慢性结肠炎相关结肠直肠癌的肿瘤切除术模型，通过卡卡贴片的精确定位

整体协议描述了易于执行的外科手术，切除了小鼠称为卡卡片的附录。用子宫切除术模型研究附录在人类胃肠道疾病发病机制中的生物学作用。人类附录是一个有争议的器官。

最近的研究表明，附录在维持肠道健康方面起着重要作用。研究附录的生物功能，生成与疾病相关的切除术动物模型至关重要。在该协议中，我们将描述一个简单而安全的手术步骤，去除附录，称为小鼠的卡卡斑块。

为了确保此模型的成功，下面视频将显示三个关键步骤。首先，在手术前找到小鼠的卡库姆。第二，在腹部做一个小切口。

第三，消毒并关闭树桩。第一部分，老鼠切除术。手术前准备无菌手术器械和清洁液。

通过在四肢上放置四条医用胶带，使鼠标在平台上麻醉并固定，以防止手术过程中的姿势移动。轻轻触摸鼠标的整个腹部，找到颠簸的感觉。用两次内碘覆盖窗帘，对小鼠腹部的剃光区域进行尽可能宽的消毒。

在腹部中线进行从0.5厘米到1厘米的纵向切口。根据凯库姆的预定位置，寻找卡埃库姆，并轻轻地外部化它约一厘米长，以确定卡卡补丁。使用预热和无菌的生理盐水来滋润肠道。

为了防止术后出血和感染的潜在并发症，使用 8-0 将卡库姆的肠内血管进行放菌缝合。用盐水水合水。使用 4-0 缝合线标记切除区域，在近位结肠的 caecum 顶点附近使用开环。

使用微剪刀切断标记切除器下方的卡卡片，并使用医用棉签擦拭残留的切卡内容。用内托碘消毒卡库姆的树桩。使用 8-0 用运行缝合关闭树桩缝合。

小心地移除 4-0 螺纹循环，以前用于标记 caecum 树桩上的切除。使用内多碘对缝合位置进行消毒。用盐水重新补充切割区域。

使用 8-0 使用运行缝合关闭肌肉层缝合线。使用 4-0 缝合线使用中断的缝合线关闭皮肤层。用内碘消毒手术切口两次。

然后，使用75%的医用酒精去除碘。轻轻地将鼠标翻转回来。皮下注射每公斤体重0.1毫克的丁丙诺啡和0.4毫升的生理盐水。

把鼠标放在热垫上，直到它回到意识中。将鼠标放回无菌笼中，并在手术后三天内密切监测小鼠的疼痛迹象，以确保其恢复。第二部分：结肠炎相关结肠直肠癌与Azoxymethane、AOM和德xtran硫酸钠，DSS，切除术后7天的诱导。

用0.9%的正常盐水解冻一个奥姆的一等分，并稀释到每毫升1毫克。整个制备过程在烟罩中进行。在 200 毫升可溶性水溶液中溶解 4 克 DSS 粉末，以准备 2%DSS。

每个笼子包含五只老鼠。根据每只小鼠的重量，每克0.01毫升进行丙酮注射。用 2%DSS 更换自 <3>自清洁水五天。

老鼠将用自动处理的水喂养额外的两个周期。第三部分：结果。流和 ELISA 结果表明成功移除了卡卡尔贴片。

与3%DSS相比，该手术可显著减少IgA特异性血浆细胞，大肠中分泌的IgA明显变化，由于严重的血性大便、阿努斯脱垂和腹部腹腔，其死亡率较高，体重有显著变化。2%DSS适用于全过程，其高存活率接近80%，在假和切除术组均有合理的体重变化。如这些图像所示，我们已经成功地诱导了结肠炎相关的结直肠癌。

在 H&E 染色图像中，黑色箭头表示粘膜溃疡，箭头表示腺癌，白色箭头表示腺体之间的中性粒细胞渗透。腺癌的不同阶段可以在假和切除术组看到。这种具有成本效益的 Murine 切除术模型可用于回答一些重要问题，例如：附录在肠道细菌调节中的作用，以及附录如何参与肠道相关淋巴组织的免疫反应。

请记住，为了避免肠道粘附的损伤，切库姆和小皮肤切口的预位位置很重要。此外，我们使用2%DSS诱导结肠炎。但是，DSS浓度较高的可能用于其他小鼠菌株。