按照国家机构的研究和所有动物协议的俄勒冈卫生科学大学的体制的动物护理和使用委员会批准的护理和使用动物的健康指引所述的所有程序进行。 1。手术准备<ol><li>称量鼠标。描述的过程进行C57BL / 6小鼠体重20至25克使用3-4％的异氟醚诱导麻醉诱导，并随后保持1.5-2.5％异氟醚在空气/氧气混合。 </li><li>润滑眼睛的位置上加热垫的动物仰卧。用胶布固定4四肢。后腿的爪子可能是在一个中立的位置录音，但是，前爪应该得到保护尽可能靠近胸壁允许在胸外按压胸壁游览。 </li><li>润滑和地方直肠温度探头。温度控制采用加热垫和灯连接到电子温度控制器（从DIGI -感，科尔帕默，弗农山白细胞介素），这是保持37.0 ° C。因为它可能是动物内的温度梯度发展在无流量状态，重要的是，温度进行测量和控制利益器官附近的。 </li><li>使用一个2.5厘米22 GA聚四氟乙烯导管（Insyte W，屋宇署，新泽西州富兰克林）和切割的角度介绍人（Frova介绍人，库克医疗，布卢明顿IN）的末端插管气管。气管插管的其他方法是可以接受的的，但是，使用的角度介绍人允许在一个位置略有延长，优化放置静脉留置针的手术暴露颈部的正确定位。气管导管枢纽的安全与缝合门齿的循环，并保持轻微的张力固定在胸外按压头部。 </li><li>机械通风与鼠标设置为140μL，150次/分钟的啮齿类动物呼吸。这是不调整的体重总是在20-25克动物作为本议定书的执行。不要过度加深麻醉。不要设置呼吸机申请结束，因为这损害复苏呼气压力。 </li><li>使用无菌技术和手术显微镜，前刷新PE - 10导管在颈内静脉。一方可能被使用，但使用最接近经营者的一侧，减少导管移位在胸外按压或其他操作的机会。 0.5％布比卡因，0.1毫升到伤口边缘是infitrated控制术后疼痛。 </li><li> PE - 10导管固定到皮肤缝合与手术氰基丙烯酸酯胶粘剂。 </li><li>放置皮下心电图电极，并连接到监控设备。仔细留意的信号路径和信号本身的最大化，是复苏成功的关键。确保所有电线固定作业面，尽量减少信号口岸，并尽量减少信号路径内的绝缘体（如空气空心针或绞线）。 nonstranded导线连接的固体针可购买或在实验室中制成。一旦连接，优化心电图信号在监视器上。 </li></ol> 2。心脏骤停<ol><li>确保鼠标是常温下的定义，直肠温度36.5 ° C - 37.5 ° C。管理40μL室温0.5 M的氯化钾静脉注射和心电图跟踪观察等电。体重调整剂量是没有必要的范围内20-25克。开始逮捕定时器。 </li><li>断开呼吸机。停止麻醉蒸汽。关闭电热垫和任何其他设备产生的电子噪音，可能会干扰心电图监测。鼠标放在一个绝缘毯。 </li><li>记录温度每分钟心脏骤停期间。如果有必要，加热灯可用​​于把核心温度常温范围。在心脏骤停，准备用品和设备（例如，肾上腺素注射器）复苏。可以帮助一个清单，以确保不间断的复苏，这是生存所必需的。 </li><li> 7分钟后，心脏骤停30秒，重新呼吸机和180次/分，增加的速度保持在逮捕前设置的潮气量。 </li><li>在第8分钟，300 BPM开始胸外按压。运动工件上的心电图可以用来判断心肺复苏率。胸外按压应交付与食指，剑突以上的5毫米，略向中线的左侧。胸部要压缩的前后距离的1/3-1/2，必须充分反冲按压之间允许。手指的定位和最佳的压缩压力绝对是至关重要的。未能达到生存在这个模型几乎总是由于不理想的心肺复苏。 </li><li>注入0.5毫升的肾上腺素，稀释至15微克/毫升，在心肺复苏的前30秒，。共有肾上腺素剂量为8-12微克。仔细观察自主循环（ROSC）的回报率的心电图。复杂窄QRS波群之间的压缩失真。 ROSC的，通常会出现介于90秒和2分钟后开始心肺复苏。复苏是被遗弃，如果ROSC的不发生3分钟。频发室性早搏和心电图轴的变化，观察在ROSC后第2分钟，几乎总是在2分钟内解决稳定的窦性心动过速。 </li><li>记录的复苏和肾上腺素剂量的总时间。记录温度，每分钟10分钟后，ROSC的。 </li><li>心电图信息可以去掉开始自主呼吸时，通常在12-15分钟后ROSC的。 </li><li>拔管气管时，自发呼吸频率&gt; 60/min。 </li><li>恢复笼放置在鼠标上的一个温度控制的表面设置为37 ° C的首2小时postprocedure，确保容易获得食物和水。笼子，然后被转移到标准的术后住房条件，当鼠标从麻醉中完全恢复，是活跃。 </li></ol> 3。放血/灌注固定和肾脏丰收<ol><li> 24小时后的CA / CPR，诱导麻醉与异氟醚的3-4％，和安全的动物，在仰卧位手术表面上在通风柜这是适合用福尔马林.. </li><li>深化麻醉剂麻醉蒸气的浓度逐渐增加至5％，并确保鼠标深受麻醉，停止自主呼吸。 </li><li>执行翻盖开胸，并按照标准技术的心脏左心室心尖穿刺抽血通过鼠标。 </li><li>通过同一个针头，管理0.9％生理盐水缓慢静滴。 acclerate灌注/放血，尼克用剪刀右心耳。执行剖腹探查术，并观察肾脏。当他们被吓得脸色煞白，生理盐水，可能会更改为4％的福尔马林对固定。肾脏，然后嵌入在石蜡和氟乙玉肾小管上皮细胞坏死的定量染色。 </li></ol> 4。代表性的成果： 当CA诱导，平均动脉压（MAP）和区域肾血流量（RRBCF）下降到接近零，并保持稳定，直到复苏开始（ 图 1 ）。 24小时后CA /心肺复苏术，肾功能（尿素氮，尿素氮和肌酐）血清指数明显升高，与假手术动物。 AST / ALT升高，深刻全身缺血（ 图2）提供的证据。嗜中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白（NGAL），肾缺血性损伤的敏感指标是大规模上调24小时后的CA / CPR（ 图3） 。最后，显微照片表明典型的肾小管上皮变薄和苏木精和曙红管腔充盈染色（ 图4中，A组 ）和广泛髓质肾小管上皮细胞染色与玉氟乙死亡时的片状，髓坏死，缺血性肾损伤（ 图4，B组 ）。 <img src="/files/ftp_upload/3116/3116fig1.jpg" alt="图1" /> 图1。心脏骤停引起的灌注压的瞬间失去，这里代表平均动脉压（MAP），在股动脉测量，造成接近完成整个心脏骤停期间停止区域肾皮质血流量（RRCBF） （阴影区）。复苏胸外按压和肾上腺素返回映射到正常RRCBF稳步上升后的复苏期。 来自14个许可转载 。 <img src="/files/ftp_upload/3116/3116fig2.jpg" alt="图2" /> 图2。postprocedure 24小时，血中尿素氮（BUN），肌酐，肾小管上皮细胞死亡的程度都显着升高的CA / CPR与假手术过程中处理的动物相比，动物经过。 CA / CPR诱导泛有机体的缺血性损伤，肝功能酶的大规模提升证明丙氨酸氨基转移酶（ALT）和谷草转氨酶（AST），CA / CPR小鼠与假治疗的动物相比。 <img src="/files/ftp_upload/3116/3116fig3.jpg" alt="图3" /> 图3 Western印迹进行多克隆抗体，以中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白（NGAL），肾缺血性损伤的敏感指标。尿液样本立即获得前（“前”）和24小时后（“24小时”）4只动物的CA / CPR（标记为A，B，C和D以上）。 NGAL的大规模上调鼠标CA / CPR后的尿液。转载来自14个许可。 <img src="/files/ftp_upload/3116/3116fig4.jpg" alt="图4" /> 图4 A）苏木精和曙红染色的CA / CPR后第一个肾组织24小时的肝门部短轴。有髓质和髓质肾小管，肾小管堵塞的修修补补，但明确的损害。箭头指向与肿，细胞核固缩在皮髓质交界处损坏肾小管。二）Flouro玉乙染色同一地区在同一动物的CA / CPR后24小时。玉氟乙污渍的坏死细胞明亮的绿色，呈片状皮髓质肾小管坏死。箭头指向明亮的染色在皮髓质交界处损坏管。这些结果是从人类发展AKI的肾活检结果大致相似，而不像AKI的其他动物模型制作的。

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没有利益冲突的声明。

常温下在小鼠心脏骤停和心肺复苏模型提供了一个模式，重复的病理生理及临床最常见的急性肾损伤，全身血流灌注不足引起的形态的多种渠道的评价。假设检验，可访问的遗传操作技术和充分理解和特点的解剖和生理学实验小鼠的一整套资助。 这里描述的，对于有经验的生存率是80％。虽然手术的准备和逮捕后的护理很简单，被捕鼠标的实际复苏是一个具有挑战性的手术技...

<table border="1"><tbody><tr><th>试剂名称</th><th>公司</th><th>目录编号</th></tr><tr><td>氯化钾</td><td>雅培医疗</td><td> 06653-5 </td></tr><tr><td>异氟醚</td><td>雅培医疗</td><td> 05260-05（和其他） </td></tr><tr><td>肾上腺素盐酸</td><td>多</td><td>多</td></tr><tr><td>从DIGI -感温度控制器</td><td>科尔 - 帕默</td><td> EW - 89000 - 00 </td></tr><tr><td> Angiocath四蛋白酶</td><td> VWR </td><td> 381134 </td></tr><tr><td> Frova角度呼吸道介绍人</td><td>厨师</td><td> G27282 </td></tr><tr><td>对小鼠的MicroVent换气扇</td><td>哈佛器械</td><td> 733591 </td></tr></tbody></table>

normothermic cardiac arrest and cardiopulmonary resuscitation: a mouse model of ischemia-reperfusion injury

5,6全身低灌注成功繁殖，在啮齿类动物模型急性肾损伤（AKI）是一个共同的，极具杀伤力，危重病的并发症， 死亡率高 1-4，这是最经常全身血流灌注不足引起的。一直困难重重。7-9,9,10聘请局灶性脑缺血模型反复论证的结果没有转化为临床上，和较大的动物模型，全身血流灌注不足无法获得的遗传操纵的工具在鼠标的可能。11,12然而，心脏骤停和心肺复苏的小鼠模型，近年来又出现了可适应模型 AKI的13这种模式可靠地再现生理功能，解剖和组织学在临床AKI的看到的结果，迅速重复，并提供所有手术小鼠模型的显着优点，包括访问的基因操纵技术，成本相对低的大型动物，和易用性。使用这种模式，集团已开发的丰富经验，以评估在AKI的一些器官的具体成果。 14,15

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Normothermic Cardiac Arrest and Cardiopulmonary Resuscitation: A Mouse Model of Ischemia-Reperfusion Injury

一个强大的围手术期和关键护理相关的急性肾损伤模型。使用近复制临床AKI的组织学和功能的变化有可能诱发心脏骤停的全身血流灌注不足。

常温心脏骤停和心肺复苏术：缺血再灌注损伤的小鼠模型

Acute Kidney Injury (AKI) is a common, highly lethal, complication of critical illness which has a high mortality1-4 and which is most 
frequently caused ...

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