使用可编程自动纳升注射器在 黑色果蝇 中植入肿瘤异体

该协议是最早描述在果蝇肿瘤同种异体移植中使用自动注射器装置的协议之一。近年来越来越受欢迎的话题。该方法的主要优点是，它通过提高肿瘤同种异体移植的速度，一致性和产量，提高了果蝇癌症研究的效率。

果蝇中的肿瘤同种异体移植是一种微妙的技术，可能很难掌握。要有耐心，相信实践是完美的。在杂交苍蝇并在18摄氏度下孵育卵六天后，将含有孵化幼虫的小瓶转移到设定在29摄氏度的孵化器中。

根据性别对麻醉的野生型或突变的成年苍蝇进行分类。将一块五厘米长的苍蝇胶带固定在显微镜载玻片上，粘性面朝上。用镊子将苍蝇的翅膀粘在胶带上，使苍蝇固定下来。

将控制器盒和自动注射器放在光学显微镜的相对侧。使用四步微型移液器拉拔器处理玻璃毛细管的一端，将其加热到狭窄的封闭端。使用镊子以大约60度角夹住毛细管，以制备3.5英寸的玻璃毛细管。

轻轻拧下喷油器的盖子。按住空按钮以推进注射器针头，直到显示其总长度的70%至80%。使用注射器在玻璃毛细管中填充矿物油。

选择其中一个幼虫并转移到装有100微升施耐德培养基的解剖板中，以准备SG假想环肿瘤解剖。使用一对镊子固定幼虫体的中段，用另一对镊子捏住幼虫头部并纵向施加拉伸力。定位并分离幼虫的Y形SG，然后通过去除相邻组织来解剖SG假想环肿瘤。

通过按住填充按钮，用施耐德培养基填充玻璃毛细管，一直到顶部的0.5厘米段。找到原发性肿瘤并按下填充按钮，直到肿瘤被吸入毛细血管。确保肿瘤位于毛细血管的尖端或距离毛细血管尖端几毫米。

找到一只固定在磁带上的成年苍蝇。然后用镊子轻轻按住下腹部，用毛细血管刺穿腹部的下侧角质层。按下空按钮，直到肿瘤进入新的宿主腹部。

使用镊子，轻轻捏住主机的翅膀，将其从胶带上取下。然后将其放入装有新鲜食物的新小瓶中。在同种异体后约10至14天使用荧光显微镜筛查在宿主腹部生长的肿瘤，并使用两对镊子将生长的同种异体移植肿瘤从宿主中解剖出来。

使用一对镊子压住腹部，另一对镊子切开腹部角质层，暴露同种异体移植的肿瘤。小心地将肿瘤从附着的宿主组织中分离出来。使用无菌针头将肿瘤解剖成适合毛细血管大小的小块。

对新一代成年宿主重复此过程以完成肿瘤的同种异体移植。肿瘤发展的过程是通过第10天同种异体移植后在成人宿主腹部生长的第一代SG假想环肿瘤的实时成像来跟踪的。第六代SG假想环肿瘤在第10天占据了宿主腹部的大部分，同种异体移植后如图所示。

该阶段的成像可能有助于揭示肿瘤生长模式及其迁移和侵袭行为。肿瘤移植是肿瘤进展、进化和转移纵向研究的一项重要技术。结果对于研究肿瘤宿主相互作用具有重要意义。

该原型在使用药物Temodal的癌症药物筛选中具有巨大潜力。使用这种技术，研究人员将能够在调查中节省大量时间和精力。