Hoechst 染色小鼠骨髓细胞的流式细胞术使用高功率 375 nm 和 405 nm 激光器有效检测侧群

首先，用 Hoechst 33342 对小鼠骨髓细胞进行染色。对于流式细胞术，启动所需的软件，然后选择 QC 标准化。将质控品或 QC FluoroSphere 样品管插入试管架中，然后选择 Start（开始）开始 QC 程序。

要创建新实验，请单击 File 菜单中的 New Experiment 并指定文件路径并保存实验。然后在 Settings 菜单中选择 Set Channel 。选中通道信号复选框，然后在标签列中添加试剂名称。

接下来，单击绘图区域中的伪彩色绘图图标以创建绘图。单击试管屏幕中的添加试管以创建新的样品管并更改其名称。然后选择 Run （运行） 以加载样品，查看图并建立门。

调整增益和阈值设置，然后选择 Record 以保存数据。要设计浇口设置逻辑，请单击 x 轴选择 FSEW，然后单击 y 轴选择 FSEA。选择 Polygon Gate 以绘制门 A 以环绕单个单元并排除粘附单元。

对于第二个图，点击 x 轴选择 FSEA，然后点击 y 轴选择 SSEA。选择 Polygon Gate 以绘制门 B 以分离非碎片细胞并排除细胞碎片。对于第三个图，单击 x 轴以选择 PIA，然后单击 y 轴以选择 SSEA。

绘制门 B 后，选择显示负碘化丙啶的活细胞并绘制门 C 以获得活细胞。对于第四个二维图，点击 x 轴选择 Hoechst Red，然后点击 y 轴选择 Hoechst Blue。右键单击该图，然后从下拉菜单中选择 Property 。

为 x 轴和 y 轴选择线性格式，并为侧群细胞绘制门。同时使用 355 纳米和 405 纳米激光器检测对照细胞和实验细胞。在对应于两个激光器的 690 x 50 和 450 x 50 纳米通道处采集荧光信号。

观察 Hoechst 33342 染料用 355 和 405 纳米激光的有效刺激，以可视化透明的侧群细胞。对于相同的样品，使用 375 纳米和 405 纳米激光器进行细胞检测。355 纳米激光有效地激发了 Hoechst 33342 染料，从而可以清晰地观察到骨髓的 SP 细胞。

发现 355 纳米激光和 405 纳米激光检测到的相同样品的 SP 细胞基本相同。375 纳米和 405 纳米激光器都有效地激发了 Hoechst 33342 以获得 SP 细胞。