首先，穿戴个人防护设备，包括护目镜、外科口罩和非乳胶手套。在EGM中制备20毫升小鼠神经母细胞瘤或BHK-21细胞，浓度为3.0乘以每毫升10至第五个细胞。将准备好的细胞保持低温，直到它们准备好使用。
接下来，通过在 EGM 中稀释来制备 CVS-11 病毒。确保在使用前将准备好的病毒保持低温。用70%乙醇清洁湿度载玻片室和聚四氟乙烯涂层的孔显微镜载玻片，并让它们在生物安全柜中风干。
清洁后，将蒸馏水添加到载玻片室的吸水纸条中，以确保整个过程中恒定湿度。使用铅笔在每张载玻片上贴上所需的识别信息，例如批号、日期和细胞类型。将贴有标签的载玻片放入载玻片室中存放。
然后使用重复移液管将50微升病毒稀释液应用于显微镜载玻片上的孔中。将 50 微升细胞稀释液涂抹到每个孔中，注意不要用孔中已有的病毒污染移液器吸头。之后，关闭湿度载玻片室并将其置于 34 至 36 摄氏度的潮湿培养箱中。
接下来，从湿度室中取出载玻片并小心地吸出上清液。在 PBS 填充的 coplin 罐中清洗载玻片两分钟，然后让它风干。将载玻片放入冷的丙酮填充的coplin罐中以固定样品。
将罐子放入经批准用于易燃材料的零下 20 摄氏度冰箱中至少一小时。一旦丙酮蒸发并且载玻片干燥，将狂犬病直接荧光抗体偶联物涂在载玻片的孔中，并在 34 至 36 摄氏度的潮湿培养箱中孵育载玻片 30 分钟。然后在PBS的coplin罐中洗涤载玻片两次，每次两分钟。
风干载玻片，并用 0.05 摩尔 triss、0.15 摩尔氯化钠在 20% 甘油封片剂中安装盖玻片。使用200倍放大倍率的荧光显微镜评估细胞感染性。接下来，从培养箱和湿度室中取出剩余的载玻片。
小心地从每个孔中吸出上清液。然后将载玻片放入装有 PBS 的 coplin 罐中一到两分钟。让载玻片风干约 30 分钟，然后将它们存放在零下 80 摄氏度直至使用。
