首先,取保存在塑料袋中的接种过口腔溃疡病的杨树叶。小心地去除叶子上的塑料保护膜,然后轻轻地从叶子表面去除菌丝体接种剂。通过检查坏死斑点的形状和颜色,观察和鉴定每个杨树克隆的叶子病理型。
然后将叶子放在黑色背景上的尺子中。用相机拍摄叶子的下表面,或使用扫描仪扫描它们以获得分辨率超过每英寸 300 点的图像。在软件 ImageJ 1.54G 中打开病叶的图像。
根据叶图像中可见的标尺在 ImageJ 中设置比例。然后使用 ImageJ 中的魔杖工具,识别叶子上的病变并测量每个坏死点的面积。测量完所有坏死点后,记录面积值并将这些值导出为电子表格以供进一步分析。
如果菌丝体覆盖的对等部位周围的病变明显大于 PDA 覆盖部位周围的病变,请将它们归类为疾病部位。如果菌丝体覆盖的对等部位显示病变颜色、菌丝样结构、菌丝状结构、分生孢子和分生孢子等变化,则将其定义为疾病部位。计算每个杨树杂交克隆的有效 PDA 病变点的平均面积。
将菌丝体接种点分为两类,起始和非起始。然后计算受试杨树无性系病害发病率。计算叶子上病斑的平均面积。
根据所有供试杨树无性系病斑的平均面积,设定五级病害分级标准。使用五级病害分级标准计算每个杨树无性系的病害指数。接下来,使用 Shapiro-Wilk 检验,验证杨树无性系数量在不同抗性水平上的正态分布。
根据疾病指数,将所有测试的杨树无性系分为 5 或 7 个抗性组。非常高的电阻、高电阻、电阻、无电阻、无磁化、磁化、高磁化、极高磁化。接种茎溃疡病病原体诱导坏死病变,甚至在杨树叶上形成 pycnidia 样结构。
此外,叶子的位置和光照条件会影响叶子的疾病严重程度。