交替浸入葡萄糖中，在斑马鱼中产生长期血糖超血症

此协议在斑马鱼中诱发高血糖，其上升和下降模式模仿二型糖尿病中出现的高血糖。这项技术的主要优点是，它是一种非侵入性技术，可以确保高血糖是高血糖鱼类中观察到的任何改变的原因。该协议可能用于探索治疗途径或药物，针对高血糖并发症。

此协议有很多步骤，但当步骤正确和谨慎地遵循时，它应迅速成为第二性质。但是，请记住，在整个协议中，始终温和、人道地对待动物。首先建立六个储罐，每个实验组两个。

使用两升鱼缸，如果鱼总数小于20升，如果鱼缸总数超过20升。标记两个储罐之一，外壳罐和其他解决方案罐。将水箱保存在28至29摄氏度的水浴中，以保持水温。

第一天，将鱼放入各自的治疗解决方案中24小时。第二天，将鱼从处理液转移到水中24小时。第三天，将鱼从水中转移到处理解决方案。

在实验的剩余部分继续这种交替曝光。每天将经过水处理的控制鱼从水转移到水中。确保在整个实验期间，每天在同一两个小时的窗口内喂养和转移鱼。

使用标准鱼网将每个处理组中的鱼从外壳罐转移到相应的溶液罐中。将装有鱼的鱼缸放回水浴池，更换空气石和油箱盖。这个坦克现在是外壳罐，以前装鱼的鱼缸现在是溶液罐。

丢弃旧溶液，与油箱盖、气管、空气结石和网一起清洁罐体，以防止葡萄糖和曼尼托的积聚。使用水和专用海绵为每个处理条件，以适当清洁水箱。用纸巾擦干新清洁的溶液罐，并使用此油箱为第二天的解决方案做好准备。

确保其他物品干燥，由适当的治疗组分离。要准备糖溶液，请向每个溶液罐中加满两到四升系统水。使用顶部装载秤测量葡萄糖和曼尼托的正确量，并为每种化学品分别测量称重船。

将称重葡萄糖或曼尼托阿利库特添加到适当的清洁溶液罐中。用单独的玻璃搅拌棒搅拌溶液，直到糖完全溶解。然后将溶液罐返回水浴池，并盖上相应的盖子。

要准备水溶液，请向实验罐灌注系统水，将这些溶液罐返回水浴池，并盖上相应的盖子。经过四周和八周的葡萄糖治疗后，血糖值显著升高。高血糖的定义是水处理组和曼尼托治疗组的控制平均值的三倍。

在高血糖四周后收集的视网膜组织有胶质纤维酸性蛋白质或GFAP水平增加。GFAP表达在视网膜中的穆勒胶质细胞中观察到，这些细胞在糖尿病视网膜病变中改变。GFAP的增加与核因素卡帕布水平的增加有关。

暗示诱发的血糖过高会引发炎症反应和反应性胶质。经过四周治疗后，ERG记录发现，与曼尼托治疗的对照组相比，葡萄糖治疗视网膜的反应有所降低。高血糖鱼类中光感受器和双极细胞成分的振幅均有所下降。

这个程序可以通过其他高血糖测试来补充。例如，记忆检测可用于观察认知缺陷或记录基于视觉的反应，如光运动反应以评估基于视觉的并发症。一旦这项技术建立起来，我们的实验室就可以用它来研究斑马鱼模型中的高血糖诱发并发症。

经过四周的治疗，我们观察到这些并发症的速度相对较快。