利用外束辐射对小型动物模型的多能干细胞衍生畸胎瘤进行靶向选择性治疗

该程序的总体目标是选择性地针对小鼠的干细胞衍生畸胎瘤，以评估小动物外束放射治疗的体内有效性。外部放射束疗法的主要优点是，它是干细胞相关特拉姆托马的靶向疗法，避免了系统提供疗法的离目标的不利影响。外束放射治疗的进步使得小畸胎瘤能够特定靶向，同时避免对正常组织的损伤，使这种疗法成为治疗辐射敏感畸胎瘤的的理想之选。

该方法不仅能够深入了解细胞疗法的优化策略，而且具有在临床上适用于人类疗法的潜力。首先采取一个六井板包含 iPSC。为了诱导免疫缺陷动物形成四核糖核糖，在室温下用双融合报告基因转导的6孔板中每井加入1毫升重组细胞分离酶混合物，在室温下孵育5分钟。

在孵育结束时，通过移液分散细胞，通过向每一井添加同等体积的细胞培养培养所来停止酶反应。将单细胞悬浮液拉在 15 毫升锥形管中进行计数。离心完成后，吸上经，将颗粒重新在30微升的Matrigel基质溶液中，将管子放在冰上。

如果使用双聚变报告转染细胞，这些双阳性影响细胞也应该悬浮在30微升的基质中。接下来，将每个细胞群体装入装有28.5针的1毫升注射器中，并确认每个麻醉的8至10周大的麻醉性裸体接受者小鼠对头趾捏缺乏反应。然后，皮下将一个细胞基质混合物注入每个受接受动物的侧翼。

在接种后的适当实验时间点，将每公斤二维他孕酮注射375毫克。10分钟后，根据标准生物发光成像方案，每个麻醉记者探针中的生物发光信号每隔5分钟使用1分钟采集窗口注射动物30分钟。对于畸胎激光照射，在适当的实验时间点，首先将麻醉接受动物放在图像引导的临床前照射器的床上，并使用 40 峰值千伏、2 毫安 X 射线束获取一组 400 个超过 360 度的投影微计算断层扫描图像，然后将图像重建为 0.2 毫米等向像素大小的体积图像。

重建畸胎的体积图像至关重要。这些图像将有助于规划放射治疗，为特定治疗只向畸胎瘤，同时尽量减少周围组织的任何非目标辐射。然后使用微CT图像和RT图像软件包来规划放射治疗方案。

连续三天进行治疗，共为目标肿瘤提供18个灰色。注射小鼠通常表现出畸胎瘤生长形成四至四周后肿瘤细胞注射，通过生物发光成像证实。当在细胞分娩一个月后用累积的18个灰色照射时，肿瘤将急剧缩小，导致荧光酶信号显著重合减少。

重要的是，正如这些图像所说明的，从辐照地点采集的5毫升正常组织活检似乎没有受到任何重大损害。看完这段视频后，您应该清楚地了解如何在体内产生干细胞衍生的畸胎瘤，并有效安全地用外部光束辐射来治疗它们。这种简单的方法需要获得一个主体的高分辨率CT图像，之后可以规定一系列辐射束疗法来照射目标肿瘤，同时避免相邻组织。

不要忘记，使用辐射可能极其危险，执行此过程时应始终采取预防措施，例如使用适当的防护罩。