作者要感谢FORTE项目，由托斯卡纳大区（POR CREO FESR 2007-2013年，坂东的Unico R＆S 2012）资助，欧盟FP7 ECHORD ++的实验，部分支持的科研活动LA-玫瑰，和FP7 BiophotonicPlus工程“LITE”授托斯卡纳地区。

这项研究是与前瞻性审批医院的伦理委员会进行的;获得知情同意书。这项研究是在遵守赫尔辛基宣言的原则。 1.捐赠内皮准备<ol><li>使用角膜供体为在室温下编写的当地眼库。 </li><li>房中术，拉出捐献角膜从其输出容器分开设置的组织保存和营养是用于角膜运输解决方案。 </li><li>将供体角巩膜缘在一个人工前房，在其中一个可流动液体，并创建一个变量压力;盖与所述组织保持头部角膜。 </li><li>通过3路连接器连接的人工前房（AAC）来填充角膜保存和营养液的注射器。 </li><li>使用的压缩环，以牢固地保持在保持器中的地方。 </li><li>使用SYR英格连接到AAC维持前房压力：补前房与组织保存溶液，直到达到最优化的压力（见1.7）。关闭连接器。 </li><li>测试前房用手指内的压力。改变内压，直到达到（范围在60-70毫米汞柱）的右边的内部压力。关闭三路连接器。 </li><li>测量捐献角膜光学相干Thomography（OCT）的厚度。维持前房与角膜在文书光学前方的固定位置，然后取一个完整的厚度-OCT获取。 </li></ol>捐助内皮2.飞秒激光制备<ol><li>飞秒激光设备下进行捐献角膜压平的。使用激光femtosec切供体组织三种随后削减：后侧切，全板层和前侧切口。设置了三个切口以下参数。<ol><li>对于全片层切（光栅模式，开始时），设置相应的供体角膜（如1.8所述，OCT测量）的最薄点，始终减去95微米的切削深度。在范围0.8-0.9μJ（取决于工作深度）设定脉冲能量。在直径为8.7毫米。设置的切向点分离到2微米。设置径向点分离为2微米。 </li><li>对于前侧切口，设置后的深度比以前的全层状切割30微米深。设置脉冲能量至2.10μJ;直径8.6毫米;当场分离到3微米，而层分离到3微米。 </li><li>对于后侧切口，找到后侧的前深度削减30微米前方比全切薄片状。设置后深度900微米。设置脉冲能量至2.10μJ;直径为8.3毫米;当场分离到2微米;层分离到2微米。 </li></ol></l我&gt; </ol> 3.收件人准备眼<ol><li>准备病人进行手术。做一个4.00毫米角膜切口在12点有4.0毫米预校准刀片。做一个角膜缘穿刺术与1.2mm的预校准刀，放置2点。再拍一张缘穿刺术在6点钟位置有一个30°刺一刀。 </li><li>插入前房维持在患者的前房，通过2点钟探取。 </li><li>用专用钩子执行一个8.2毫米直径的圆形descemetorexis。 </li><li>剥开后弹力膜和内皮细胞的间质后，用弹力钩取出组织。 </li></ol> 4.准备生色<ol><li>把1毫克吲哚菁绿粉在1.5 ml离心管。 </li><li>加无菌水9毫克（ICG的水溶液是10％w / w的）。 </li><li>手动混合ICG粉末和水与金属搅拌器。 </l我&gt; </ol> 5.染色捐助内皮<ol><li>把供体内皮到BUSIN注射器的较宽部分，并在与喷射面接触的内侧。 </li><li>染色施主内皮与发色团溶液的内侧，在其周边部，用刮铲。的正确染色的组织具有均匀浅绿色。等待3分钟步开始之前5.3。 </li><li>拉动BUSIN注射器的前部的供体内皮，轧制。 </li></ol> 6.插入捐助内皮<ol><li>抓住和用无创钳同轴内皮微透镜插入折叠捐助内皮。 </li><li>取出前房维持。 </li><li>缝合角膜切口及穿刺术（步骤执行3.1）与尼龙单10.0施蒂希。 </li><li>注入气泡展开供体组织和其按压在受体角膜。气泡必须COMPletely填充前房空间。 </li></ol> 7.激光焊接<ol><li>将供体微透镜在接受者角膜的中心，从用钩子或移动的气泡从角膜的外部用刮刀内。 </li><li>使用二极管激光器发射在810纳米，配备有一个300微米的纤芯直径无菌光纤，以0.22作为数值孔径（NA）。 </li><li>保持眼球外的纤维笔尖，并提供激光朝向染内皮，透过透明的角膜组织。光纤头是在非接触式的配置。 </li><li>使用以下设置激光：单点发射模式，70-80毫秒脉冲持续时间，每个脉冲35-40兆焦耳。氦氖瞄准横梁上。 </li><li>提供单一的激光光斑在捐助内皮的外围染色。交付点顺序：最后的方面是在供体微透镜的周围斑点环。 2 ADJA之间的距离分点中心为点的直径的两倍。 </li><li>在患者眼睛应用一个接触透镜，连同0.3％妥布霉素和0.1％地塞米松的眼用悬浮液。 </li></ol>

<ol>
	<li>Tan, D. T., Dart, J. K., Holland, E. J., Kinoshita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+transplantation.">Corneal transplantation.</a> Lancet. 379 (9827), 1749-1761 (2012).</li><li>El Husseiny, M. A., Manero, F., Gris, O., Elies, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Historical+Review+and+Update+of+Surgical+Treatment+for+Corneal+Endothelial+Diseases.">Historical Review and Update of Surgical Treatment for Corneal Endothelial Diseases.</a> Ophthalmol Ther. , (2014).</li><li>Rossi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser+tissue+welding+in+ophthalmic+surgery.">Laser tissue welding in ophthalmic surgery.</a> J Biophotonics. 1 (4), 331-342 (2008).</li><li>Pini, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combining+femtosecond+laser+ablation+and+diode+laser+welding+in+lamellar+and+endothelial+corneal+transplants.">Combining femtosecond laser ablation and diode laser welding in lamellar and endothelial corneal transplants.</a> Proc. SPIE Ophthalmic Technologies XVIII. 6 (844), 684411-1-684411-7 (2008).</li><li>Rossi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=All-laser'+endothelial+corneal+transplant+in+human+patients.">All-laser' endothelial corneal transplant in human patients.</a> Proc. SPIE Ophthalmic Technologies XXII. 8209, 82091O-1-82091O-3 (2012).</li><li>Rossi, F., Pini, R., Menabuoni, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+and+model+analysis+on+the+temperature+dynamics+during+diode+laser+welding+of+the+cornea.">Experimental and model analysis on the temperature dynamics during diode laser welding of the cornea.</a> J Biomed Opt. 12 (1), 014031-1-014031-7 (2007).</li><li>Menabuoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser-assisted+corneal+welding+in+cataract+surgery:+retrospective+study.">Laser-assisted corneal welding in cataract surgery: retrospective study.</a> J Cataract Refract Surg. 33 (9), 1608-1612 (2007).</li><li>Buzzonetti, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser+Welding+in+Penetrating+Keratoplasty+and+Cataract+Surgery+in+Pediatric+Patients.+Early+Results.">Laser Welding in Penetrating Keratoplasty and Cataract Surgery in Pediatric Patients. Early Results.</a> J Cataract Refract Surg. 39 (12), 1829-1834 (2013).</li><li>Menabuoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+'anvil'+profile+in+femtosecond+laser-assistedpenetrating+keratoplasty.">The 'anvil' profile in femtosecond laser-assistedpenetrating keratoplasty.</a> Acta Ophthalmol. 91 (6), e494-e495 (2013).</li><li>Canovetti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser-assisted+penetrating+keratoplasty:+one+year&#8217;s+results+in+patients,+using+a+laser-welded+&#8220;anvil&#8221;-profiled+graft.">Laser-assisted penetrating keratoplasty: one year&#8217;s results in patients, using a laser-welded &#8220;anvil&#8221;-profiled graft.</a> Am J Ophthalmol. 158 (4), 664-670 (2014).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

“全激光”内皮移植是一种原始的方法微创角膜移植。 所有在协议中所描述的程序进行，在手术室内进行，观察卫生和消毒过程是在手术常见的做法，如用无菌手套，长袍，面罩和帽。 ICG的溶液的制备在手术室，前不久其在染色施主内皮应用。 ICG的粉末，水和所有用于制备染色溶液的工具是无菌的，并且可商购的用于在人受试者中的使用。激光光纤灭菌并它被安装在一特?...

在这项工作中，我们提出了一种原始的方法角膜内皮移植术的基础上，使用飞秒激光，以制备供体组织和近红外二极管激光器将其焊接到收件人床。供体角膜术测量要正确设计供体组织尺寸。角膜内皮移植术已经提出在最近几年，以取代穿透性角膜移植术治疗内皮疾病1,2。该技术的主要优点是视力恢复快，相对于外科手术，移植物排斥的风险降低和眼完整性的保存期间穿透性角膜移植术，减少麻醉。的主要危险因素是术后施主微透镜错位。的标准技术是通过将供体的内皮在其最终位置，它是由喷射的气泡的保持进行：无缝合的使用，因为在机械，生物物理和尺寸恰拉的内皮cteristics。此外，视力恢复可以供体和受体组织之间的不匹配的，主要是因为由于一个厚的组织移植的限制。 在这里，我们提出在执行角膜内皮移植术，可以克服这些主要问题的过程。施主内皮可通过使用激光焊接技术来保证在其最终位置。这是一个控制和局部光热过程：它可诱发在捐献者/接受者接口。据研究，在过去十年，在穿透性角膜移植术和血管内皮3-5的移植方案。近红外光（波长：810纳米）通过低功率二极管激光器射出被传递向在伤口部位的生物组织。角膜是自然透明的该波长：为了使此组织吸收的激光光，有必要用一个生色留下污点。所提出的染料是一种无菌饱和吲哚菁绿（ICG）D水溶液。我们表明，当角膜组织的正常沾上这个ICG制剂，它显示了在810纳米6的吸收峰。此外，ICG被广泛用于临床诊断和其安全性已被证实在人受试者。染色角膜吸收二极管激光能量和主要产生的效果是一种受控的温度上升在焊接部位。无热效应引起的未染色的组织。温度增强诱导所述基质胶原可逆的热变性，与伤口壁的冷却时立即closuring。这种激光焊接效果首先表现在白内障手术7,8和穿透性角膜移植9,10。我们展现本文优化的方法已经研究了在角膜内皮移植术的应用。 在建议手术治疗，单个激光点（持续几毫秒）ARê输送到组织，导致点尺寸（几百微米的直径）内的局部的光热效应：诱导效应是硬激光​​焊接，由密闭在捐献者/主机接口胶原的光凝。胶原变性在焊接现场的结果是供体和宿主组织之间有很强的粘合性，从而提供了一种缝合效果是不可能获得使用标准技术（针）。所述组织恢复他自然外观在很短的跟进（1个月）和供体/宿主组织之间的粘合力是通过在愈合阶段的非常早的阶段提供的焊接改善。 为了避免角膜内皮移植术的另一主风险， 即厚的供体组织的移植，intrasurgical光学相干断层扫描（OCT）用于：商用装置测量供体角膜的厚度，以使得正确的切割形状可设计成具有该femtosec激光。所提出的“全激光”内皮移植这样看来，以改善这种微创手术的临床效果。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Indocyanine Green</td>
			<td>Pulsion Medical Systems, Germany</td>
			<td>ICG-PULSION (http://www.pulsion.com/international-english/perfusion/icg-pulsion/)</td>
			<td>Alternative product: IC-GREEN, Akorn&#160; Inc., Lake Forest, Illinois- US (http://www.icginjection.com/)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Femtosecond Laser&#160;</td>
			<td>Abbott Medical Optics,&#160; Abbott Laboratories Inc. Abbott Park, Illinois, USA</td>
			<td>iFS150 (http://www.abbottmedicaloptics.com/products/refractive/ilasik/ifs-advanced-femtosecond-laser)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical Coherence Tomography (OCT)</td>
			<td>Carl-Zeiss Meditec, Dublin, California- US (http://www.zeiss.com/meditec/en_de/home.html)</td>
			<td>Visante</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diode Laser</td>
			<td>E.l.En. Group s.pa., Calenzano-FI, Italy (http://www.elengroup.com/en/divisions/medical)</td>
			<td>Mod. WELD 800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Artificial Anterior Chamber</td>
			<td>CORONET, corneal graft products. Network Medical Products Ltd. Coronet House, Kearsley Road, Ripon, North Yorkshire, HG4 2SG, UK</td>
			<td>&#160;Artificial Anterior Chamber (A.A.C.) with large and small tissue-retaining heads. Code 51-935 (http://www.networkmedical.co.uk/ophthalmic_artificial_anterior_chamber.html)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solution for tissue preservation and nutrition&#160;&#160;</td>
			<td>&#160;AL.CHI.MI.A. Srl, Viale Austria 14, 35020 - Ponte S. Nicol&#242; - PD 
			&#160;ITALY</td>
			<td>Carry-C media for corneal deturgescence and transport at room temperature - 12 x 50 ml (http://www.alchimiasrl.com/en/organ-culture-at-31&#176;-c-eb/carry-c-eb)</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an &#8220;all-laser&#8221; endothelial transplant

The &#8220;all laser&#8221; assisted endothelial keratoplasty is a procedure that is performed with a femtosecond laser used to cut the donor tissue at an intended depth, and a near infrared diode laser to weld the corneal tissue. The proposed technique enables to reach the three main goals in endothelial keratoplasty: a precise control in the thickness of the donor tissue; its easy insertion in the recipient bed and a reduced risk of donor lenticule dislocation. The donor cornea thickness is measured in the surgery room with optical coherence tomography (OCT), in order to correctly design the donor tissue dimensions. A femtosecond laser is used to cut the donor cornea. The recipient eye is prepared by manual stripping of the descemetic membrane. The donor endothelium is inserted into a Busin-injector, the peripheral inner side is stained with a proper chromophore (a water solution of Indocyanine Green) and then it is pulled in the anterior chamber. The transplanted tissue is placed in the final and correct location and then diode laser welding is induced from outside the eyeball. The procedure has been performed on more than 15 patients evidencing an improvement in surgery performances, with a good recovery of visual acuity and a reduced donor lenticule dislocation event.

“全激光”手术建议进行微创角膜移植。该过程容易进行（参见图1）：相对于标准内皮移植测量角膜厚度，染色的供体组织，并提供激光被添加的唯一步骤。所取得的优势很大程度上弥补了几分钟增加手术时间。使用术OCT的测量供体角膜厚度和用于定制供体微透镜尺寸的飞秒激光使供血者/主机接口粘结的提高（参见图2）。在这样做时，手术的目的是以下的需求和单个?...

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An &amp;#8220;All-laser&amp;#8221; Endothelial Transplant

An all laser procedure is proposed in the endothelial transplant. The surgical technique is based on the use of a femtosecond laser to prepare the donor tissue. Laser welding technique is then used to secure the donor endothelium in the correct position.

“全激光”内皮移植

The &#8220;all laser&#8221; assisted endothelial keratoplasty is a procedure that is performed with a femtosecond laser used to cut the donor tissue at an ...

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Medicine

An &#8220;All-laser&#8221; Endothelial Transplant

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