该系统允许研究人员轻松构建用于光遗传学实验的廉价且多功能的照明系统。该技术的优点包括能够使用跨越可见光近红外光谱的可用波长对LED照明时序进行编程,并且LED可用于各种环境 要构建电路,请将印刷电路板夹在辅助手上并插入跳线,将它们连接以形成A1和A3针孔到地面, D2 跳线插入 D6 针孔,电源加上 7 号跳线插入 A7 针孔。将端子弯曲 45 度并添加助焊剂。
焊接后,修剪电线的背面。将焊接的母线对线连接器的一端插入 A5 孔。然后将电阻的一端连接到 A5 孔。
将连接器的另一端接地。然后将电阻的另一端接地并焊接连接。对于 Arduino 连接器,将电线的末端压接到电线连接器,然后将压接的末端推过矩形连接器。
要设置 LED,请从下方加热,同时从顶部添加焊料,从而为电线镀锡。在大焊头上放置大量焊料,然后用焊头在含有助焊剂的触点处加热 LED 基座。几秒钟后,将焊料分别拖过每个触点,并使用发夹将黑线固定在阴极上。
将大量焊料放在大烙铁头上,然后将烙铁头压在导线上,直到 LED 底座上的焊料熔化。按住电线并取出烙铁,同时将电线固定到位。将少量焊膏放在焊盘上以进行 LED 连接,然后使用镊子将 LED 放在焊盘上。
将预镀锡的红线放在阳极上,然后用发夹夹住电线。如图所示,将焊料添加到大尖端,然后将尖端压在连接上,直到 LED 底座上的焊料熔化并且焊膏熔化并变成银。要制作 LED 导线,请在切割成一定长度的导线上放置一个 4.76 毫米的收缩管,在导线到线连接器上放置一个 3.18 毫米的收缩管。
剥离并在电线末端添加助焊剂。使用帮助手夹住电线到电线连接器,并用一端扭转连接器端。将材料焊接在一起,并以相同的方式将另一根电线连接到设置并焊接。
然后用胶带将 LED 线夹在 LED 底座下方的帮助手上。接下来,根据制造商的说明混合环氧树脂,并将环氧树脂铺在焊接的LED顶部。使用铲形钻头,在放置 LED 的盒子顶部钻一个 1.5 厘米的孔,并使用高速旋转工具在孔的一侧开一个缺口,为 LED 线腾出空间。
将 25 到 30 毫米的隐私膜粘贴到覆盖 LED 将照亮的孔的黑匣子上,并将 LED 从黑匣子外面粘在孔的顶部。对于四 LED 控制系统,在盒子盖上钻四个相距 3.81 厘米的 0.83 厘米孔,并使用高速旋转工具在左上角切一个 1.19 x 1.90 厘米的矩形孔。使用铲形钻头,在盒子背面钻一个 1.5 厘米的孔,然后将索环插入孔中。
对于计算机控制的LED,请用砂纸将微控制器粘在盒子中的区域以及微控制器支架的底部。将微控制器卡入支架上,然后将支架和盒子环氧树脂在一起,然后将支架固定在黑匣子中。然后将双面胶带放在夹子上并将夹子固定在盒子内。
在转染表达光敏色素B但不表达藻蓝蛋白胆蛋白的样品中,渗漏随着报告基因DNA数量的增加而增加。此外,当包括藻蓝蛋白胆蛋白染色质粒在内的整个光敏色素B基因开关被远红光照射时,荧光素酶表达也随着转染混合物中报告构建体数量的增加而增加。同样,当光敏细胞被红光照射时,荧光素酶表达也随着报告物量的增加而增加。
当比较红光处理细胞与远红光处理细胞的诱导水平时,发现随着报告物数量的增加,折叠激活略有降低。在构建电路时,必须仔细遵循每个步骤,并在焊接每个组件之前逐行仔细检查针孔编号。该协议可用于使用各种波长对许多类型的样品或光遗传学工具进行光学刺激,并允许对照明时间表进行编程。