Этот протокол является открытой хирургии грудной клетки на основе гемодинамической оценки, и это полезно для правильной желудочковой и легочной артерии оценки давления у мелких животных, таких как мыши. Преимущество этой процедуры заключается в том, что она может генерировать параметры VP и PAP одновременно. Поэтому предпочтительнее для оценки моделей ПАУ.
Начните с настройки оборудования для хирургии. Замочите давление трансдуцерного катетера в 0,9% солевого раствора при комнатной температуре, по крайней мере за 30 минут до гемодинамического эксперимента. Затем подключите катетер к системе громкости давления.
Калибруйте превещает давление, поворачивая ручку калибровки до нуля и 25 миллиметров ртути, чтобы послать сигнал давления проверки программному обеспечению для получения данных, а затем настроить настройку калибровки. Поверните ручку к предуцанту и отрегулируйте клапан баланса до нулевого базового уровня. Настройка стандартного стерео микроскопа, температуры контролируемых малых животных хирургический стол, и световая система освещения для микрохирургии.
После того, как мышь правильно анестезии, удалить грудь и шею меха с помощью бритвы и лосьон для удаления волос. Закрепним мышь в положении на спине на контролируемом температурой хирургическом столе. После обеспечения того, чтобы анестезия в силе, сделать разрез средней линии на коже шеи.
Рассекните скелетную мышцу с помощью изогнутых типсов и разоблачите трахею. Выполните инубации через рот с 22 калибровочных внутривенных оболочки катетер, подтверждающий, что трубки находится в трахее с типсами. Подключите трубу к небольшому вентилятору животного и защитите его для вентиляции с помощью ленты.
Затем сделайте разрез средней линии на коже грудной клетки и тщательно вскрыть грудную мышцу с помощью инструмента прижига. Вырезать грудину с помощью ножниц посередине, и подвергать грудной полости. Убедитесь в том, чтобы предотвратить кровотечение с помощью инструмента прижигать.
Разоблачить правый желудочек с втягивателями, а затем вставить солевой пропитанной давлением трансдуктора катетер через небольшой туннель, созданный с 25 калибровочной иглы в правый желудочек для измерения правого желудочка давления, или RVP. Держите катетер кабель и пересечь легочный клапан в коаксиальной манере с легочной артерии. Наблюдайте за волновой формой давления и получите стабильное давление легочной артерии или сигнал PAP.
Затем завестите гемодинамические данные с помощью программного обеспечения для сбора данных. Аккуратно удалите катетер из правильной сердечной системы и поместите его в одноми миллилитрный шприц, содержащий 1%пищеварительный ферментный раствор. Этот протокол был успешно использован для получения RVP и PAP волновых форм у мышей путем вставки катетера превлодока давления в правый желудочек и легочную артерию.
Во избежание генерации искусственных данных сегменты с шумом исключались из анализа данных, и при нулевом уровне катетера были внесены коррективы. RVP и PAP были измерены у мышей с индуцированной хронической гипоксией, и результаты были сравнены с результатами, полученными от контрольной группы. Систолическое PAP, диастолическое PAP, среднее PAP, и правое систолическое давление желудочка были значительно увеличены в хронической группе гипоксии.
Самое главное помнить, чтобы вставить давление трансдуцера катетер в правый желудочек тщательно, убедившись, чтобы избежать повреждения катетера и подтвердить гладкую форму Волны RVP появляется на экране.
