这项工作是由R01 GM088156和T32 HL007713-18的支持。我们要感谢比尔彭涅和迈克尔·卡曼来自宾夕法尼亚州研究仪器中心的大学为他们在我们的组装翻正反射装置的帮助。

所有涉及此概括动物的程序已获宾夕法尼亚州的机构动物护理和使用委员会的大学。 1。该测试装置的概述<ol><li>该试验装置由24个透明的丙烯酸圆柱形腔室10厘米的长度和直径5厘米（2​​00毫升总体积）。这个尺寸适用于典型的25克成年小鼠。钱伯斯有端口每端的气体入口和出口。出口端是可移动的，这样的动物可以被很容易地装入腔室中。气口开口仔细密封带聚四氟乙烯生料带，而橡胶O型圈垫片用来密封的圆柱形腔的可拆卸的。 </li><li>每个室被安装在一个机架上，它位于内部的水浴中。齿条配合，使得腔室（下面进气口），仅下部被淹没。为稳定，该腔室的后端靠在支承，这样整个CHAMB呃坐镇水平。这将确保同浴的整个腔甚至接触。 </li><li>聚乙烯管材氧气罐连接到麻醉剂蒸发器，然后通过一个10升/分钟流量仪表。管子分成长度相等的25小直径的电阻，以确保相等的流量输送到各腔室24中和至代理分析器。 </li><li>真空管线退出每个腔室在气体入口的另一端。这促进了单向流动，消除呼出的二氧化碳的再呼吸。真空线结合在一个歧管连接到一个内部的吸入管路。沿主真空线的弹出式截止阀，确保每个腔室中的大气压力条件。 </li><li>浴填充有足够的水充分接触的每个腔室的底部。的水通过浴用泵循环，并保持在一恒定37℃。 </li></ol> 2。检查系统之前曝光<ol><li> Ç赫克说水浴的温度在整个浴37℃。 </li><li>氧气流的速度为5升/分（200毫升/每室+代理分析器分钟）。淹没每个腔室在水中，寻找气泡或水进入室内，这两者是指示泄漏。在开始实验前封住泄漏。 </li><li>对于每个腔室，连接在线路500毫升/分钟的流量计腔后，以确保流在每个25个气体管道的平衡。这确保了输入5升/分钟流量将被均匀地分布，使得每个室接收200毫升/分钟流动。没有收到预期的任何流室应该有它的流入和流出管道检查障碍物。 </li><li>校准试剂分析仪，以确保当100％的氧气流过0.00％的异氟醚的读数。 </li></ol> 3。注入温度转发<ol><li>前一星期习惯，麻醉每只小鼠用2％异氟醚。 </li><li>消毒用优碘背颈部。 </li><li>注射用无菌的，预包装注射器针头肩胛骨之间的温度下转发皮下注射。 </li><li>监视注射部位每日进行感染和应答器的迁移。 </li></ol> 4。习惯于对动物测试钱伯斯<ol><li>第一次评估前四天，将所有小鼠成2小时100％的氧气流单独的腔室。 </li><li>四个日前评估，避免因新的环境压力的影响因子重复步骤4.1日。 </li></ol> 5。进行药物干预是您希望测试效果上麻醉灵敏度<ol><li>这种干预可能是一个立体定位注射入脑24，静脉内或腹膜内注射25或递送药物至特定脑区域的一个特定的部分通过套管26。 </li><li>因为相对于一个天真的动物这些程序本身可能会改变麻醉剂的敏感性，适当的对照组应该接受同样的程序与车辆注射。 </li><li>确保药物干预行动有一个适当的时间长，如果你打算做一个逐步提高和/或降低测定灵敏度麻醉剂如步骤6所示，否则，请跳到步骤7。 </li></ol> 6。采用逐步EC 50测定感应和出苗评估麻醉灵敏度<ol><li>将每个动物成单独的腔室与100％的氧气流动。 </li><li>设置在异氟醚浓度为0.4％* 15分钟。在此期间的最后2分钟，轻轻滚动腔直到鼠标被放置在它的后面评估每个动物的翻正反射。该翻正反射被认为是完整的，当且仅当鼠标能够恢复所有它的爪子在2分钟内室的地板上。 <ol><li> *请注意，0.4％异氟醚是一种subhypnotic剂量C57BL/6J小鼠。如果任何小鼠失去其翻正反射在第一步骤中，初始剂量为过大，应减少后的日子。 </li></ol></li><li>记录翻正反射为每个鼠标的状态，并扫描每个小鼠为温度数据。模板记录如表1所示。 </li><li>增加的异氟烷浓度〜0.05％，持续15分钟，并重复步骤7.2。继续这样做，直到所有的动物已经失去了它们的翻正反射。 </li><li>可选：重复相同的步骤，以减少分步进行异氟醚的剂量，直到所有的动物都恢复了其翻正反射（见步骤6.3）。 </li><li>要结束实验，关闭异氟醚和冲洗整个系统与100％氧气15分钟。这将有助于防止缺氧的小鼠被送回他们的家笼前恢复，并会保护experimeNTER从任何麻醉风险。 </li><li>可选：如果动物或麻醉剂浓度的数的个数是由于资源或时间约束的限制，曲线拟合参数估计值，尤其是山的斜坡，可能有低估的，虚假的低误差估计。在这种情况下，可能有必要重复在上最多两个额外的实验日步骤6.1-6.6充分获得真实Hill斜率的参数和其相应的误差估计中描述的麻醉剂敏感性测定。 </li></ol> 7。评估麻醉灵敏度的短期变化与时间的出现<ol><li>将每个动物成单独的腔室与100％的氧气流动。 </li><li>设置在异氟醚浓度为1.2％，其对应于感应ED 99为野生型C57BL/6J小鼠20。保持30-60分钟取决于急性干预行动的预期持续时间。 </li><li>在确认翻正反射消失所有的动物轻轻滚动每个腔室，直到老鼠被放置在他们的后面。 </li><li>关闭异氟醚和流量100％的氧气。测量时间，直到每个动物恢复其翻正反射。这是由所有4爪放置在腔室的地板上定义并通过三个连续的测试，一个完整的翻正反射的存在证实。 </li></ol>

<ol>
	<li>Meyer, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zur+theorie+der+alkoholnarkose.+I.+Mittheilung.+Welche+Eigenschaft+der+An#228;sthetica+bedingt+ihre+narkotische+Wirkung?.">Zur theorie der alkoholnarkose. I. Mittheilung. Welche Eigenschaft der An#228;sthetica bedingt ihre narkotische Wirkung?.</a> Naunyn Schmiedebergs Arch. Exp. Pathol. Pharmakol. 42, 109-137 .</li><li>Overton, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Studien &#252;ber die Narkose: Zugleich ein Beitrag zur allgemeinen Pharmakologie. , (1901).</li><li>Bignall, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ontogeny+of+levels+of+neural+organization:+the+righting+reflex+as+a+model.">Ontogeny of levels of neural organization: the righting reflex as a model.</a> Exp. Neurol. 3 (3), 566-573 (1974).</li><li>Franks, N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=General+anaesthesia:+from+molecular+targets+to+neuronal+pathways+of+sleep+and+arousal.">General anaesthesia: from molecular targets to neuronal pathways of sleep and arousal.</a> Nat. Rev. Neurosci. 9 (5), 370-386 (2008).</li><li>Smith, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Responses+of+laboratory+animals+to+some+injectable+anaesthetics.">Responses of laboratory animals to some injectable anaesthetics.</a> Lab. Anim. 27 (1), 30-39 (1993).</li><li>Schernthaner, A., Lendl, C., Busch, R., Henke, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+evaluation+of+three+medetomidine--midazolam--ketamine+combinations+for+neutering+of+ferrets+(Mustela+putorius+furo)].">Clinical evaluation of three medetomidine--midazolam--ketamine combinations for neutering of ferrets (Mustela putorius furo)].</a> Berliner und M&#252;nchener tier&#228;rztliche Wochenschrift. 121 (1-2), 1-10 (2008).</li><li>Mohammad, F. K., Zangana, I. K., Abdul-Latif, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medetomidine+sedation+in+sheep.">Medetomidine sedation in sheep.</a> Zentralblatt f&#252;r Veterin&#228;rmedizin. Reihe A. 40 (5), 328-331 (1993).</li><li>Nicholls, E. A., Louie, G. L., Prokocimer, P. G., Maze, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Halothane+anesthetic+requirements+are+not+affected+by+aminophylline+treatment+in+rats+and+dogs.">Halothane anesthetic requirements are not affected by aminophylline treatment in rats and dogs.</a> Anesthesiology. 65 (6), 637-641 (1986).</li><li>Tung, A., Szafran, M. J., Bluhm, B., Mendelson, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sleep+Deprivation+Potentiates+the+Onset+and+Duration+of+Loss+of+Righting+Reflex+Induced+by+Propofol+and+Isoflurane.">Sleep Deprivation Potentiates the Onset and Duration of Loss of Righting Reflex Induced by Propofol and Isoflurane.</a> Anesthesiology. 97 (4), 906-911 (2002).</li><li>Pal, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+Minimum+Alveolar+Concentration+for+Isoflurane+and+Sevoflurane+in+a+Rodent+Model+of+Human+Metabolic+Syndrome.">Determination of Minimum Alveolar Concentration for Isoflurane and Sevoflurane in a Rodent Model of Human Metabolic Syndrome.</a> Anesth. 2 (2), 297-302 (2012).</li><li>Eger, E. I., Saidman 2nd, ., J, L., Brandstater, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temperature+dependence+of+halothane+and+cyclopropane+anesthesia+in+dogs:+correlation+with+some+theories+of+anesthetic+action.">Temperature dependence of halothane and cyclopropane anesthesia in dogs: correlation with some theories of anesthetic action.</a> Anesthesiology. 26 (6), 764-770 (1965).</li><li>Vitez, T. S., White, P. F., Eger, E. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=2nd+Effects+of+hypothermia+on+halothane+MAC+and+isoflurane+MAC+in+the+rat.">2nd Effects of hypothermia on halothane MAC and isoflurane MAC in the rat.</a> Anesthesiology. 41 (1), 80-81 (1974).</li><li>Antognini, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypothermia+eliminates+isoflurane+requirements+at+20+degrees+C.">Hypothermia eliminates isoflurane requirements at 20 degrees C.</a> Anesthesiology. 78 (6), 1152-1156 (1993).</li><li>McKenzie, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+temperature+on+the+anaesthetic+potency+of+halothane,+enflurane+and+ethanol+in+Daphnia+magna+(Cladocera:+Crustacea).">Effects of temperature on the anaesthetic potency of halothane, enflurane and ethanol in Daphnia magna (Cladocera: Crustacea).</a> Comp. Biochem. Physiol. C. 101 (1), 15-19 (1992).</li><li>Icaza, E. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isoflurane-Induced+Changes+in+Righting+Response+and+Breathing+are+Modulated+by+RGS+Proteins.">Isoflurane-Induced Changes in Righting Response and Breathing are Modulated by RGS Proteins.</a> Anesth. Analg. 109 (5), 1500-1505 (2009).</li><li>Drexler, B., Antkowiak, B., Engin, E., Rudolph, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+characterization+of+anesthetic+targets+by+mouse+molecular+genetics+approaches.">Identification and characterization of anesthetic targets by mouse molecular genetics approaches.</a> Can. 2 (2), 178-190 (2011).</li><li>Wafford, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differentiating+the+role+of+gamma-aminobutyric+acid+type+A+(GABAA)+receptor+subtypes.">Differentiating the role of gamma-aminobutyric acid type A (GABAA) receptor subtypes.</a> Biochem. 32 (Pt3), 553-556 (2004).</li><li>Lakhlani, P. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Substitution+of+a+mutant+&#945;2a-adrenergic+receptor+via+"hit+and+run"+gene+targeting+reveals+the+role+of+this+subtype+in+sedative,+analgesic,+and+anesthetic-sparing+responses+in.">Substitution of a mutant &#945;2a-adrenergic receptor via "hit and run" gene targeting reveals the role of this subtype in sedative, analgesic, and anesthetic-sparing responses in.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. 94 (18), 9950-9955 (1997).</li><li>Sonner, J. M., Gong, D., Eger, E. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Naturally+Occurring+Variability+in+Anesthetic+Potency+Among+Inbred+Mouse+Strains.">Naturally Occurring Variability in Anesthetic Potency Among Inbred Mouse Strains.</a> Anesth. 91 (3), 720-726 (2000).</li><li>Sun, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+throughput+modular+chambers+for+rapid+evaluation+of+anesthetic+sensitivity.">High throughput modular chambers for rapid evaluation of anesthetic sensitivity.</a> BMC Anesthesiol. 6 (1), 13 (2006).</li><li>Hu, F. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypnotic+Hypersensitivity+to+Volatile+Anesthetics+and+Dexmedetomidine+in+Dopamine+&#946;-Hydroxylase+Knockout+Mice.">Hypnotic Hypersensitivity to Volatile Anesthetics and Dexmedetomidine in Dopamine &#946;-Hydroxylase Knockout Mice.</a> Anesthesiology. , (2012).</li><li>Kelz, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+essential+role+for+orexins+in+emergence+from+general+anesthesia.">An essential role for orexins in emergence from general anesthesia.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105 (4), 1309-1314 (2008).</li><li>Moore, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+Activation+of+Sleep-Promoting+VLPO+Neurons+by+Volatile+Anesthetics+Contributes+to+Anesthetic+Hypnosis.">Direct Activation of Sleep-Promoting VLPO Neurons by Volatile Anesthetics Contributes to Anesthetic Hypnosis.</a> Curr. 22 (21), 2008-2016 (2012).</li><li>Kirby, E. D., Jensen, K., Goosens, K. A., Kaufer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stereotaxic+Surgery+for+Excitotoxic+Lesion+of+Specific+Brain+Areas+in+the+Adult+Rat.">Stereotaxic Surgery for Excitotoxic Lesion of Specific Brain Areas in the Adult Rat.</a> J. Vis. Exp. (65), e4079 (2012).</li><li>Machholz, E., Mulder, G., Ruiz, C., Corning, B. F., Pritchett-Corning, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Manual+Restraint+and+Common+Compound+Administration+Routes+in+Mice+and+Rats.">Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats.</a> J. Vis. Exp. (67), e2771 (2012).</li><li>Geiger, B. M., Frank, L. E., Caldera-Siu, A. D., Pothos, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survivable+Stereotaxic+Surgery+in+Rodents.">Survivable Stereotaxic Surgery in Rodents.</a> J. Vis. Exp. (20), e880 (2008).</li><li>Szymusiak, R., Alam, N., Steininger, T. L., McGinty, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sleep-waking+discharge+patterns+of+ventrolateral+preoptic/anterior+hypothalamic+neurons+in+rats.">Sleep-waking discharge patterns of ventrolateral preoptic/anterior hypothalamic neurons in rats.</a> Brain Res. (1-2), 178-188 (1998).</li><li>Nelson, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+sedative+component+of+anesthesia+is+mediated+by+GABAA+receptors+in+an+endogenous+sleep+pathway.">The sedative component of anesthesia is mediated by GABAA receptors in an endogenous sleep pathway.</a> Nat. Neurosci. 5 (10), 979-984 (2002).</li><li>Li, K. Y., Guan, Y., Krnjevi&#263;, K., Ye, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Propofol+Facilitates+Glutamatergic+Transmission+to+Neurons+of+the+Ventrolateral+Preoptic+Nucleus.">Propofol Facilitates Glutamatergic Transmission to Neurons of the Ventrolateral Preoptic Nucleus.</a> Anesthesiology. 111 (6), 1271-1278 (2009).</li><li>Friedman, E. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Conserved+Behavioral+State+Barrier+Impedes+Transitions+between+Anesthetic-Induced+Unconsciousness+and+Wakefulness:+Evidence+for+Neural+Inertia.">A Conserved Behavioral State Barrier Impedes Transitions between Anesthetic-Induced Unconsciousness and Wakefulness: Evidence for Neural Inertia.</a> PLoS ONE. 5 (7), e11903 (2010).</li><li>Lu, J., Greco, M. A., Shiromani, P., Saper, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+lesions+of+the+ventrolateral+preoptic+nucleus+on+NREM+and+REM+sleep.">Effect of lesions of the ventrolateral preoptic nucleus on NREM and REM sleep.</a> J. Neurosci. 20 (10), 3830-3842 (2000).</li><li>Sun, X., Whitefield, S., Rusak, B., Semba, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+analysis+of+suprachiasmatic+nucleus+projections+to+the+ventrolateral+preoptic+area+in+the+rat.">Electrophysiological analysis of suprachiasmatic nucleus projections to the ventrolateral preoptic area in the rat.</a> Eur. J. Neurosci. 14 (8), 1257-1274 (2001).</li><li>Ma, J., Shen, B., Stewart, L. S., Herrick, I. A., Leung, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+septohippocampal+system+participates+in+general+anesthesia.">The septohippocampal system participates in general anesthesia.</a> J. Neurosci. 22 (2), RC200 (2002).</li><li>Leung, L. S., Ma, J., Shen, B., Nachim, I., Luo, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medial+septal+lesion+enhances+general+anesthesia+response.">Medial septal lesion enhances general anesthesia response.</a> Exp. Neurol. , (2013).</li><li>Solt, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methylphenidate+Actively+Induces+Emergence+from+General+Anesthesia.">Methylphenidate Actively Induces Emergence from General Anesthesia.</a> Anesthesiology. 115 (4), 791-803 (2011).</li></ol>

作者什么都没有透露。

虽然在一个单一的鼠标评估LORR的是一个看似简单的任务，但它仍然是必不可少的，以保持学科之间是相同的生理条件，以便收集从一组动物的可靠数据。这里提出的严格调控，高容量翻正反射消失设备提供了一种标准化的实验和最大限度地提高效率。按照体温调节和平等的流量分配的基本原则，这个系统可以很容易地重新创建和定制，以适应个人的实验者的需求。室尺寸可以按比例用于其它物种...

全身麻醉是由他们造成的各种各样的品种，但在解释如何毒品这样一个多样化的类都可以引出一个单一的端点仍然遥遥无期催眠的可逆状态的能力来定义。一些理论已经假定多年来，从麻醉效能和脂溶性的迈耶-奥弗顿的相关性，这表明一般膜破坏为基础进行催眠1,2。最近的证据表明，影响神经信号蛋白指标来麻醉作用作出贡献。小鼠已被证明是探索这些理论，因为小鼠和人的麻醉剂响应之间的同源性的一个不可缺少的模型。虽然鼠标不能询问其在全身麻醉下的主观意识，某些原始反射服务啮齿动物催眠作为有用的替代措施。在出生后的头几天，老鼠制定一个反身扶正RESPONSE，防止他们从被动地被放置在仰卧位3。麻醉的剂量在哪个鼠标失去其翻正反射以及相关人类催眠剂量4。 翻正反射（翻正反射消失）的损失评估，已经成为一种广泛使用的实验室标准在小鼠试验麻醉药的敏感性，以及其他多种物种，包括大鼠，豚鼠，兔，雪貂，羊，狗5-8。一个给定的麻醉剂在其翻正反射消失将发生一个物种的成员的剂量是非常一致的，但它可以显著由环境因素进行移位。例如，睡眠剥夺大鼠是易失性和静脉麻醉药9和大鼠高的有氧代谢能力更敏感是异氟醚10不太敏感。低温也已经显示减少的物种11-14的一个大范围所需的催眠许多麻醉药的剂量。为了可靠地识别麻醉剂的剂量在该LORR发生在一组实验动物，这是至关重要的评估环境被严格控制，以最大限度地减少应力，保持euthermia，并提供药物等量的所有受试者。这并不奇怪，遗传因素也被称为改变麻醉剂灵敏度15-18。因此，应认真考虑并给予控制的遗传背景19。 我们已经制定，以确保相同的麻醉气体输送到每个24小鼠的同时保持恒定37℃环境下的设备。我们的曝光室的透明圆柱形设计允许快速翻正反射消失评估和易于集成的遥测生理测量。此系统已被证明是准确测量的异氟醚，氟烷，七氟醚诱导EC 50和时间出现在野生型小鼠20。我们也使用这个系统观察小鼠的变化麻醉敏感性与基因突变和有针对性的下丘脑病变21-23。这里我们描述了两种方法，其中麻醉剂的敏感性可能以后使用我们的控制环境装置的药物干预进行评估。挥发性麻醉诱导和苏醒灵敏度稳态表型，需要8-10个小时，并因此最好专门针对研究中，实验条件不改变，如慢性或长效药物干预。然而，对于短效的治疗，其效果显著随时间消散，我们也提出了一个简单的程序，以评估下列立体定位，有针对性的显微注射或静脉注射药物治疗的显著影响麻醉中出现翻正反射的变化。这些测试代表一个小的子集的此受控环境系统中的潜在应用，这可以适用于任何数量的主旨的各种品种的学分收取任何类型的吸入治疗的。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="461">
	<colgroup>
		<col />
		<col span="2" />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:115px;">Name of the Reagent</td>
			<td style="width:88px;">Company</td>
			<td style="width:88px;">Catalogue Number</td>
			<td style="width:171px;">Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:115px;">Oxygen</td>
			<td style="width:88px;">Airgas</td>
			<td style="width:88px;">OX300</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:115px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:88px;">Butler Schein</td>
			<td style="width:88px;"></td>
			<td style="width:171px;">Any volatile anesthetic of interest may be substituted</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:115px;">Name of Material</td>
			<td style="width:88px;">Company</td>
			<td style="width:88px;">Catalogue Number</td>
			<td style="width:171px;">Comments</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:115px;">Mass flow meter- 10 SLPM</td>
			<td style="width:88px;">Omega Engineering</td>
			<td style="width:88px;">FMA-A2309</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:115px;">Mass flow meter- 500 SCCM</td>
			<td style="width:88px;">Omega Engineering</td>
			<td style="width:88px;">FMA-A2305</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:115px;">Anesthetic agent analyzer/gas indicator</td>
			<td style="width:88px;">AM Bickford</td>
			<td style="width:88px;">FI-21 Riken</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:115px;">Heating water pump</td>
			<td style="width:88px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:88px;">13-874-175</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:115px;">Temperature transponders</td>
			<td style="width:88px;">BMDS</td>
			<td style="width:88px;">IPTT-300</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:115px;">RF temperature reader</td>
			<td style="width:88px;">BMDS</td>
			<td style="width:88px;">DAS-6007</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessing changes in volatile general anesthetic sensitivity of mice after local or systemic pharmacological intervention

全身麻醉的一个理想的端点是无意识的状态，也称为催眠。限定在动物催眠状态是较复杂的比它是在人类患者。在啮齿类动物中广泛使用的代孕行为对催眠是翻正反射（翻正反射消失），或在哪个动物不再响应自己与生俱来的本能，以避免背部斜卧的脆弱点的损失。我们已经开发了一个系统，在24只小鼠同时评估翻正反射消失，同时小心地控制潜在的困惑，包括温度波动和变化的气流。这些商会允许麻药敏感性可靠的评估，通过延迟测量以下一个固定的麻醉曝光返回翻正反射（RORR）的。可替代地，在麻醉浓度采用逐步增加（或减少）时，腔室还能够确定一个群体的灵敏度感应（或出现），作为由测量EC 50和希尔斜率。最后，这里所描述的控制的环境腔室可适于用于各种其他用途，包括吸入输送的其他药物，毒物学研究及生命体征的同时实时监控。

图1显示了逐步LORR测定用于确定药物干预的长期效果的工具。鹅膏蕈氨酸（IBA）是谷氨酸的N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体是经常被用来作为兴奋性毒素引起永久性神经病变的激动剂。在这里，我们注入的10 NL 1％IBA的双边入C57BL/6J小鼠的腹外侧视前区（VLPO）前一周的测试。在这个核心的大多数神经元具有发射率低清醒时和在非快速眼动睡眠，快速眼动睡眠，并与接触催眠剂量的全身麻?...

Watch this Scientific Journal Video about Assessing Changes in Volatile General Anesthetic Sensitivity of Mice after Local or Systemic Pharmacological Intervention at JoVE.com

Assessing Changes in Volatile General Anesthetic Sensitivity of Mice after Local or Systemic Pharmacological Intervention

翻正反射消失长期以来一直作为一个标准的代孕行为的无意识，也叫催眠，在实验室动物。改变中的挥发性麻醉剂的敏感性引起的药理学干预可以仔细控制的高通量的评估系统，该系统可适合用于递送任何吸入治疗进行检测。

局部或全身药物干预后评估的变化小鼠中挥发性全身麻醉药敏感性

One desirable endpoint of general anesthesia is  the state of unconsciousness, also known as hypnosis. Defining the hypnotic state in animals is  less ...

assessing-changes-volatile-general-anesthetic-sensitivity-mice-after

Research

Education

JoVE Journal

JoVE Core

Pharmacology

Medicine

Unit 1

Local Anesthetics

Drugs for Pain Management: Opioid Analgesics and General Anesthetics

SCIENTISTS IN ACTION

13.5K 次观看.  Perelman School of Medicine, University of Pennsylvania. 翻正反射消失长期以来一直作为一个标准的代孕行为的无意识，也叫催眠，在实验室动物。改变中的挥发性麻醉剂的敏感性引起的药理学干预可以仔细控制的高通量的评估系统，该系统可适合用于递送任何吸入治疗进行检测。 