Выделение, экспансия и нуклеофекция нейральных стволовых клеток из субвентрикулярной зоны взрослой мыши

Наше исследование сосредоточено на изучении того, как регулируется популяция нейральных стволовых клеток в мозге взрослого млекопитающего. Понимание внутренних и внешних молекулярных механизмов, которые регулируют нейральные стволовые клетки в нейрогенных нишах, важно для понимания биологии и разработки будущих потенциальных терапевтических применений. Для изучения поведения нейральных стволовых клеток широко используются подходы как in vivo, так и in vitro.

Культуры нейральных стволовых клеток in vitro обеспечивают контролируемую среду и возможность легко манипулировать и контролировать эту популяцию клеток. Методы сохранения экспрессии генов in vitro представляют собой универсальный подход к изучению молекулярных механизмов, управляющих клеточной биологией. Тем не менее, эффективный и воспроизводимый метод сверхэкспрессии и подавления генов-кандидатов в нейральных стволовых клетках все еще остается сложной задачей в этой области.

Традиционные методы трансфекции для доставки генов доказали свою эффективность в клетках центральной нервной системы. Более того, эти методы влияют на жизнеспособность и функциональность клеток. Таким образом, совершенствование альтернативных подходов имеет решающее значение для манипулирования экспрессией генов в нейральных стволовых клетках.

С помощью этого протокола мы представляем усовершенствованную систему нуклеофекции, которая обеспечивает высокую эффективность доставки генов в культурах нейральных стволовых клеток из субвентрикулярной зоны взрослой мыши, а также выживаемость выше 80%