在小鼠中建立下腹部器官和后肢的原点闭路灌注

该协议可用于回答有关药物输送和免疫相互作用在我们的电路中包含的器官的问题。这种技术允许用传统的外体方法使无法灌注的器官，同时避免主要的清除器官。在开始手术之前，设置一个循环水浴和所有水套组件，到37摄氏度。

确认管材已清洗，并使用湿润室内的气泡陷阱作为香水储液罐，以限制香水体积。要执行导管手术，确认踏板反射缺乏反应，在8至10周大的男性麻醉灯泡见鼠标。将鼠标放在发泡胶板上的上点位置，头在六点钟。

用胶带固定动物的四肢，用异丙醇擦拭腹部。在腹部做一个T形切口，使用电凝固来阻止切口边缘周围的出血。将胃、杰朱努姆和结肠推到腹部右侧，露出腹部主动脉、静脉卡瓦和常见的腹腔和腹腔动脉和静脉。

在解剖显微镜下，用4-O丝线缝合定位和缝合卵巢和牙周动脉和静脉。将两个4-O丝线在腹部主动脉下循环，在腹动脉和静脉上方约一厘米，相距1毫米。然后在最接近伊利亚克容器的缝合中松一点头。

使用针架水平对齐和拉伸劣质的维纳卡瓦和腹部主动脉。而且，保持血管伸展，使用24轨的有翼护盾IV导管刺穿腹部主动脉。一旦针头穿透约一毫米的容器，按下按钮以收回针芯，并将导管插入约五毫米的容器中。

以同样的方式将导管插入五毫米的劣质维纳卡瓦。将两个缝合线系在导管血管周围。然后应用即时胶水固定导管到直立人旋转 a， 并更换腹部器官.

要设置灌注系统，请将鼠标放在水套湿室的硅垫上，用 19 个规格的针头将导管翅膀固定到垫上。用预加热的灌注缓冲液填充动脉导管入口。使用止血钳和螺丝式连接器将导管入口连接到导管，并使用胶带固定进气管。

将永体流速调整为每分钟0.6毫升，保持灌注流出开限5至10分钟，通过静脉导管洗血。出口导管中会存在一些血块，用香水缓冲液冲洗出血块，并使用接头上的螺钉将静脉导管的端接到出口导管的端接上以关闭电路。然后用预热盖盖湿室长达两个小时的灌注，定期检查灌注液的水平。

此处显示与含有 Hoechst 33342 和 DyLight-649 lectin 的振铃溶液灌注后共和图像。肌肉、骨髓、睾丸、膀胱、前列腺和足部皮肤通常表现出有效的核和血管染色。血氧林和欧辛染色这些组织后，三个小时的正常热灌注，揭示了成功的冲洗器官，没有明显的组织损伤。

该模型可用于了解药物吸收途径，在生理无关的环境中。例如，了解血清成分在药物积累中的作用。我们使用这个系统，了解皮肤中脂蛋白体积累的机理。