这种技术的共同优点是,视觉记忆可以以固定而不是自由移动的木蚂蚁以受控的方式研究。该方法具有在昆虫导航的成熟模型中研究视觉学习的神经基础的潜力。要选择有动机食用的蚂蚁,请将一滴蔗糖放在一个小盒子里,里面覆盖着烟。
然后将每个选定的蚂蚁放在盒子里,并等待,看看是否饲料的蔗糖滴。如果蚂蚁以蔗糖滴为食,请立即将其转移到一个空盒子里。在此之后,将每个蚂蚁转移到一个单独的管子中,并短暂地将管子放在冰柜中,使蚂蚁固定。
将固定蚂蚁通过纸板的切口放在支架中,由其头部和胸部之间的关节抓住它。然后使用昆虫针,以确保天线保持在头部的一侧。使用定制的加热元件,熔蜡将昆虫针尖粘在蚂蚁的头上,与纸板平行。
蜡干后,从天线中取出昆虫针脚,并小心地将蚂蚁从支架上取下。接下来,将昆虫针固定在造型粘土缸中,并在其下方固定一个定制的塑料支架。确保蚂蚁保持典型的站立姿势,并且除了头部之外,全身可以自由移动。
首先,将带微距镜头的相机放在蚂蚁支架正上方的白色丙烯酸盒上,然后将蚂蚁放在盒子内的支架中。然后,将针头和充满蔗糖的注射器,无条件的刺激,连接到一个明亮的蓝色纸板矩形,条件刺激,用作视觉提示。对于配对训练,在呈现条件刺激之前 10 秒开始记录蚂蚁。
如果蚂蚁在此期间执行 Maxilla Labium 扩展反射或 MaLER,请将试验推迟几秒钟。在蚂蚁前面用有条件的刺激将注射器移动10秒钟。然后,从注射器中散发出一滴蔗糖,喂蚂蚁五秒钟。
重复配对训练程序 10 次,每次试验之间重复 5 分钟。对于未配对的培训,请于试用前 10 秒开始录制视频。然后,如前面所述,提出条件刺激。
2.5分钟后,用没有蓝色纸板的注射器将无条件的蔗糖刺激直接送到蚂蚁的口腔部。训练试验完成后,在测试阶段前 10 秒开始摄像机录制。然后,向蚂蚁呈现10秒的有条件刺激。
测试结束之后,将蔗糖无条件刺激给蚂蚁,以确认蚂蚁仍有喂食的动机。使用在训练和测试期间录制的记录,在条件刺激演示的 10 秒内对蚂蚁的响应进行评分。最后,在条件刺激演示期间将蚂蚁的响应分为三类,完全扩展与运动,就像喂养,完全延长没有运动,或部分扩展的 maxilla 实验室或最大唇。
在该协议中,接受配对训练的蚂蚁在条件刺激下的表现越来越大。相反,在训练中,未配对的蚂蚁没有显著增加。为了检查它们的短期和中期记忆,蚂蚁在上次训练试验后10分钟或1小时接受了测试。
在这两项测试中,蚂蚁在接受过配对训练时,对条件刺激进行MaLER反应的比例更高。马勒响应分为三类:FEM、FE 和 PE。通常,蚂蚁执行 FEM 或 PE 比 FE 更频繁。然而,只有少数蚂蚁始终表现出相同类型的反应。在尝试此过程时,必须记住小心处理蚂蚁,以减少压力水平和任何潜在的损害,尤其是在使用过程中。
通过调整这个程序,可以使用不同的视觉刺激来研究木蚂蚁用来形成视觉记忆的属性。这项技术开发后,为昆虫神经科学和导航领域的研究人员探索视觉关联记忆与木蚂蚁进行微法研究铺平了道路。