小鼠饮酒模型在酒精中毒药物治疗发展中的应用: 黑暗中的饮酒和两瓶选择

这一范式的总体目标是使用酒精使用障碍的啮齿动物模型评估潜在的抗酒精药物的有效性。酒精使用障碍是一个重大的公共卫生危机。目前的治疗是无效的，需要持续的临床前研究。

我们的协议使我们能够评估潜在治疗的安全性和效用，并了解疾病本身的基本神经生物学。在 Bunsen 燃烧器上加热实用刀开始该步骤。使用这把刀，切掉大约一英寸的塑料18毫升血清移液器的顶部和底部。

接下来在热枪下加热移液器。将滚珠轴承吸管插入移液器的底端。然后使用市售的收缩包装枪，用收缩包装将吸管密封到位。

用硅胶塞盖住另一个开口。对于动物习惯，在抵达时，每只老鼠在标准聚碳酸酯聚糖酮笼内，配有床上用品、食物和水和金属网笼顶。从一周单间住房适应的第四天开始，测量和记录小鼠的日常身体和食物重量。

使用倒置瓶旁边的蚀刻测量进水量，记录半月板的最高点。一旦水摄入量稳定到过去三天均值的正负 10%变化，开始使用 TBC 或 DID 获得乙醇。要进行TBS，在1000毫升中准备10%乙醇溶液，在894.7毫升水中加入105.3毫升的190证明谷物乙醇，然后彻底摇动。

鉴于乙醇迅速蒸发，每周更换两次溶液。在TBC的第一天，在每个笼子里，清空两个水瓶中的一个，用新鲜准备的乙醇溶液填充到边缘。鉴于乙醇和水很难在视觉上区分，请清楚地标记瓶子及其相应的内容。

根据需要向水瓶添加更多溶液。然后将瓶子放回笼子中，确保盖子牢固关闭，没有任何气泡或喷口泄漏。只需轻拍瓶子即可清除任何气泡，使空气能够逃离瓶子。

每隔一天交替瓶子的位置，以纠正在饮酒活动中与条件位置偏好相关的影响。记录乙醇摄入量水平，分析10%乙醇摄入量和偏好比。一旦乙醇摄入量变得稳定，在日常测量过程中对每只小鼠进行单一控制内内注射，以习惯小鼠注射。

一旦一个低变异性的乙醇基线重新建立，用乙醇摄入量值将小鼠分成对照组和实验组，以便所有组都有大致相似的平均乙醇摄入量值。开始每天的药物药位，无论是急性或多天持续时间。要进行 DID，在预定的乙醇获取的每一天，记录水量、食物摄入量和体重的测量结果，并进行药物给药。

在根据药物的药代动力学选择的光周期中，在预选期间执行此操作，使化合物在饮酒期间接近大脑的最大浓度。接下来，在1000毫升中，将210.5毫升的190证明谷物乙醇加入789.5毫升的水中，准备20%乙醇溶液。然后彻底摇动它。

在饮用期开始前填充乙醇瓶，以便一旦 DID 开始，可以简单地将水瓶替换为酒精瓶。在整个 DID 会话期间，使用红灯前照灯不打扰动物。在 DID 饮用会议开始时，记录每只小鼠的积量，该会议计划从光循环前三小时进入黑暗循环。

然后用一瓶20%乙醇溶液更换每个水瓶，并记录起始乙醇体积。两小时后，在第一天到第三天到四小时后，在第四天饮酒会议结束时阅读并记录最后的乙醇量。然后分析20%乙醇摄入量。

随后，用水瓶代替乙醇瓶并记录水量。这一数字显示了对急性剂量莫西德金在每公斤5毫克对乙醇摄入量和偏好的影响的评估。单剂量的莫西德汀显著减少酒精摄入量超过45%以上相比，与莫西汀注射和偏好超过30%10%乙醇摄入量和偏好都保持明显低于盐水后，立即在MOX治疗的一天。

在这里， 狂欢饮酒是使用 DID 程序建模的。老鼠在一天到第四天被施用盐水，基线20%乙醇在第四天建立。在第二个每周周期的第一天到第三天，所有小鼠每天接受另一次盐水注射。

然后，第三天的乙醇摄入量值被分成两组，随后以每公斤5毫克的速度注射一剂莫西德金，或在第四天接受盐水注射。下一周，所有小鼠在一天到第四天每天接受盐水注射，第四天再次测量乙醇摄入量。对MOX的急性给药进行了分析，发现与药物注射相比，酒精摄入量显著减少54%以上。

请记住，今后必须使用本协议进行实验，以评估潜在药物的机制、剂量和毒性，并评估其与当前治疗方案相关的有效性。