从小鼠脑室下区衍生的神经干细胞获得的神经球的扩增

为了传代从神经元脑室下区分离的神经干细胞获得的神经球，请从多孔板中收集含有神经球的培养基，并将其转移到 15 毫升离心管中。以 300 G 离心神经球 5 分钟，去除上清液后，向沉淀中加入 200 微升酶溶液，轻轻敲击管底使其脱落。在室温下孵育 10 分钟，以促进神经球解离。

然后加入 1 毫升对照培养基以终止酶促反应。使用 P 1000 微量移液器上下移液 10 至 20 次，机械解离神经球。加入额外体积的 4 mL 对照培养基，倒置混合以洗涤细胞。

在去除上清液之前，将细胞以 300 G 离心 5 分钟。加入 1 毫升完全培养基并重悬沉淀，通过上下吹打 10 次使细胞悬液匀浆。用一份台盼蓝稀释一份等分试样的细胞悬液后，使用 Neubauer 腔室对细胞悬液进行计数。

为了扩增培养物，使用完全培养基在适当的培养板或培养瓶中使用完全培养基，以每平方厘米 10， 000 个细胞的密度接种细胞。