この技術の共通の利点は、視覚的記憶が自由に動く木材アリではなく固定された方法で制御された方法で研究できることである。この方法は、昆虫のナビゲーションのための非常に確立されたモデルで視覚学習の神経基盤を調査するために使用される可能性を有する。食べる動機付けのアリを選択するには、壁を覆うフルオンを持つ小さな箱の中にスクロースのドロップでスライドを置きます。
次に、選択した各アリをボックスに入れ、それがスクロースのドロップに餌を与えるかどうかを確認するのを待ちます。サクロースの落としのアリの餌がすぐに空の箱に移す場合。この後、各アリを別々のチューブに移し、チューブを冷凍庫に短時間入れてアリを固定します。
固定化したアリをホルダーに入れ、段ボールの切り傷を通し、頭と胸部の関節でつかみます。その後、昆虫ピンを使用して、アンテナがヘッドの側面に残っていることを確認します。カスタムメイドの発熱体を使用して、溶融ワックスを使用して昆虫ピンの先端をアリの頭に付着させ、段ボールに平行に接着します。
ワックスが乾いた後、昆虫ピンをアンテナから取り出し、ホルダーからアリを慎重に取り除きます。次に、モデリング粘土シリンダーでアリを保持する昆虫ピンを固定し、その下にカスタムメイドのプラスチックホルダーを固定します。アリが典型的な立ち姿勢を維持し、頭部を除く全身が自由に動くことができることを確認してください。
まず、マクロレンズを持つカメラを、アリホルダーの真上の白いアクリルボックスの上に置き、ボックス内のホルダーにアリを置きます。次に、針とスクロース入り注射器、無条件刺激を、明るい青色の段ボール長方形、条件付き刺激に、視覚的な手がかりとして使用するために取り付ける。ペアトレーニングの場合は、条件付き刺激を提示する前に、アリの記録を開始します 10 秒。
アリがこの間にマキシラLabiumエクステンション反射(MaLER)を実行する場合は、試験を数秒間延期します。アリの前で条件付き刺激を受けてシリンジを10秒間動かします。その後、注射器からスクロースを1滴吐き出し、アリに5秒間餌を与えます。
各試験の間に5分間、ペアのトレーニング手順を10回繰り返します。ペアリングされていないトレーニングの場合は、トライアルの 10 秒前にビデオ録画を開始します。次に、前述のように条件付き刺激を提示する。
2.5分後、無条件のショ糖刺激を青い段ボールなしで注射器でアリの口に直接届けます。トレーニングトライアルが完了したら、テストフェーズの10秒前にカメラの録画を開始します。次に、10秒間、アリに条件付き刺激を提示する。
試験が終わった後、アリがまだ餌を与える動機付けであることを確認するために、サンにスクロース無条件刺激を届ける。トレーニングとテスト中に行われた記録を使用して、条件付き刺激のプレゼンテーションの10秒間にアリの応答をスコアリングします。最後に、条件付き刺激プレゼンテーション中のアリの応答を3つのカテゴリに分け、摂食するかのように動きを伴う完全な拡張、動きのない完全な延長、または上顎陰唇の部分的な拡張。
このプロトコルでは、ペアトレーニングを受けたアリは、条件付き刺激に応じてますます多くのMaLERを行った。それどころか、ペアではないアリは、訓練中にMaLERの有意な増加を示さなかった。彼らの短期および中期記憶を調べるために、アリは最後の訓練試験の10分または1時間後にテストされた。
両方のテストでは、条件付き刺激に応答してMaLERを実行するアリの割合は、ペアトレーニングを受けたときに高かった。MaLER応答は、FEM、FE、およびPEの3つのカテゴリーに分けられた。通常、アリはFEよりも頻繁にFEMまたはPEを実行した。しかし、一貫して同じタイプの応答を示したのは少数のアリだけです。この手順を試みる間、特にハーネス中にストレスレベルや潜在的な損傷を減らすためにアリを注意深く扱うことが重要です。
この手順を適応させることによって、異なる視覚刺激は、木材アリが視覚的記憶を形成するために使用する特性を調査するために使用することができる。その開発後、この技術は、昆虫神経科学とナビゲーションの分野の研究者がミクロファのための木材アリと視覚的な連想記憶を探求するための道を開きます。
