由于其笨拙的大小,德罗索菲拉是很难想象。该方法通过立体显微镜演示苍蝇的行为和形态成像。该协议可用于科学研究和教学。
演示程序的将是 Ms.Li 童和翁玉佳女士,在我的指导下做研究培训的本科生。首先,使用约 17 到 22 毫米的半透明塑料瓶盖,或者从 5 毫升移液器尖端的厚端切割 17 毫米的一段,制作一个飞行行为观察室(FBOC)。向 FBOC 倒入 1% 的黄油以调整其深度。
如果食物需要放在FBOC,倒入阿加获得12毫米的深度。如果食物不需要放在FBOC,将醋倒入5毫米深,以便更容易地追踪果蝇的下落。如果使用移液器尖端制作 FBOC,则将切口移液器尖端部分放在 35 或 60 毫米的 Petri 盘中。
将1%的凝胶倒入Petri盘中,厚度约为5毫米,等待阿加凝固并密封FBOC底部。然后将阿加凝胶倒入 FBOC 中,达到所需的厚度。在一块直径与FBOC相同的乙胺泡沫片的中心钻一个10毫米深的洞,从而建立一个FBOC基地。
将 FBOC 插入孔中。必要时,根据观察目的,用酵母介质、人工饮食或纯蔗糖或葡萄糖制作飞食。为了直观地确定苍蝇是否在喂养,在食物中加入食物染料,最终浓度为每100毫升12.5毫克。
将准备好的食物倒入8毫米高的培养皿中。凝固后,将食物放在纸上绘制的矩形上,并相应地切开食物,放在一块塑料上,切成四边形金字塔或四边形圆环金字塔,以便从不同角度记录苍蝇降落在食物上时的飞行行为。切一块塑料,用钳子把塑料和食物放在FBOC的中心。
将1%的凝胶倒入一个1-2厘米厚的干净空瓶中,在室温下放置1-2小时。将苍蝇转移到瓶子上,在25摄氏度下放置36小时或更长时间。将苍蝇冷藏并灭活碎冰,在冰袋上进行排序,并按先前描述将其转移到 FBOC。
将苍蝇转移到 FBOC 后,用 30-40 毫米的紫外线或透明滤光片覆盖它,使相机形成 FBOC 复合体。将FBOC复合物置于立体显微镜下进行观察。照亮FBOC。
安装迷你 LED 视频灯以闪烁热鞋安装支架,并将灯放在 FBOC 的左右两侧。打开灯,将颜色温度设置为 5,000 到 5,600 开尔文,亮度设置为 100% 打开 LED 视频灯,并调整立体声变焦显微镜,直到用肉眼清楚地看到 FBOC 的边缘。将 FBOC 移到视场的中心。
将通用望远镜数码相机适配器的夹子连接到立体显微镜的目镜上。然后通过交替转动相机安装螺钉和相机固定螺钉,将紧凑型数码相机安全地连接到适配器上。打开数码相机,转动水平/垂直微调旋钮,直到 FBOC 边缘清晰地出现在相机 LCD 屏幕上明亮的圆形视场的中心。
将模式拨号旋转到孔径优先自动模式。按多选择器上的对焦模式,选择宏特写,然后按 OK 按钮。将变焦开关从广角端移到长焦端,并放大到圆形图像,直到其中央部分充满完整的 LCD 屏幕。
按下电影录制按钮并开始记录苍蝇行为。转动显微镜的聚焦旋钮,直到FBOC中的苍蝇清晰可见。选择感兴趣的飞行行为进行观察或视频录制。
转动变焦旋钮以放大和缩小,实现所需的放大以进行观察或视频录制。通过紫外线过滤器拍摄的具有代表性的照片清晰而清晰,与未覆盖文化瓶时拍摄的照片非常相似。通过佩特里菜的玻璃拍摄的照片质量很差,部分模糊不清。
此处显示从视频录制中拍摄的照片,其中显示了苍蝇身体每个部分的细节。由于相机连接到变焦立体显微镜,因此使用变焦系统从全景拍摄到特写镜头非常容易。使用此协议,可以观察和记录苍蝇行为以获得多个视角。
例如,雌蝇在产卵过程中经常用后腿摩擦卵泡。从侧面看不清产蛋行为的这个细节。使用这种简单而经济的方法,我们可以采取全景或特写苍蝇的行为和形态,并获得一个高质量的视频或照片。