Os autores agradecem a FORTE projeto, financiado pela Região Toscana (POR Creo FESR 2007-2013, Bando Unico R &amp; S 2012), os FP7 ECHORD UE ++ Experiência LA-ROSES que apoiaram parcialmente as actividades de investigação, eo 7. ° PQ BiophotonicPlus Project &quot;LITE&quot; concedido pela Região Toscana.

O estudo foi realizado com a aprovação do Comitê de Ética prospectivamente do hospital; foi obtido consentimento informado. O estudo foi em adesão aos princípios da Declaração de Helsinki. 1. Preparação de Doadores endotélio <ol><li> Use uma córnea doadora elaborado pelo banco de olhos local à temperatura ambiente. </li><li> Na sala de cirurgia, puxe a córnea do doador de seu contêiner de entrega e separou a solução para preservação de tecido e nutrição que é usado para o transporte de córnea. </li><li> Coloque o doador córneo-escleral aro mais de uma câmara anterior artificial, na qual um líquido possa fluir e criar uma pressão variável; cobrir a córnea com a cabeça de retenção de tecido. </li><li> Ligue a câmara anterior artificial (AAC) através de um conector de 3 vias para uma seringa cheia com a preservação da córnea e nutrição líquida. </li><li> Use o anel de compressão para manter o retentor firmemente no lugar. </li><li> Use a syrInge ligado à AAC para manter a pressão intracameral: encher a câmara anterior com a solução de preservação do tecido até atingir a pressão óptima (ver 1.7). Feche o conector. </li><li> Testar a pressão dentro da câmara anterior com um dedo. Alterar a pressão no interior, até atingir a pressão interna direita (na gama de 60-70 mmHg). Feche o conector de 3 vias. </li><li> Meça a espessura da córnea do doador com Coerência Óptica Thomography (OCT). Manter a câmara anterior com que córnea em uma posição fixa na frente das óptica do aparelho e, em seguida, tomar uma aquisição espessura-OCT completo. </li></ol> 2. Preparação de laser femtosegundo endotélio Donor <ol><li> Execute aplanação da córnea do doador sob o dispositivo a laser de femtossegundos. Use o laser femtosec para cortar o tecido do doador com três cortes subsequentes: corte lateral posterior, lamelar completo e corte lateral anterior. Defina os seguintes parâmetros para os três cortes.<ol><li> Para o corte total lamelar (padrão de quadro, a começar), definida a profundidade de corte que corresponde ao ponto mais fino da córnea do doador (medido com a OCT como descrito em 1.8), sempre subtraindo 95 uM. Definir a energia de impulsos na gama de 0,8-0,9 μJ (dependendo da profundidade de trabalho). Definir o diâmetro de 8,7 milímetros. Defina a separação ponto tangencial a 2 m. Defina a separação ponto radial até 2 m. </li><li> Para o corte lateral anterior, defina a profundidade posterior 30 mm mais profundo do que o corte lamelar anterior completo. Defina a energia de pulso para 2,10 μJ; o diâmetro de 8,6 mm; a separação local a 3 um, enquanto a camada de separação a 3 um. </li><li> Para o corte do lado posterior, localize a profundidade anterior da face posterior 30 um corte anterior de corte lamelar completo. Defina a profundidade posterior a 900 mm. Defina a energia de pulso para 2,10 μJ; o diâmetro e 8,3 mm; a separação local a 2 uM; a separação da camada de 2 um. </li></ol></li&gt; </ol> 3. Destinatário Preparação Eye <ol><li> Preparar o paciente para a cirurgia. Faça uma incisão na córnea 4,00 milímetros em 12 horas com 4,0 milímetros de lâmina pré-calibrado. Faça uma paracentese de limbo com um 1,2 milímetros de lâmina pré-calibrado, colocado a duas horas. Faça outro paracentesis limbo às 6 horas com um 30 ° faca facada. </li><li> Insira um mantenedor da câmara anterior na câmara anterior do paciente, através das 2 paracentesis o&#39;clock. </li><li> Execute uma diâmetro 8,2 milímetros descemetorexis circular com o gancho dedicado. </li><li> Tira a membrana Descemet e endotélio do estroma posterior e remover os tecidos com um gancho de Descemet. </li></ol> 4. Cromóforo Preparação <ol><li> Coloque 1 mg de Indocianina pó verde em um tubo de microcentrífuga de 1,5 ml. </li><li> Adicionar 9 mg de água estéril (a solução ICG água é de 10% w / w). </li><li> Misturar o pó manualmente ICG e a água com um agitador de metal. </li&gt; </ol> 5. Coloração de endotélio Donor <ol><li> Coloque o endotélio dador para a parte mais larga de um neg-injector, com o lado de dentro em contacto com a superfície do injector. </li><li> Manchar o lado interior do endotélio do dador com a solução cromóforo, na sua parte periférica, usando uma espátula. O tecido corretamente manchado tem uma cor esverdeada homogénea. Esperar 3 min antes de iniciar o passo 5.3. </li><li> Puxe o endotélio doador na parte anterior da Busin-injector, rolou. </li></ol> 6. Inserir o endotélio Donor <ol><li> Segure e insira o endotélio doador dobrado usando uma pinça atraumática coaxiais para lenticule endotelial. </li><li> Remover o mantenedor da câmara anterior. </li><li> Suturar a incisão na córnea ea paracentese (realizada no passo 3.1) com um único stich Nylon 10.0. </li><li> Injectar uma bolha de ar para desdobrar o tecido do doador e para pressioná-lo contra a córnea destinatário. A bolha de ar deve completely preencher o espaço na câmara anterior. </li></ol> 7. solda a laser <ol><li> Coloque a lentícula doador no centro da córnea do receptor, a partir do interior de um gancho ou de mover o ar do lado de fora da bolha da córnea com uma espátula. </li><li> Usar um laser de diodo emitindo a 810 nm, equipado com um diâmetro de 300 ^ M de núcleo de fibra óptica estéril, com 0,22 como uma abertura numérica (NA). </li><li> Mantenha a ponta da fibra de fora do globo ocular, e entregar a luz laser para o endotélio coradas, através do tecido da córnea transparente. A ponta da fibra está em configuração sem contato. </li><li> Use as seguintes configurações para o laser: modo de emissão local único, 70-80 duração do impulso ms, 35-40 mJ por impulso. He-Ne visando feixe diante. </li><li> Entregar os pontos de laser único na periferia manchado do endotélio doador. Entregar os pontos sequencialmente: o aspecto final é um anel de manchas na periferia da lentícula dador. A distância entre dois adjamanchas centavo centro é o dobro de um diâmetro do ponto. </li><li> Aplicar uma lente de contato no olho do paciente, juntamente com 0,3% de tobramicina e 0,1% dexametasona suspensão oftálmica. </li></ol>

<ol>
	<li>Tan, D. T., Dart, J. K., Holland, E. J., Kinoshita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+transplantation.">Corneal transplantation.</a> Lancet. 379 (9827), 1749-1761 (2012).</li><li>El Husseiny, M. A., Manero, F., Gris, O., Elies, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Historical+Review+and+Update+of+Surgical+Treatment+for+Corneal+Endothelial+Diseases.">Historical Review and Update of Surgical Treatment for Corneal Endothelial Diseases.</a> Ophthalmol Ther. , (2014).</li><li>Rossi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser+tissue+welding+in+ophthalmic+surgery.">Laser tissue welding in ophthalmic surgery.</a> J Biophotonics. 1 (4), 331-342 (2008).</li><li>Pini, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combining+femtosecond+laser+ablation+and+diode+laser+welding+in+lamellar+and+endothelial+corneal+transplants.">Combining femtosecond laser ablation and diode laser welding in lamellar and endothelial corneal transplants.</a> Proc. SPIE Ophthalmic Technologies XVIII. 6 (844), 684411-1-684411-7 (2008).</li><li>Rossi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=All-laser'+endothelial+corneal+transplant+in+human+patients.">All-laser' endothelial corneal transplant in human patients.</a> Proc. SPIE Ophthalmic Technologies XXII. 8209, 82091O-1-82091O-3 (2012).</li><li>Rossi, F., Pini, R., Menabuoni, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+and+model+analysis+on+the+temperature+dynamics+during+diode+laser+welding+of+the+cornea.">Experimental and model analysis on the temperature dynamics during diode laser welding of the cornea.</a> J Biomed Opt. 12 (1), 014031-1-014031-7 (2007).</li><li>Menabuoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser-assisted+corneal+welding+in+cataract+surgery:+retrospective+study.">Laser-assisted corneal welding in cataract surgery: retrospective study.</a> J Cataract Refract Surg. 33 (9), 1608-1612 (2007).</li><li>Buzzonetti, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser+Welding+in+Penetrating+Keratoplasty+and+Cataract+Surgery+in+Pediatric+Patients.+Early+Results.">Laser Welding in Penetrating Keratoplasty and Cataract Surgery in Pediatric Patients. Early Results.</a> J Cataract Refract Surg. 39 (12), 1829-1834 (2013).</li><li>Menabuoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+'anvil'+profile+in+femtosecond+laser-assistedpenetrating+keratoplasty.">The 'anvil' profile in femtosecond laser-assistedpenetrating keratoplasty.</a> Acta Ophthalmol. 91 (6), e494-e495 (2013).</li><li>Canovetti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser-assisted+penetrating+keratoplasty:+one+year&#8217;s+results+in+patients,+using+a+laser-welded+&#8220;anvil&#8221;-profiled+graft.">Laser-assisted penetrating keratoplasty: one year&#8217;s results in patients, using a laser-welded &#8220;anvil&#8221;-profiled graft.</a> Am J Ophthalmol. 158 (4), 664-670 (2014).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

O transplante endotelial &quot;todo o laser&quot; é uma abordagem original para o transplante de córnea minimamente invasiva. Todos os procedimentos descritos no âmbito do protocolo foram realizados na sala de cirurgia, observando-se o procedimento de higiene e esterilização que são práticas comuns durante cirurgias, tais como o uso de luvas esterilizadas, vestido, máscara e boné. A solução ICG foi preparado na sala de cirurgia, logo antes de sua aplicação na coloração do endo...

Neste trabalho apresentamos uma abordagem original à ceratoplastia endotelial, baseado no uso de um laser femtosegundo para preparar tecido do doador e um laser de diodo infravermelho próximo para soldá-lo para a cama destinatário. Medição intra-operatório da córnea doadora é necessário para projetar corretamente as dimensões do tecido doador. Ceratoplastia endotelial tem sido propostos nos últimos anos para substituir ceratoplastia penetrante no tratamento de doença endotelial 1,2. A principal vantagem desta técnica é uma recuperação visual mais rápida, com relação a ceratoplastia penetrante, anestesia reduzida durante a cirurgia, uma diminuição do risco de rejeição do enxerto e a preservação da integridade do olho. O principal fator de risco é pós-operatória luxação doador lenticule. A técnica padrão é realizado através da inserção do endotélio doador na sua posição final, em que é mantida através da injecção de uma bolha de ar: sem suturas são utilizadas por causa da chara mecânica, biofísico e dimensionalcteristics do endotélio. Além disso, a recuperação da acuidade visual pode ser limitada, principalmente devido a uma incompatibilidade entre os tecidos do doador e do receptor, devido a um tecido grosso transplantado. Aqui nós apresentamos um procedimento na execução de ceratoplastia endotelial que pode superar esses problemas principais. O endotélio dador pode ser assegurada na sua posição final pela utilização da técnica de soldadura a laser. Este é um processo fototérmico controlada e localizada: ele pode ser induzida na interface dador / receptor. Tem sido estudada nos últimos dez anos e proposto em ceratoplastia penetrante e no transplante de endotélio 3-5. A luz de infravermelho próximo (comprimentos de onda: 810 nm) emitida por um diodo de laser de baixa potência é fornecida para o tecido biológico no local da ferida. A córnea é naturalmente transparente para este comprimento de onda: a fim de fazer este tecido para absorver a luz de laser, é necessário pintar com um cromóforo. O corante proposto é uma saturar estérilsolução de água d de indocianina verde (ICG). Demonstrou-se que quando o tecido da córnea é adequadamente coradas com esta preparação ICG, que mostra um pico de absorção a 810 nm 6. Além disso, o ICG é amplamente utilizado no diagnóstico clínico e a sua segurança foi já demonstrada em seres humanos. A córnea absorve a luz coradas energia laser de diodo e o principal efeito resultante é a subida de temperatura controlada no local de soldadura. Sem efeitos térmicos são induzidas nos tecidos não coradas. O aumento da temperatura provoca desnaturação térmica reversível no colagénio do estroma, com uma closuring imediata das paredes da ferida após arrefecimento. Este efeito de soldagem a laser foi primeiramente demonstrada em cirurgia de catarata e ceratoplastia penetrante 7,8 9,10. Uma abordagem otimizada que estamos apresentando neste trabalho foi estudado para aplicação em ceratoplastia endotelial. Na cirurgia proposta, pontos de laser de solteiro (com duração de dezenas de milissegundos) arE fornecida ao tecido, resultando num efeito fototérmico localizada dentro da dimensão local (algumas centenas de m de diâmetro): o efeito é induzida uma soldadura a laser de disco, composto por um fotocoagulação do colagénio confinado na interface doador / hospedeiro. O resultado da desnaturação do colagénio no local da soldadura é uma forte aderência entre os tecidos doadores e hospedeiros, proporcionando assim um efeito de sutura que é impossível de obter com a técnica padrão (pontos). O tecido recupera sua aparência natural em um curto seguimento (1 mês) e a aderência entre tecidos doador / hospedeiro é melhorada pela solda fornecido na fase muito precoce da fase de cura. Para evitar o outro risco principal do ceratoplastia endotelial, ou seja, o transplante de um tecido dador de espessura, intracirúrgico tomografia de coerência óptica (OCT) é utilizado: um dispositivo comercial mede a espessura da córnea do doador, de modo que um perfil de corte correcto pode ser concebido com aa laser femtosec. O transplante endotelial proposta de &quot;tudo a laser&quot; parece, assim, para melhorar os resultados clínicos desta cirurgia minimamente invasiva.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Indocyanine Green</td>
			<td>Pulsion Medical Systems, Germany</td>
			<td>ICG-PULSION (http://www.pulsion.com/international-english/perfusion/icg-pulsion/)</td>
			<td>Alternative product: IC-GREEN, Akorn&#160; Inc., Lake Forest, Illinois- US (http://www.icginjection.com/)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Femtosecond Laser&#160;</td>
			<td>Abbott Medical Optics,&#160; Abbott Laboratories Inc. Abbott Park, Illinois, USA</td>
			<td>iFS150 (http://www.abbottmedicaloptics.com/products/refractive/ilasik/ifs-advanced-femtosecond-laser)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical Coherence Tomography (OCT)</td>
			<td>Carl-Zeiss Meditec, Dublin, California- US (http://www.zeiss.com/meditec/en_de/home.html)</td>
			<td>Visante</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diode Laser</td>
			<td>E.l.En. Group s.pa., Calenzano-FI, Italy (http://www.elengroup.com/en/divisions/medical)</td>
			<td>Mod. WELD 800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Artificial Anterior Chamber</td>
			<td>CORONET, corneal graft products. Network Medical Products Ltd. Coronet House, Kearsley Road, Ripon, North Yorkshire, HG4 2SG, UK</td>
			<td>&#160;Artificial Anterior Chamber (A.A.C.) with large and small tissue-retaining heads. Code 51-935 (http://www.networkmedical.co.uk/ophthalmic_artificial_anterior_chamber.html)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solution for tissue preservation and nutrition&#160;&#160;</td>
			<td>&#160;AL.CHI.MI.A. Srl, Viale Austria 14, 35020 - Ponte S. Nicol&#242; - PD 
			&#160;ITALY</td>
			<td>Carry-C media for corneal deturgescence and transport at room temperature - 12 x 50 ml (http://www.alchimiasrl.com/en/organ-culture-at-31&#176;-c-eb/carry-c-eb)</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an &#8220;all-laser&#8221; endothelial transplant

The &#8220;all laser&#8221; assisted endothelial keratoplasty is a procedure that is performed with a femtosecond laser used to cut the donor tissue at an intended depth, and a near infrared diode laser to weld the corneal tissue. The proposed technique enables to reach the three main goals in endothelial keratoplasty: a precise control in the thickness of the donor tissue; its easy insertion in the recipient bed and a reduced risk of donor lenticule dislocation. The donor cornea thickness is measured in the surgery room with optical coherence tomography (OCT), in order to correctly design the donor tissue dimensions. A femtosecond laser is used to cut the donor cornea. The recipient eye is prepared by manual stripping of the descemetic membrane. The donor endothelium is inserted into a Busin-injector, the peripheral inner side is stained with a proper chromophore (a water solution of Indocyanine Green) and then it is pulled in the anterior chamber. The transplanted tissue is placed in the final and correct location and then diode laser welding is induced from outside the eyeball. The procedure has been performed on more than 15 patients evidencing an improvement in surgery performances, with a good recovery of visual acuity and a reduced donor lenticule dislocation event.

O procedimento cirúrgico &quot;todo o laser&quot; é proposta para realizar transplantes de córnea minimamente invasiva. O procedimento é fácil de realizar (ver Figura 1): no que diz respeito a um transplante endotelial padrão somente as etapas de medir a espessura da córnea, coloração do tecido do doador e fornecer a luz de laser são adicionados. As vantagens conseguidas pela maior parte compensar um aumento do tempo de cirurgia de alguns minutos. A utilização intra-operatória de OCT para m...

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An &amp;#8220;All-laser&amp;#8221; Endothelial Transplant

An all laser procedure is proposed in the endothelial transplant. The surgical technique is based on the use of a femtosecond laser to prepare the donor tissue. Laser welding technique is then used to secure the donor endothelium in the correct position.

Um &quot;All-a laser&quot; Endotelial Transplant

The &#8220;all laser&#8221; assisted endothelial keratoplasty is a procedure that is performed with a femtosecond laser used to cut the donor tissue at an ...

Research

JoVE Journal

Medicine

An &#8220;All-laser&#8221; Endothelial Transplant

9.3K visualizações.  Italian National Research Council. An all laser procedure is proposed in the endothelial transplant. The surgical technique is based on the use of a femtosecond laser to prepare the donor tissue. Laser welding technique is then used to secure the donor endothelium in the correct position.