该协议允许研究人员通过将定量行为分析与分子和化学扰动相结合，阐明平面行为和这一行为背后的秒机制。这种技术很容易获得所有技能水平，因为它不需要先进的仪器或专门的软件，以获得定量行为读数的自由移动平面。皱当可用于研究平面体中的异常，并用作检测的敏感终点，破坏由异种生物和疾病引起的神经系统功能。
首先，在平面上放置可调光 LED 面板，该面板将提供均匀的白色背景，并可用作可调光源以获得适当的对比度。在 LED 面板上放置一个 100 毫米的培养皿竞技场。将摄像机安装在竞技场上方的环形支架上，并根据需要调整其位置、高度和对焦，使整个竞技场以视野为中心并处于焦点位置。
在竞技场上填充大约 25 毫升的适当曝光介质，以达到最大音量，打开 LED 面板并关闭可能对录制质量产生负面影响的所有其他光源。使用转移管道将平面在竞技场中心放置。在测试化学溶液时，将平面水与平面水进行尽可能少的转移，使化学的浓度没有显著变化。
开始以本机斐济格式将数据记录为图像序列。对于滑翔实验，记录一到两分钟的滑翔行为，用于擦伤或近视实验，记录足够长的时间，以捕获至少三个连续的直线上发生的振荡。实验完成后，终止录制。
如果平面达到竞技场的边界而不能满足终止标准，则移液器将平面器移回竞技场的中心。打开斐济实验的原始图像序列，将其转换为八位，并使用图像堆栈底部的箭头工具或滑块平移图像序列。要提取时间段和感兴趣的区域，请使用矩形工具绘制包含平面图的完整路径的感兴趣区域。
右键单击图像堆栈并选择重复，选中重复堆栈的框。输入兴趣序列的第一帧和最后一帧，然后单击"确定"。对于滑翔实验，提取滑翔期，其中平面体移动至少两倍的身体长度，以进行皱擦或永久实验。
提取一个实例，当平面体在直线上经历至少三个连续和完整的身体振荡。对重复的图像堆栈应用阈值，将图像二进制化，并从背景中提取平面图，调整滑动条，使整个平面图以红色突出显示。精确值取决于成像质量。
保留深色背景框、堆叠直方图，并且不未选中重置范围。滚动浏览图像堆栈以确保良好的阈值范围，然后单击"应用"。在将堆栈转换为二进制窗口中，将方法设置为默认值，将背景设置为浅色。
取消选中此窗口中的所有框，然后单击"确定"。将显示一个双化图像，显示白色背景上的黑色平面图。确保整个平面图在图像序列的所有帧中可见。
通过单击分析和设置测量值来设置测量值。选中区域、质量中心、堆栈位置和拟合椭圆的框，然后单击"确定"。选择打开的图像堆栈并选择分析，并分析粒子。
在分析粒子窗口中，选择"显示"和"蒙版"以打开一个新堆栈，显示使用所选参数检测到的所有对象。设置大小过滤器，通过输入平面图的近似区域来消除不必要的噪音。然后选中显示结果和清除结果的框，然后单击"确定"。
使用面板底部的滑块平移蒙版图像堆栈，以确保没有平面图的杂色或帧。在结果窗口中，使用文件保存数据，并将 CSV 扩展名另存到文件名中，以将数据另存为逗号分隔值。保存图像堆栈的数据后，关闭相应的图像堆栈结果和蒙版窗口。
为了通过有害温度引起擦伤，在热盘上将玻璃烧杯中的平面水加热到 65 摄氏度。将平面放在竞技场的中心，等待，直到它直立方向，并开始滑翔，然后开始录制。使用P 200移液器缓慢而一致地移液100微升的预热平面水，后咽到平面的尾端，以诱导皱。
停止录制，一旦擦伤停止。将平面放在回收容器中，如果进行更多实验，则将介质与新鲜室温平面水交换。要通过截肢来诱导擦伤，请将一名平面者转移到竞技场的中心，然后等待，直到平面者直立方向并开始滑翔。
然后开始录音，用干净的剃刀刀片截肢。确保切割位置在实验中保持一致。前片停止皱起后停止录制。
取出这两块，将它们放在一个单独的容器中，并允许它们再生七天。截肢的平面师一旦再生，就可以重新融入家庭容器。该协议用于测试是否接近紫外线照射，诱导在S.mediterranea和D.japonica平面，而D.japonica平面，当暴露在接近紫外线光，S.mediterranea平面图要么显示尾部变薄或没有反应。
D.japonica平面体至少表现出三条连续的直线皱子的皱擦参数的量化，揭示了该物种的特征皱擦参数在小鼠中与250微摩尔甲醛未知TRPA的一种角膜的对比暴露，导致皱毛和S.mediterranea。而D.japonica平面显示蛇一样和振荡运动的混合物被滑翔或有力的头部转弯打断。对至少连续三次振荡的样本进行定量，对四个参数中的三个值产生显著较低的值，而预期在 D.japonica 中，该参数的皱痕值显著降低，表明观察到的振荡运动没有擦伤。
RNAi 确认了在 S.mediterranea 中对辛纳尔醛暴露的擦伤和反应的特异性。在180秒内暴露在平面水中，所有控制RNAi平面者皱着。与 Smtrpa 相比， 没有一个 Rnai 平面师证明 S. mediterranea 在肉桂醛中擦伤需要 Smtrpa 一个。
必须保持一致，如何操纵动物，以减少噪音，并确保行为测量的可重复性。可以扩展此项目以包括体形分析，从而识别和量化此处未捕获的其他平面行为。
