裂解荧光素酶重组测定法测量活细胞中内质网-线粒体接触

在我的实验室中，我们研究采用膜接触形式的器官间通讯及其在维持细胞健康以及疾病发病机制中的作用。我们对线粒体和内质网之间的膜接触特别感兴趣，并试图了解它们如何受到调节以及它们的失调如何导致神经退行性变。尽管我们知道 ER 线粒体接触对细胞健康很重要，并且它们的失调与许多疾病有关，但我们对其水平是如何调节的知之甚少。

解决这个问题的第一步是建立一个简单、可靠的方案来测量细胞中 ER 线粒体接触的水平。与大多数检测相比，我们的分流荧光素酶检测提供了一种更简单、更快速的方法来定量活细胞中的 ER 线粒体接触。我们利用海肾荧光素酶的两半，一半靶向 ER，另一半靶向线粒体。

只有在 ER 和线粒体膜紧密接触的地方，它们才能重新组装在一起，这导致重组的荧光素酶具有完整的酶活性。该方法简单，适用于高通量筛选，并且易于许多实验室使用。我们希望它能通过鉴定 ER 线粒体接触的分子和遗传调节剂来推动神经退行性疾病领域的发展，这些调节剂可以进一步开发成治疗剂。

我们的结果为重要问题铺平了道路，例如不同的药物或药物组合如何影响 ER 线粒体接触，以及这些接触背后的重要分子参与者是什么。从这些问题中，我们可以更好地了解 ER 线粒体接触的机制，并找到对抗相关疾病的方法。