전반적인 프로토콜은 마우스에서 개칼 패치로 알려진 부록을 제거하는 수술 적 절차를 쉽게 수행 설명합니다. 뮤린 부수 절제술 모델은 인간 위장 질환의 병인에서 부록의 생물학적 역할을 연구하는 데 사용할 수 있습니다. 인간 부록은 논쟁의 여지가있는 기관입니다.
최근 연구는 부록창 건강을 유지하는 데 중요한 역할을한다는 것을 건의했습니다. 부록의 생물학적 기능을 연구하기 위해 질병 관련 충수 동물 모델을 생성하는 것이 중요합니다. 이 프로토콜에서, 우리는 부록을 제거하는 간단하고 안전한 수술 단계를 설명 합니다., 마우스에 있는 caecal 패치로 알려진.
이 모델의 성공을 보장하기 위해 다음 비디오에서 볼 수 있듯이 세 가지 주요 단계가 있습니다. 먼저 수술 전에 마우스의 케이쿰을 찾아보냅니다. 둘째, 복부에 작은 절개를합니다.
셋째, 소독하고 케이쿰 그루터기를 닫습니다. 첫 번째 부분, 마우스 충수. 수술 전에 멸균 수술 기구 및 청소 솔루션을 준비하십시오.
수술 중 자세 이동을 방지하기 위해 사지에 의료 용 접착 테이프의 네 스트립을 배치하여 supine 위치에 플랫폼에 마우스를 마취하고 고정합니다. 마우스의 복부 전체를 부드럽게 만져 범프감을 찾습니다. 드레이프를 덮고 두 번의 entoiodine을 사용하여 마우스 복부의 면도 부위를 가능한 한 넓게 소독하십시오.
복부의 중간선에서 0.5 센티미터에서 1 센티미터에 이르는 세로 절개를 합니다. caecum의 소정의 위치에 따르면, caecum을 찾아 서 약 1 센티미터 길이에 대 한 부드럽게 외부화 케이칼 패치를 식별 합니다. 미리 데워진 멸균 생리식염수에 사용하여 내장에 수분을 공급합니다.
수술 후 출혈과 감염의 잠재적인 합병증을 방지하기 위해 8-0을 사용하여 caecum의 막진 혈관을 리게이트하십시오. 봉합 사. 식염수로 케이컴을 수분처리합니다. 근위 결장의 케이쿰 정점 근처의 열린 루프로 4-0 봉합사를 사용하여 절제술 영역을 표시합니다.
마이크로 가위를 사용하여 표시된 절제술 아래의 위장 패치를 잘라 내고 의료 용 면 봉면으로 잔류 위장 함량을 닦아냅니다. 엔토오딘으로 케이쿰의 그루터기를 소독하십시오. 8-0을 사용하여 실행 봉합사와 그루터기를 닫습니다 봉합 사.
이전에 는 caecum의 그루터기에서 절제술을 표시하는 데 사용 되 었던 4-0 스레드 루프를 주의 깊게 제거합니다. 엔토이오딘을 사용하여 봉제된 자세를 살균합니다. 식염수로 절단 부위를 다시 수분처리합니다.
8-0을 사용하여 실행 봉합사로 근육 층을 닫습니다 봉합사 스레드. 4-0 봉합사 실로 중단된 봉합사를 사용하여 피부 층을 닫습니다. 엔토오딘으로 수술 컷을 두 번 소독하십시오.
그런 다음 75 %의 의료 알코올을 사용하여 요오드를 제거하십시오. 마우스를 부드럽게 뒤집습니다. 피하 부프레노르핀의 킬로그램 체중당 0.1 밀리그램, 생리식염수 0.4 밀리리터를 피하한다.
그리고 열 패드에 마우스를 휴식, 그것은 의식에 반환 될 때까지. 마우스를 멸균 케이지에 다시 넣고 마우스를 면밀히 모니터링하여 3일 동안 통증의 징후를 면밀히 모니터링하여 수술을 통해 회복을 보장합니다. 두 번째 부분: 아조옥시메탄, AOM, Dextran 나트륨 황산염, DSS, 7 일 후 충수 절제술을 가진 대장염 관련 대장암의 유도.
AOM의 알리쿼트 1개를 해동하여 0.9%의 일반 식염수를 사용하여 밀리리터당 1밀리그램으로 희석합니다. 전체 준비 과정은 연기 후드에서 수행됩니다. 200 밀리리터 오토클레이브 물 용액에 4그램DS 분말을 녹여 2%DSS를 준비합니다.
각 케이지에는 5마리의 마우스가 포함되어 있습니다. 무게에 마우스 당 그램 당 0.01 밀리리터와 AOM의 내 분간 주사를 확인합니다. 5일 동안 자동식물을 2%DSS로 교체합니다.
마우스는 추가 2주기동안 오토클레이브 워터로 공급될 것이다. 세 번째 부분:결과. 흐름 및 ELISA 결과는 케이칼 패치의 성공적인 제거를 나타낸다.
이 절차는 IgA 특정 혈장 세포의 상당한 감소에 기여할 수 있습니다., 큰 창 자에 분 비 이 IgA의 명백한 변화, 3%DSS에 비해, 높은 사망률 및 심각한 피 묻은 대변, 항 문 탈출, 그리고 복 부 애초 때문에 상당한 체중 변화. 2%DSS는 높은 생존율에서 80%에 가까운 공정과 샴및 충수군 모두에서 합당한 체중 변화에 적합합니다. 이 심상에 도시된 바와 같이, 우리는 대장염 관련 대장 종양을 성공적으로 유도했습니다.
H&E 염색 이미지에서 검은 색 화살표는 점막 궤양을 나타내고, 화살촉은 선암을 나타내며, 흰색 화살표는 땀샘 사이의 호중구 침투를 나타냅니다. 아데노암의 다른 단계는 샴과 충수 성 그룹 모두에서 볼 수 있습니다. 이 비용 효율적인 Murine Appendectomy 모델 같은 몇 가지 중요 한 질문에 대답에 사용할 수 있습니다:창 자 박테리아의 규칙에 부록의 역할 및 창 자 관련 림프 조직에서 면역 반응에 참여 하는 방법.
장 접착의 손상을 피하기 위해, 케이쿰과 작은 피부 절개의 사전 위치가 중요하다는 것을 기억하십시오. 또한, 대장염을 유도하기 위해 2%DSS를 사용했습니다. 그러나 DSS의 높은 농도는 그밖 마우스 긴장에 사용될 수 있습니다.
