该协议是基于运动动力学评估的开放胸部手术,对小鼠等小动物的右心室和肺动脉压力评估非常有用。此过程的优点是它可以同时生成 VP 和 PAP 参数。因此,对于PAH模型的评价更可取。
首先设置手术设备。在血流动力学实验前,在室温下将压力传感器导管浸泡在0.9%盐水中至少30分钟。然后,将导管连接到压力体积系统。
通过将校准旋钮转动至零和 25 毫米汞来校准压力传感器,向数据采集软件发送验证压力信号,然后配置校准设置。将旋钮转向传感器,将平衡阀调整为零基线。设置标准立体显微镜、温度控制小动物手术台和显微外科照明系统。
一旦鼠标正确麻醉,使用剃须刀和脱毛机去除胸部和颈部化妆水。将鼠标固定在温度控制手术台上的超点位置。在确保麻醉有效后,在颈部皮肤上进行中线切口。
使用弯曲钳子解剖骨骼肌,露出气管。用 22 量表静脉护套导管通过口腔进行插管,确认导管在气管中,有钳子。将油管连接到小型动物呼吸机,并使用胶带将其固定以进行通风。
然后,在胸肌上做一个中线切口,并使用烧灼工具仔细解剖胸肌。用剪刀将胸骨切过中间,露出胸腔。确保使用烧灼工具防止出血。
用缩回器暴露右心室,然后插入盐水浸泡压力传感器导管,通过用 25 表针创建的小隧道插入右心室,以测量右心室压力或 RVP。握住导管电缆,用肺动脉以同轴方式穿过肺瓣膜。观察压力波形,获得稳定的肺动脉压力或PAP信号。
接下来,使用数据采集软件记录血流数据。小心地从右心脏系统取出导管,并将其放入含有 1%消化酶溶液的一毫升注射器中。该协议成功地用于通过插入压力传感器导管到右心室和肺动脉,在小鼠中获得RVP和PAP波形。
为了避免生成人工数据,将噪声段排除在数据分析之外,如果导管的零水平漂移,则进行修正。RVP和PAP在诱发慢性缺氧的小鼠中测量,结果与从对照组获得的结果进行比较。收缩性PAP,舒张PAP,平均PAP,右心室收缩压都显著增加在慢性缺氧组。
要记住的最重要的事情是小心地将压力传感器导管插入右心室,确保避免损坏导管,并确认屏幕上出现平滑的 RVP 波形。