我们开发了一种使用氟 NMR 对狂热化合物进行嗜白测量的直接方法，这种方法非常可笑，足以重现我们测量的嗜白性差异很小。该方法可用于系统研究有机化合物的形成对解决的脂亲变化的影响，这在一般药用化学中是一种利应。这种方法的优点包括，化合物不必是反应性的，它们也不必是完全纯净的。
无需测量精确质量或体积，也无需建立校准曲线。应选择适当的参考化合物，并在取样阶段避免等分物的交叉污染。在这段视频中，我们将展示适当的实际技能，用于采样、NMR 管密封和正确使用 NMR 软件进行数据处理。
将 6.0 毫克化合物 X 和 3.0 毫克的参考化合物添加到 10 毫升梨形烧瓶中。将化合物溶解在大约两毫升的HPLC级n-Octanol中，并加入两毫升的HPLC级水。将烧瓶放在搅拌盘上方的温度控制容器内，然后连接到再循环的冷水机组。
在 25 摄氏度下搅拌双相混合物两小时，搅拌速度设置为 600 RPM。在25摄氏度下一夜之间平衡混合物，允许完全相分离。用夹子将烧瓶固定到反驳支架上。
使用带长针的一毫升一次性塑料注射器，从水和n-Octanol层中分得约0.70至0.85毫升的等分。对于水等分，在将针头放入混合物中之前，将大约 0.02 毫升的空气放入注射器中。将针头通过上 n-Octanol 层移动到水层时，轻轻推出空气以防止 n-Octanol 溶液进入针头。
从混合物中取下长针。丢弃少量水样，将注射器中留下约 0.6 毫升的样品。小心地用干纸巾擦拭针头，将大约 0.5 毫升的水样注入干净的 NMR 管中。
用盖子快速关闭 NMR 管。对于 n-Octanol 样品，从 n-Octanol 层中去除长针。丢弃少量 n-Octanol 样品，在注射器中留下大约 0.6 毫升的样品。
在用干组织仔细擦拭针头后，将大约 0.5 毫升的 n-Octanol 样品注射到干净的 NMR 管中。用盖子快速关闭 NMR 管。目视检查 n-Octanol 和水样是否有来自其他阶段的污染。
在每个 NMR 管上，加入 0.1 毫升的脱发 NMR 溶剂，该溶剂与 n-Octanol 和水一起可误读，以在 NMR 采集期间实现信号锁定。对于沸点低的化合物，使用吹风器密封 NMR 管，并在冷却后反转管以检查是否有任何泄漏。小心地反转密封或非密封的 NMR 管 20 次，以获得用于 F19 NMR 实验的均匀溶液。
运行质子分离氟 NMR 实验，以识别化合物 X 和参考化合物在 n-Octanol 和水 NMR 样品中的化学移位。使用文本协议中列出的标准 NMR 参数设置。使用反转恢复序列测量旋转晶格松弛时间（T1）以诊断氟核。
从获得的 T1 值测量适当的脉冲延迟时间水平，实现精确的定量 NMR 集成。运行快速 F19 H1 频谱以设置初始参数。测量 90 度脉冲宽度，然后设置 T1 测量实验的参数，并使用反转恢复序列运行 T1 测量实验。
使用调整的参数设置再次运行质子分离氟 NMR 实验。设置 D1 并居中两个诊断氟信号之间的频率偏移点，以便两个核可以同样兴奋。此外，将光谱宽度设置为 300 PPM，并设置瞬变数为 64。
如果需要更高的信噪比，请调整这些值。使用 ACD NMR 处理器学术版或其他自定义 NMR 处理软件处理获得的数据。打开 NMR 数据文件。
然后，打开 pdata 文件夹，后跟文件夹 1。删除 1r 文件。返回到 NMR 数据文件，然后将 FID 文件拖动到 ACD NMR 处理器窗口中。
单击窗口功能按钮，选择指数，将行扩大值设置为两个，然后单击"确定"按钮。现在，单击零填充按钮，通过单击数字旁边的小按钮，将点计数增加至其原始点计数的四倍，然后单击"确定"按钮。选择四位转换按钮。
接下来，单击相位按钮，然后单击鼠标相位按钮。单击并按住鼠标左键，然后向前或向后移动鼠标，直到频谱的主要峰值被正确分段。现在，单击并按住鼠标右键，向前或向后移动鼠标，直到频谱的其他峰值正确分阶段。
然后，取消单击鼠标相位按钮，并放大与氟峰值的光谱区域。单击微调，根据需要执行相位校正（如前面所述），然后单击刻度按钮。单击基线按钮，然后单击选项按钮。
选择自动模型的频谱平均，根据需要调整箱半宽度的点数。单击"好"，自动单击，然后单击勾选按钮。接下来，单击集成，集成诊断氟峰值，然后单击刻度按钮。
最后，从n-Octanol和水NPR样本中获取集成比，并在对数值计算方程中使用它们，获取化合物X的对数值。 2、2-三氟乙醇作为参考化合物，两种氟乙醇的对数值为0.75，3、3、3、2、2-五氟丙醇的对数值为正1.20。随后，再次确定了两种氟乙醇的嗜脂性，但以3、3、3、2、2-五氟丙丙醇为参考。测量的 logP 值为 0.76，与使用 2-2-2-三氟乙醇作为参考的值相比，只有 0.01 logP 单位的差异。
同样，对于 cis-2、3-二氟-1、4-丁烷-二醇，使用两种氟乙醇及其转异构体测量的对数值的差异非常小。这显示了良好的可重复性，并且参考化合物的选择对 logP 测量没有影响。此处显示了其他选定的示例。
所有这些非UV活性全氟化合物，从含氟碳水化合物，到氟氢素，都可以很容易地用这种方法测量。如果你的化合物不含氟，并且化合物含有紫外色度，则可以使用其他基于核磁共振的方法，然后可以使用紫外线定量进行 logP 测量。测量了多种非UV活性氟氢素和去氧化碳水化合物的嗜白性。
获得的数据库用于建立脂肪氟化对嗜脂性的影响的趋势和规则。八角醇和水对安全危害最小。当然，应始终考虑所测量的危害和参考化合物。
