ラットモデルを確立することに成功しました。このモデリング手順をマスターすれば、30分以内に完了することができます。このモデルは、病理学的検査によって確認されたように、臨床PEの主要な特徴を効果的に捉えています。その結果、PE後の合併症の血行動態変化と病因を解明し、新しい診断バイオマーカーと治療?...
著者は、利益相反を宣言しません。
この研究は、Wu Jieping Medical Foundation(320.6750.19089-36)からの助成金によってサポートされています。
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Analytical balance | METTLER TOLEDO | MA55/A | None |
Dispensing needle | Jinrong electronics | None | 19 G and 18 G |
Fine scissors | Stronger | XGJ1300 | None |
Heparin sodium salt | Solarbio | 01-08-9041 | 140U/mg |
Isoflurane | RWD | R510-22-10 | None |
Methyl salicylate | Macklin | M813577 | AR, 99% |
Micro clamp | JZ | W40160 | None |
Micro tweezers | Stronger | XGN1310 | None |
Silicone casting compound | Flow Tech | MV-130 | None |
Sprague-Dawley rats | Vital River | SD-IGS | None |
Stereo microscope | Murzider | MSD204 | None |
このJoVE論文のテキスト又は図を再利用するための許可を申請します
許可を申請This article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2023 MyJoVE Corporation. All rights reserved