כל ההליכים המתוארים נערכים בהתאם המכונים הלאומיים לבריאות הנחיות לטיפול ושימוש בבעלי חיים במחקר כל פרוטוקולי חיה אושרו על ידי אורגון לבריאות ומדע באוניברסיטת Animal Care מוסדיים ועדת שימוש. 1. כירורגי הכנה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשקול את העכבר. ההליך המתואר מתבצע על עכברים C57BL / 6 שוקל בין 20 ל 25 גרם הרדמה מושרה בתיבת באמצעות אינדוקציה% 3-4 isoflurane, ומתוחזק לאחר מכן באמצעות 1.5-2.5% isoflurane תערובת אוויר / חמצן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשמן את העיניים עמדת פרקדן חיה על כרית חימום. לשתק 4 הגפיים באמצעות קלטת. הכפות האחוריות, יכול להיות מודבק בעמדה נייטרלית, לעומת זאת, הקדמיות צריך להיות מאובטח קרוב לקיר החזה ככל האפשר, כדי לאפשר טיול מלא החזה במהלך לחיצות חזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סוך ומקום בדיקה טמפרטורה רקטלית. טמפרטורה נשלטת באמצעות כרית חימום מנורה מחוברת בקר טמפרטורה אלקטרוני (Digi-Sense, קול בן הזוג, ורנון הילס IL), אשר מוגדר לשמור על 37.0 ° C. כי זה אפשרי כי שיפוע הטמפרטורה בתוך החיה יכולה להתפתח במהלך מדינה ללא זרימה, חשוב למדוד טמפרטורה מבוקרת ליד האורגן של עניין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לצנרר קנה הנשימה באמצעות 2.5 ס&quot;מ 22 ga קטטר טפלון (Insyte-W, BD, פרנקלין, ניו ג&#39;רזי), ואת הקצה הדיסטלי לחתוך ההיכרויות של זווית (Frova ההיכרויות, מבשלים רפואי, Bloomington IN). שיטות אחרות של אינטובציה לקנה הנשימה של מקובלים, לעומת זאת, השימוש ההיכרויות זוויתי מאפשר מיקום נכון של הצוואר בעמדה קצת מורחבת, מייעל חשיפה כירורגית עבור מיקום של קטטר תוך ורידי. רכזת קטטר endotracheal מאובטח באמצעות לולאה של תפר את החותכת ומתוחזק עם מתח קלה כדי לשתק את הראש במהלך לחיצות חזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מבחינה מכנית לאוורר את עכבר עם מאוורר מכרסם מוגדר μL 140, 150 נשימות / דקה. זה אינו מותאם משקל כמו בפרוטוקול זה מבוצע תמיד 20-25 גר &#39;חיות. אל מעל להעמיק הרדמה. אין להגדיר את ההנשמה להפעיל לחץ בסוף הנשיפה כמו החייאה פוגעת זו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות טכניקה סטרילית מיקרוסקופ ההפעלה, מקום מראש סמוקות PE-10 קטטר בעורק הצוואר. צד ניתן להשתמש, אבל השימוש בצד הקרוב למפעיל מפחית את הסיכוי שליפה קטטר במהלך לחיצות חזה או מניפולציות אחרות. Bupivicaine 0.5%, 0.1 מ&quot;ל הוא infitrated לתוך קצוות הפצע כדי לשלוט בכאב לאחר הניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Secure את הקטטר-10 PE לתוך סגר את העור עם דבק כירורגי cyanoacrylate. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקום תת עורית אלקטרודות א.ק. ג ו להתחבר למכשיר ניטור. תשומת לב קפדנית נתיב האות ו מקסום של האות עצמה היא קריטית להצלחת ההחייאה. ודא שכל החוטים מובטחות על פני השטח ההפעלה, למזער את המעברים אות, ולמזער מבודדים (כמו אוויר מחטים חלולות או חוט תקועים) בתוך נתיב האות. מחטים מוצק מחובר חוט להוביל nonstranded ניתן לרכוש או עשה במעבדה. לאחר ההתחברות, לייעל את אות האק&quot;ג על המסך. </li></ol> 2. לב מעצר <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא כי העכבר הוא normothermic, כהגדרתו טמפרטורה רקטלית 36.5 מעלות צלזיוס - 37.5 ° C. ניהול של 40 μL בטמפרטורת החדר אשלגן כלוריד 0.5 M לווריד ולבחון isoelectric התחקות על א.ק. ג. התאמת המינון למשקל אין צורך בטווח 20-25 גר &#39; הפעלת טיימר מעצר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נתק את מכונת ההנשמה. להפסיק את אדי הרדמה. כבה את כרית החימום וכל ציוד אחר אשר מייצר רעש אלקטרוניים שעשויים להפריע ניטור א.ק. ג. הצב שמיכה בידוד מעל העכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שיא הטמפרטורה בכל רגע במהלך דום לב. אם יש צורך, מנורת חימום ניתן להשתמש כדי להביא טמפרטורת הליבה עד טווח normothermic. במהלך דום לב, להכין אספקה ​​וציוד (למשל, מזרק אפינפרין) עבור החייאה. רשימת יכול להיות מועיל כדי להבטיח החייאה ללא הפרעה, שהוא חיוני להישרדות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר 7 דקות, 30 שניות של דום לב, חבר מחדש את הנשמה ואת להגביר את קצב עד 180 נשימות / דקה, תוך שמירה על נפח גאות בהגדרה מראש המעצר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ב 8 דקות, ליזום לחיצות חזה ב 300 BPM. חפץ Motion על א.ק. ג יכול לשמש שיעור החייאה שופט. לחיצות חזה צריכה להיות מועברת עם האצבע המורה, 5 מ&quot;מ מעל תהליך xiphoid מעט משמאל לקו האמצע. החזה צריך להיות דחוס 1/3-1/2 המרחק anteroposterior וגם רתיעה מלא יש לאפשר בין עיסויים. מיקום האצבע לחץ דחיסה אופטימלי הם קריטיים לחלוטין. כישלון להשיג הישרדות במודל זה כמעט תמיד בגלל הכי מוצלח החייאה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להשרות 0.5 מ&quot;ל של אפינפרין, בדילול מלא עד 15 מיקרוגרם / מ&quot;ל, ב -30 השניות הראשונות של החייאה. מינון האפינפרין סך 8-12 מיקרוגרם. בזהירות לצפות א.ק. ג להחזרת במחזור ספונטני (ROSC). צמצם קומפלקסים מורכבים QRS נתפסים בין חפצים דחיסה. ROSC מתרחשת בדרך כלל בין 90 שניות ו 2 דקות לאחר תחילת החייאה. החייאה נטוש אם ROSC אינה מתרחשת על ידי 3 דקות. הצירים תכופים חדרית מוקדמת ושינויים א.ק. ג ציר הם נצפו ב 2 הדקות הראשונות לאחר ROSC, וכמעט תמיד לפתור לתוך טכיקרדיה סינוס יציב ברמה של 2 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שיא הזמן הכולל של החייאה ואת המינון אפינפרין. טמפרטורת שיא כל דקה במשך 10 דקות לאחר ROSC. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מוביל א.ק. ג ניתן להסיר כאשר הנשימה הספונטנית מתחיל, בדרך כלל בתוך 12-15 דקות לאחר ROSC. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Extubate קנה הנשימה כאשר קצב הנשימה הספונטנית היא&gt; 60/min. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את העכבר בכלוב התאוששות על משטח טמפרטורה מבוקרת מוגדר 37 ° C עבור postprocedure השעות הראשונות 2, להבטיח גישה נוחה מזון ומים. כלוב עשוי מכן יועבר סטנדרטי תנאי דיור לאחר הניתוח כאשר העכבר התאושש לחלוטין מן ההרדמה והיא פעילה. </li></ol> 3. Exsanguination / זלוף קיבוע ו-Harvest כליה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 24 שעות לאחר CA / החייאה, להשרות הרדמה עם 3-4% isoflurane ומאובטח החיה בעמדה פרקדן על משטח כירורגי בתוך ברדס קטר אשר מתאים לשימוש עם פורמלין .. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להעמיק את ההרדמה על ידי בהדרגה את ריכוז אדי הרדמה ל 5% ולהבטיח העכבר נמצא בהרדמה עמוקה כפי שמעידים הפסקת הנשימה הספונטנית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביצוע פתיחת בית החזה צדפה, ולגרום לדימום מחודש את העכבר באמצעות לנקב apical של החדר השמאלי לב על פי שיטות סטנדרטיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות מחט אחת, לנהל 0.9% מלוחים ידי עירוי איטי. כדי acclerate זלוף / exsanguination, ניק תוספת פרוזדורים זכות במספריים. ביצוע פיום בטן ולבחון את הכליות. כאשר הם קלופים, מלח ניתן לשנות ל -4% פורמלין עבור קיבעון. הכליות המוטבעים אז פרפין מוכתם B-Fluoro ירקן עבור כימות של נמק אפיתל צינורי. </li></ol> 4. נציג תוצאות: כאשר CA מושרה, כלומר בלחץ העורקי (MAP) ואת זרימת הדם באזור הכליות (RRBCF) ירידה כמעט לאפס ולהישאר יציבה עד החייאה מתחיל (איור 1). 24 שעות לאחר CA / החייאה, מדדי בסרום של התפקוד הכלייתי (אוריאה דם חנקן, קריאטינין ו BUN) הן גבוהות באופן משמעותי ביחס דמה המופעלים בעלי חיים. AST / ALT גם הן גבוהות, המציע עדות של איסכמיה כל הגוף עמוקה (איור 2). נויטרופילים-gelatinase הקשורים lipocalin (NGAL), אינדיקטור רגיש של פגיעה כלייתית איסכמי הוא מאסיבי 24h שהוגברו לאחר CA / החייאה (איור 3). לבסוף, photomicrographs להדגים את נמק טלוא, מדולרי טיפוסי של פגיעה כלייתית איסכמי עם דילול של האפיתל צינורי ומילוי luminal על hematoxylin ו eosin כתם (איור 4, פאנל) ו מוות של תאים אפיתל רב צינורי מדולרי כאשר מוכתם B-fluoro ירקן ( איור 4, לוח ב). <img src="/files/ftp_upload/3116/3116fig1.jpg" alt="איור 1" /> באיור 1. דום לב גורמת לאובדן מיידי של לחץ זלוף, המיוצג כאן מתכוון בלחץ העורקי (MAP) נמדד בעורק הירך, וכתוצאה מכך הפסקת כמעט מוחלטת של זרימת הדם כליות אזורי קליפת המוח (RRCBF) לאורך התקופה של דום לב (מוצל שטח). החייאה עם לחיצות חזה וחוזר אפינפרין מפה רגילה RRCBF עולה בהתמדה בתקופה שלאחר החייאה. התפרסם באישור 14. <img src="/files/ftp_upload/3116/3116fig2.jpg" alt="איור 2" /> איור 2. 24h postprocedure, אוריאה בדם חנקן (BUN), קריאטינין בסרום, והיקף מוות של תאים צינורי כל גבוהות באופן משמעותי בחיות שעברו CA / החייאה לעומת חיות שטופלו הליך אחיזת עיניים. CA / החייאה גורם עלבון הפאן האורגניזם איסכמי, שעולה כאן על ידי העלאת מסיבית של הכבד לתפקד אנזימים אלאנין אמינו transferase (ALT) ו aspartate aminotransferase (AST) ב-CA / החייאה עכברים לעומת דמה שטופלו בבעלי חיים. <img src="/files/ftp_upload/3116/3116fig3.jpg" alt="איור 3" /> איור 3. ביצע המערבי כתם באמצעות נוגדן polyclonal כדי lipocalin נויטרופילים gelatinase הקשורים (NGAL), אינדיקטור רגיש של פגיעה כלייתית איסכמי. דגימות שתן נלקחו מיד לפני (&quot;קדם&quot;) ו - 24 שעות אחרי (&quot;24 שעות&quot;) CA / החייאה בתוך 4 חיות (שכותרתו, B, C, ו - ד &#39;לעיל). NGAL הוא שהוגברו מאסיבית של העכברשתן לאחר CA / החייאה. התפרסם באישור 14. <img src="/files/ftp_upload/3116/3116fig4.jpg" alt="איור 4" /> איור 4.) Hematoxylin ו eosin כתם קטע קצר hilar ציר 24h רקמות כליה לאחר CA / החייאה. אין נזק בלתי סדיר אבל ברור tubules מדולרי ו corticomedullary צינורי עם חיבור. הצבע על חצים tubules פגום עם גרעינים, נפוח pyknotic בצומת corticomedullary. ב) Flouro-B ירקן כתם של האזור באותה חיה עם זאת, 24 שעות לאחר CA / החייאה. Fluoro-ירקן כתמים B תאים נמקי ירוק בהיר, מראה בלתי סדיר נמק צינורי corticomedullary. חצים הצבע בהיר tubules פגום מוכתם בצומת corticomedullary. ממצאים אלה דומים בעיקרם ממצאי ביופסיה כלייתית מבני אדם המפתחים AKI, ושלא כמו אלה המיוצרים על ידי מודלים של בעלי חיים אחרים AKI.

<ol>
	<li>Chertow, G. M., Lazarus, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predictors+of+mortality+and+the+provision+of+dialysis+in+patients+with+acute+tubular+necrosis.+the+auriculin+anaritide+acute+renal+failure+study+group.">Predictors of mortality and the provision of dialysis in patients with acute tubular necrosis. the auriculin anaritide acute renal failure study group.</a> J Am Soc Nephrol. 9, 692-698 (1998).</li><li>Lassnigg, A., Schmidlin, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimal+changes+of+serum+creatinine+predict+prognosis+in+patients+after+cardiothoracic+surgery:+A+prospective+cohort+study.">Minimal changes of serum creatinine predict prognosis in patients after cardiothoracic surgery: A prospective cohort study.</a> J Am Soc Nephrol. 15, 1597-1605 (2004).</li><li>Lassnigg, A., Donner, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lack+of+renoprotective+effects+of+dopamine+and+furosemide+during+cardiac+surgery.">Lack of renoprotective effects of dopamine and furosemide during cardiac surgery.</a> J Am Soc Nephrol. 11, 97-104 (2000).</li><li>Metnitz, P. G., Krenn, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+acute+renal+failure+requiring+renal+replacement+therapy+on+outcome+in+critically+ill+patients.">Effect of acute renal failure requiring renal replacement therapy on outcome in critically ill patients.</a> Crit Care Med. 30, 2051-2058 (2002).</li><li>Uchino, S., Kellum, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+renal+failure+in+critically+ill+patients:+A+multinational,+multicenter+study.">Acute renal failure in critically ill patients: A multinational, multicenter study.</a> JAMA. 294, 813-818 (2005).</li><li>Mehta, R. L., Pascual, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spectrum+of+acute+renal+failure+in+the+intensive+care+unit:+The+PICARD+experience.">Spectrum of acute renal failure in the intensive care unit: The PICARD experience.</a> Kidney Int. 66, 1613-1621 (2004).</li><li>Zager, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Partial,+aortic+ligation:+A+hypoperfusion+model+of+ischemic+acute+renal+failure+and+a+comparison+with+renal+artery+occlusion.">Partial, aortic ligation: A hypoperfusion model of ischemic acute renal failure and a comparison with renal artery occlusion.</a> J Lab Clin Med. 110, 396-405 (1987).</li><li>Zager, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenine,+nucleotide+changes+in+kidney,+liver,+and+small+intestine+during+different+forms+of+ischemic+injury.">Adenine, nucleotide changes in kidney, liver, and small intestine during different forms of ischemic injury.</a> Circ Res. 68, 185-196 (1991).</li><li>Oliver, J., MacDowell, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathogenesis+of+acute+renal+failure+associated+with+traumatic+and+toxic+injury;+renal+ischemia,+nephrotoxic+damage+and+the+ischemic+episode.">The pathogenesis of acute renal failure associated with traumatic and toxic injury; renal ischemia, nephrotoxic damage and the ischemic episode.</a> J Clin Invest. 30, 1307-1439 (1951).</li><li>Phillips, R. A., Dole, V. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+acute+hemorrhage+and+traumatic+shock+on+renal+function+in+dogs.">Effects of acute hemorrhage and traumatic shock on renal function in dogs.</a> Am J Physiol. 145, 314-336 (1945).</li><li>Klocke, R., Tian, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+animal+models+of+heart+failure+related+to+coronary+heart+disease.">Surgical animal models of heart failure related to coronary heart disease.</a> Cardiovasc Res. 74, 29-38 (2007).</li><li>Traystman, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+focal+and+global+cerebral+ischemia.">Animal models of focal and global cerebral ischemia.</a> ILAR J. 44, 85-95 (2003).</li><li>Burne-Taney, M. J., Kofler, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+renal+failure+after+whole+body+ischemia+is+characterized+by+inflammation+and+T+cell-mediated+injury.">Acute renal failure after whole body ischemia is characterized by inflammation and T cell-mediated injury.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 285, 87-94 (2003).</li><li>Hutchens, M. P., Nakano, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+is+renoprotective+via+a+non-receptor+dependent+mechanism+after+cardiac+arrest+in+vivo.">Estrogen is renoprotective via a non-receptor dependent mechanism after cardiac arrest in vivo.</a> Anesthesiology. 112, 395-405 (2010).</li><li>Hutchens, M. P., Nakano, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soluble+epoxide+hydrolase+gene+deletion+reduces+survival+after+cardiac+arrest+and+cardiopulmonary+resuscitation.">Soluble epoxide hydrolase gene deletion reduces survival after cardiac arrest and cardiopulmonary resuscitation.</a> Resuscitation. 76, 89-94 (2007).</li><li>Planta, I. v. o. n., Weil, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiopulmonary+resuscitation+in+the+rat.">Cardiopulmonary resuscitation in the rat.</a> J Appl Physiol. 65, 2641-2647 (1988).</li><li>Cobb, L. A., Fahrenbruch, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+cardiopulmonary+resuscitation+prior+to+defibrillation+in+patients+with+out-of-hospital+ventricular+fibrillation.">Influence of cardiopulmonary resuscitation prior to defibrillation in patients with out-of-hospital ventricular fibrillation.</a> JAMA. 281, 1182-1188 (1999).</li><li>Aufderheide, T. P., Lurie, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Death+by+hyperventilation:+A+common+and+life-threatening+problem+during+cardiopulmonary+resuscitation.">Death by hyperventilation: A common and life-threatening problem during cardiopulmonary resuscitation.</a> Crit Care Med. 32, 345-351 (2004).</li><li>Aufderheide, T. P., Sigurdsson, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperventilation-induced+hypotension+during+cardiopulmonary+resuscitation.">Hyperventilation-induced hypotension during cardiopulmonary resuscitation.</a> Circulation. 109, 1960-1965 (2004).</li></ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

המודל normothermic מדום לב ו החייאה בעכבר מציע דרכים רבות של הערכה במודל אשר משכפל את פתופיזיולוגיה מורפולוגיה של סיבה הקליני השכיח ביותר של AKI, כל הגוף hypoperfusion. בדיקת השערות ניתן בעזרת גישה שריון של טכניקות מניפולציה גנטית את האנטומיה היטב הבין ומאופיינת ופיזיולוגיה של עכ...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> שם מגיב </th><th> חברה </th><th> מספר קטלוגי </th></tr><tr><td> אשלגן כלוריד </td><td> אבוט רפואי </td><td> 06653-5 </td></tr><tr><td> Isoflurane </td><td> אבוט רפואי </td><td> 05260-05 (ואחרים) </td></tr><tr><td> אפינפרין HCl </td><td> מרובה </td><td> מרובה </td></tr><tr><td> Digi-Sense בקר טמפרטורה </td><td> קול-פאלמר </td><td> EW-89000-00 </td></tr><tr><td> Angiocath IV קת&#39; </td><td> VWR </td><td> 381134 </td></tr><tr><td> Frova ההיכרויות דרכי הנשימה זוויתי </td><td> לבשל </td><td> G27282 </td></tr><tr><td> מאוורר MicroVent עבור עכברים </td><td> הרווארד Apparatus </td><td> 733591 </td></tr></tbody></table>

normothermic cardiac arrest and cardiopulmonary resuscitation: a mouse model of ischemia-reperfusion injury

פגיעה כליות חריפה (AKI) הוא נפוץ, קטלני ביותר, סיבוך של המחלה קריטי שבו יש תמותה גבוה 1-4 ואשר נגרמת לרוב על ידי hypoperfusion, כל הגוף. 5,6 רבייה מוצלחת של hypoperfusion, כל הגוף מודלים מכרסם הייתה רצופת קשיים. 7-9,9,10 מודלים אשר מעסיקים איסכמיה מוקד הוכיחו שוב ושוב את התוצאות שאינן לתרגם להגדרה קליני, במודלים של בעלי חיים גדולים יותר המאפשרים גישה hypoperfusion כל חוסר הגוף הכלים המלא של מניפולציה גנטית אפשרי העכבר. 11,12 עם זאת, בשנים האחרונות במודל עכבר של דום לב ו החייאה התפתחה אשר ניתן להתאים מודל AKI. 13 מודל זה אמין מתרבה פיזיולוגי, התוצאות תפקודית, אנטומית, ו היסטולוגית לראות קליניים AKI , הוא הדיר במהירות, מציע את כל היתרונות המשמעותיים של מודל ניתוח Murine, כולל גישה טכניקות מניפולטיביות גנטי, בעלות נמוכה יחסית לבעלי חיים גדולים, וקלות השימוש. הקבוצה שלנו פיתחה ניסיון רב עם שימוש במודל זה כדי להעריך מספר איברים ספציפיים התוצאות AKI. 14,15

Watch this Scientific Journal Video about Normothermic Cardiac Arrest and Cardiopulmonary Resuscitation: A Mouse Model of Ischemia-Reperfusion Injury at JoVE.com

Normothermic Cardiac Arrest and Cardiopulmonary Resuscitation: A Mouse Model of Ischemia-Reperfusion Injury

מודל רב עוצמה עבור perioperative וביקורתית טיפול הקשור לפגיעה כליות חריפה מוצגת. שימוש hypoperfusion כל הגוף הנגרמת על ידי דום לב אפשר כמעט לשחזר את השינויים היסטולוגית ופונקציונלי של AKI קליניים.

דום לב Normothermic ו החייאה: במודל עכבר של פגיעה איסכמיה reperfusion

Acute Kidney Injury (AKI) is a common, highly lethal, complication of critical illness which has a high mortality1-4 and which is most 
frequently caused ...

normothermic-cardiac-arrest-cardiopulmonary-resuscitation-mouse-model

Research

JoVE Journal

Medicine

17.9K Views.  Oregon Health & Sciences University. מודל רב עוצמה עבור perioperative וביקורתית טיפול הקשור לפגיעה כליות חריפה מוצגת. שימוש hypoperfusion כל הגוף הנגרמת על ידי דום לב אפשר כמעט לשחזר את השינויים היסטולוגית ופונקציונלי של AKI קליניים.

Video: Normothermic Cardiac Arrest and Cardiopulmonary Resuscitation: A Mouse Model of Ischemia-Reperfusion Injury

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often unreported mortality rates that may confound analyses. Bilateral renal pedicle clamping is commonly used to induce IR-AKI, but differences between effective clamp pressures and/or renal responses to ischemia between kidneys often lead to more variable results. In addition, shorter clamp times are known to induce more variable tubular injury, and while mice undergoing bilateral injury with longer clamp times develop more consistent tubular injury, they often die within the first 3 days after injury due to severe renal insufficiency. To improve post-injury survival and obtain more consistent and predictable results, we have developed two models of unilateral ischemia-reperfusion injury followed by contralateral nephrectomy. Both surgeries are performed using a dorsal approach, reducing surgical stress resulting from ventral laparotomy, commonly used for mouse IR-AKI surgeries. For induction of moderate injury BALB/c mice undergo unilateral clamping of the renal pedicle for 26 min and also undergo simultaneous contralateral nephrectomy. Using this approach, 50-60% of mice develop moderate AKI 24 hr after injury but 90-100% of mice survive. To induce more severe AKI, BALB/c mice undergo renal pedicle clamping for 30 min followed by contralateral nephrectomy 8 days after injury. This allows functional assessment of renal recovery after injury with 90-100% survival. Early post-injury tubular damage as well as post injury fibrosis are highly consistent using this model.

We describe models of moderate and severe ischemia-reperfusion-induced kidney injury in which the mice undergo unilateral renal pedicle clamping followed by simultaneous or delayed contralateral nephrectomy, respectively. These models consistently give rise to renal dysfunction and post-injury fibrosis, but injury severity and survival are dependent on mouse background, age and surgical equipment.

דגם איסכמיה reperfusion של פגיעה חריפה בכליות ופגיעים ההודעה פיברוזיס בעכברים

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

Induction and Assessment of Ischemia-reperfusion Injury in Langendorff-perfused Rat Hearts

The biochemical events surrounding ischemia reperfusion injury in the acute setting are of great importance to furthering novel treatment options for myocardial infarction and cardiac complications of thoracic surgery. The ability of certain drugs to precondition the myocardium against ischemia reperfusion injury has led to multiple clinical trials, with little success. The isolated heart model allows acute observation of the functional effects of ischemia reperfusion injury in real time, including the effects of various pharmacological interventions administered at any time-point before or within the ischemia-reperfusion injury window. Since brief periods of ischemia can precondition the heart against ischemic injury, in situ aortic cannulation is performed to allow for functional assessment of non-preconditioned myocardium. A saline filled balloon is placed into the left ventricle to allow for real-time measurement of pressure generation. Ischemic injury is simulated by the cessation of perfusion buffer flow, followed by reperfusion. The duration of both ischemia and reperfusion can be modulated to examine biochemical events at any given time-point. Although the Langendorff isolated heart model does not allow for the consideration of systemic events affecting ischemia and reperfusion, it is an excellent model for the examination of acute functional and biochemical events within the window of ischemia reperfusion injury as well as the effect of pharmacological intervention on cardiac pre- and postconditioning. The goal of this protocol is to demonstrate how to perform in situ aortic cannulation and heart excision followed by ischemia/reperfusion injury in the Langendorff model.

The isolated rat heart is an enduring model for ischemia reperfusion injury. Here, we describe the process of harvesting the beating heart from a rat via in situ aortic cannulation, Langendorff perfusion of the heart, simulated ischemia-reperfusion injury, and infarct staining to confirm the extent of ischemic insult.

אינדוקציה והערכה של איסכמיה reperfusion פגיעה בלבבות עכברוש Langendorff-perfused

The biochemical events surrounding ischemia reperfusion injury in the acute setting are of great importance to furthering novel treatment options for ...

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, hypotension, necrotizing enterocolitis, bowel transplantation, trauma and chronic inflammation. Intestinal ischemia-reperfusion (IR) injury is a consequence of acute mesenteric ischemia, caused by inadequate blood flow through the mesenteric vessels, resulting in intestinal damage. Reperfusion following ischemia can further exacerbate damage of the intestine. The mechanisms of IR injury are complex and poorly understood. Therefore, experimental small animal models are critical for understanding the pathophysiology of IR injury and the development of novel therapies.
Here we describe a mouse model of acute intestinal IR injury that provides reproducible injury of the small intestine without mortality. This is achieved by inducing ischemia in the region of the distal ileum by temporally occluding the peripheral and terminal collateral branches of the superior mesenteric artery for 60 min using microvascular clips. Reperfusion for 1 hr, or 2 hr after injury results in reproducible injury of the intestine examined by histological analysis. Proper position of the microvascular clips is critical for the procedure. Therefore the video clip provides a detailed visual step-by-step description of this technique. This model of intestinal IR injury can be utilized to study the cellular and molecular mechanisms of injury and regeneration.

Here we describe the detailed procedure of intestinal ischemia-reperfusion in mice which results in reproducible injury without mortality to encourage the standardization of this technique across the field. This model of intestinal ischemia-reperfusion injury can be utilized to study the cellular and molecular mechanisms of injury and regeneration.

דגם Murine של פגיעת המעיים איסכמיה reperfusion

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

A Mouse Model of Retinal Ischemia-Reperfusion Injury Through Elevation of Intraocular Pressure

Retinal ischemia-reperfusion (I/R) is a pathophysiological process contributing to cellular damage in multiple ocular conditions, including glaucoma, diabetic retinopathy, and retinal vascular occlusions. Rodent models of I/R injury are providing significant insights into mechanisms and treatment strategies for human I/R injury, especially with regard to neurodegenerative damage in the retinal neurovascular unit. Presented here is a protocol for inducing retinal I/R injury in mice through elevation of intraocular pressure (IOP). In this protocol, the ocular anterior chamber is cannulated with a needle, through which flows the drip of an elevated saline reservoir. Using this drip to raise IOP above systolic arterial blood pressure, a practitioner temporarily halts inner retinal blood flow (ischemia). When circulation is reinstated (reperfusion) by removal of the cannula, severe cellular damage ensues, resulting ultimately in retinal neurodegeneration. Recent studies demonstrate inflammation, vascular permeability, and capillary degeneration as additional elements of this model. Compared to alternative retinal I/R methodologies, such as retinal arterial ligation, retinal I/R injury by elevated IOP offers advantages in its&#160;anatomical specificity, experimental tractability, and technical accessibility, presenting itself as a valuable tool for examining neuronal pathogenesis and therapy in the retinal neurovascular unit.

This article describes a procedure for inducing retinal ischemia-reperfusion injury by elevated intraocular pressure in mice. Retinal ischemia-reperfusion injury by elevated intraocular pressure serves to model human pathologies characterized by compromised oxygen and nutrient delivery in the retina, enabling researchers to examine potential cellular mechanisms and treatments for human diseases of the retinal neurovascular unit.

במודל עכבר של רשתית איסכמיה reperfusion נזק ע&quot;י העלאת רמת הלחץ התוך עיני

Retinal ischemia-reperfusion (I/R) is a pathophysiological process contributing to cellular damage in multiple ocular conditions, including glaucoma, ...

Ultrasonographic Assessment During Cardiopulmonary Resuscitation

The US-CAB (Ultrasound, Circulation/Airway/Breathing) protocol integrates several sonographic techniques into a structured assessment of the circulation, airway, and breathing status of a patient during cardiopulmonary resuscitation (CPR) in an advanced life support-compliant manner. US-C provides a subxiphoid view of the heart, to look for potentially reversible causes of disease, such as pericardial effusion, pulmonary embolism, hypovolemia, and acute coronary thrombosis. Sonographic cardiac activity during CPR not only helps differentiate pseudo-pulseless electrical activity (PEA) from true PEA but also represents a higher chance of the return of spontaneous circulation (ROSC) and survival. Evaluation of the inferior vena cava (IVC) shows the fluid status of the patient and indicates the best methods to use for fluid resuscitation. If aortic dissection is suspected, a subxiphoid view of the aorta is suggested for identifying an intimal flap. Once intubation is done, tracheal ultrasound (US-A) at the suprasternal notch helps differentiate endotracheal intubation (one air-mucosal interface with one comet-tail) from esophageal intubation (double tract sign). Immediately following US-A, bilateral lung US (US-B) should be done to confirm proper bilateral ventilation using the lung sliding sign. In addition, US-C can be serially followed to see the dynamic changes in the cardiac chambers and IVC, or any cardiac contraction suggestive of ROSC. US-B can also detect coexisting lung or pleural pathologies without interfering with the performance of CPR. The main concern when implementing this method is maintaining high-quality CPR without delays in chest compressions when performing US-CAB. Rigorous training and continued practice are key to minimize any interruptions during resuscitation.

Here, we present a US-CAB (Ultrasound, Circulation/Airway/Breathing) protocol for use during cardiopulmonary resuscitation (CPR). US-C evaluates the subxiphoid view of the heart and inferior vena cava. After intubation, tracheal US (US-A) and lung US (US-B) help confirm endotracheal intubation and proper ventilation.

הערכה אולטרה-זונוגרפית במהלך החייאה לב ריאה

The US-CAB (Ultrasound, Circulation/Airway/Breathing) protocol integrates several sonographic techniques into a structured assessment of the circulation, ...

A Pre-clinical Rat Model for the Study of Ischemia-reperfusion Injury in Reconstructive Microsurgery

Ischemia-reperfusion injury is the main cause of flap failure in reconstructive microsurgery. The rat is the preferred preclinical animal model in many areas of biomedical research due to its cost-effectiveness and its translation to humans. This protocol describes a method to create a preclinical free skin flap model in rats with ischemia-reperfusion injury. The described 3 cm x 6 cm rat free skin flap model is easily obtained after the placement of several vascular ligatures and the section of the vascular pedicle. Then, 8 h after the ischemic insult and completion of the microsurgical anastomosis, the free skin flap develops the tissue damage. These ischemia-reperfusion injury-related damages can be studied in this model, making it a suitable model for evaluating therapeutic agents to address this pathophysiological process. Furthermore, two main monitoring techniques are described in the protocol for the assessment of this animal model: transit-time ultrasound technology and laser speckle contrast analysis.

Here, we describe a pre-clinical animal model for studying the pathophysiology of ischemia-reperfusion injury in reconstructive microsurgery. This free skin flap model based on the superficial caudal epigastric vessels in the rat may also allow for the evaluation of different therapies and compounds to counteract ischemia-reperfusion injury-related damage.

מודל מפרה קליני לחקר איסכמיה-reperfusion פציעה במיקרו-כירורגיה משחזרת

Ischemia-reperfusion injury is the main cause of flap failure in reconstructive microsurgery. The rat is the preferred preclinical animal model in many ...

Delayed Intramyocardial Delivery of Stem Cells after Ischemia Reperfusion Injury in a Murine Model

There is significant interest in the use of stem cells (SCs) for the recovery of cardiac function in individuals with myocardial injuries. Most commonly, cardiac stem cell therapy is studied by delivering SCs concurrently with the induction of myocardial injury. However, this approach presents two significant limitations: the early hostile pro-inflammatory ischemic environment may affect the survival of transplanted SCs, and it does not represent the subacute infarction scenario where SCs will likely be used. Here we describe a two-part series of surgical procedures for the induction of ischemia-reperfusion injury and delivery of mesenchymal stem cells (MSCs). This method of stem cell administration may allow for the longer viability and retention around damaged tissue by circumventing the initial immune response. A model of ischemia reperfusion injury was induced in mice accompanied by the delivery of mesenchymal stem cells (3.0 x 105), stably expressing the reporter gene firefly luciferase under the constitutively expressed CMV promoter, intramyocardially 7 days later. The animals were imaged via ultrasound and bioluminescent imaging for confirmation of injury and injection of cells, respectively. Importantly, there was no added complication rate when performing this two-procedure approach for SC delivery. This method of stem cell administration, collectively with the utilization of state-of-the-art reporter genes, may allow for the in vivo study of viability and retention of transplanted SCs in a situation of chronic ischemia commonly seen clinically, while also circumventing the initial pro-inflammatory response. In summary, we established a protocol for the delayed delivery of stem cells into the myocardium, which can be used as a potential new approach in promoting regeneration of the damaged tissue.

Stems cells are continuously investigated as potential treatments for individuals with myocardial damage, however, their decreased viability and retention within injured tissue can impact their long-term efficacy. In this manuscript we describe an alternative method for stem cell delivery in a murine model of ischemia reperfusion injury.

אספקה תוך-תוך-קרדיאלית מושהית של תאי גזע לאחר פציעת איסכמיה רפרציה במודל מורין

There is significant interest in the use of stem cells (SCs) for the recovery of cardiac function in individuals with myocardial injuries. Most commonly, ...

A Rat Lung Transplantation Model of Warm Ischemia/Reperfusion Injury: Optimizations to Improve Outcomes

From our experience with rat lung transplantation, we have found several areas for improvement. Information in the existing literature regarding methods for choosing appropriate cuff sizes for the pulmonary vein (PV), pulmonary artery (PA), or bronchus (Br) are varied, thus making the determination of proper cuff size during rat lung transplantation an exercise of trial and error. By standardizing the cuffing technique to use the smallest effective cuff appropriate for the size of the vessel or bronchus, one can make the transplantation procedure safer, faster, and more successful. Since diameters of the PV, PA, and Br are related to the body weight of the rat, we present a strategy to choosing an appropriate size using a weight-based guide. Since lung volume is also related to body weight, we recommend that this relationship should also be considered when choosing the proper volume of air for donor lung inflation during warm ischemia as well as for the proper volume of PBS to be instilled during bronchoalveolar lavage (BAL) fluid collection. We also describe methods for 4th intercostal space dissection, wound closure, and sample collection from both the native and transplanted lobes.

Here, we present optimizations to a rat lung transplantation model that serve to improve outcomes. We provide a size guide for cuffs based on body weight, a measurement strategy to ascertain the 4th intercostal space, and methods of wound closure and BAL (bronchoalveolar lavage) fluid and tissue collection.

מודל השתלת ריאה של חולדה של איסכמיה חמה / פגיעה ברפרפוזיה: אופטימיזציות לשיפור התוצאות

From our experience with rat lung transplantation, we have found several areas for improvement. Information in the existing literature regarding methods ...

An Effective Mouse Model of Unilateral Renal Ischemia-Reperfusion Injury

Ischemia-reperfusion injury (IRI) is the leading cause of acute renal failure and is a significant contributor to delayed graft function. Animal models are the only available resources that mimic the complexities of the IRI-associated damage encountered in vivo. This paper describes an effective mouse model of unilateral renal IRI that delivers highly reproducible data. Ischemia is induced by occluding the right renal pedicle for 30 min followed by reperfusion. In addition to the surgical procedure, a sequential overview of the expected physiological and histopathological changes following renal IRI will be provided by comparing data from seven different reperfusion times (4 h, 8 h, 16 h, 1 day, 2 days, 4 days, and 7 days). Critical data for planning experiments ahead, such as mean surgical time, average anesthetic consumption, and body weight changes over time, will be shared. This work will help researchers implement a reliable renal IRI model and select the appropriate reperfusion time that aligns with their intended investigative goals.

Renal ischemia-reperfusion injury is associated with high morbidity and mortality in hospitalized patients. Here, we present a simple and effective mouse model of unilateral renal ischemia-reperfusion injury and provide a sequential overview of representative pathological changes observed in the kidney.

מודל עכבר יעיל של פגיעה חד-צדדית באיסכמיה-רפרפוזיה של הכליה

Ischemia-reperfusion injury (IRI) is the leading cause of acute renal failure and is a significant contributor to delayed graft function. Animal models ...

A Piglet Perinatal Asphyxia Model to Study Cardiac Injury and Hemodynamics after Cardiac Arrest, Resuscitation, and the Return of Spontaneous Circulation

Neonatal piglets have been extensively used as translational models for perinatal asphyxia. In 2007, we adapted a well-established piglet asphyxia model by introducing cardiac arrest. This enabled us to study the impact of severe asphyxia on key outcomes, including the time taken for the return of spontaneous circulation (ROSC), as well as the effect of chest compressions according to alternative protocols for cardiopulmonary resuscitation. Due to the anatomical and physiological similarities between piglets and human neonates, piglets serve as good models in studies of cardiopulmonary resuscitation and hemodynamic monitoring. In fact, this cardiac arrest model has provided evidence for guideline development through research on resuscitation protocols, pathophysiology, biomarkers, and novel methods for hemodynamic monitoring. Notably, the incidental finding that a substantial fraction of piglets have pulseless electrical activity (PEA) during cardiac arrest may increase the applicability of the model (i.e., it may be used to study pathophysiology extending beyond the perinatal period). However, the model generation is technically challenging and requires various skill sets, dedicated personnel, and a fine balance of the measures, including the surgical protocols and the use of sedatives/analgesics, to ensure a reasonable rate of survival. In this paper, the protocol is described in detail, as well as experiences with adaptations to the protocol over the years.

This piglet model involves surgical instrumentation, asphyxiation until the cardiac arrest, resuscitation, and post-resuscitation observation. The model allows for multiple sampling per animal, and by using continuous invasive arterial blood pressure, ECG, and non-invasive cardiac output monitoring, it provides knowledge about hemodynamics and cardiac pathophysiology in perinatal asphyxia and neonatal cardiopulmonary resuscitation.

מודל חנק פרינטלי חזרזיר לחקר פגיעה לבבית והמודינמיקה לאחר דום לב, החייאה והחזרת מחזור הדם הספונטני

Neonatal piglets have been extensively used as translational models for perinatal asphyxia. In 2007, we adapted a well-established piglet asphyxia model ...