建立小鼠重症急性胰腺炎模型，将牛磺胆酸钠逆行注射到胆胰管中

本视频的总体目标是通过逆行注射牛磺草酸钠到胆胰管中来建立急性胰腺炎的小鼠模型。所有涉及动物的实验均获得苏州大学动物伦理委员会的批准。所有外科手术均在完全麻醉下进行。

镇痛药不是为了不干扰疾病的自然过程，这在以前的文献中得到了证明，并得到了东吴大学动物伦理委员会的批准。在手术前8至12小时禁食小鼠。通过0.22微滤器制备5%牛磺胆酸钠溶液过滤器。

高压灭菌手术器械和材料，包括镊子、剪刀、刀片架、针头支架、止血夹、血管夹和无菌窗帘。通过辐照对微型注射器进行灭菌。用小鼠，腹膜内注射1%戊巴比妥钠溶液，剂量为每公斤50毫克，诱导全身麻醉。

用胶带将鼠标固定在辐照泡沫平板上的仰卧位。用脱毛膏去除小鼠的皮毛，从xiphoid过程水平向下到双侧前髂上脊柱的连接线，左右两侧平行于前腋窝线。用0.5%碘磷擦拭皮肤两到三次，每次让它干燥一到两分钟。

用无菌窗帘覆盖鼠标。切开皮肤层，然后皮下打开。做一个大约两到三厘米长的腹部正中切口。

沿着胃从左到右定位十二指肠。使用手术钳和消毒剂浸泡的棉签轻轻地将十二指肠拉出并向左侧拉出，以暴露胰腺，胆胰管和十二指肠。使用 8-0缝合线通过十二指肠和胰腺之间的连接，围绕，将缝合线拉到小鼠身体的左侧以固定十二指肠。

轻轻地将皮肤和肝脏的下边缘拉到一边。钳夹肝总管。逆行将显微注射器刺入远端胆胰管。

用钳子固定十二指肠附近的针尖。以每分钟5微升的速度将10微升5%牛磺胆酸钠输注到胆胰管中。保持胆胰管闭合5分钟，以达到稳定的压力。

取下夹子。拉出显微注射器，取下另一个夹具并固定缝合线。将十二指肠恢复到原始解剖位置并检查出血。

用6-0缝合线闭合伤口。取下无菌悬垂物。用0.5%碘伏消毒切口。

在37摄氏度的热垫上从麻醉中恢复动物。皮下注射0.8毫升0.9%盐水补充液体。在术后24小时，使用相同的剂量和注射途径用戊巴比妥钠麻醉小鼠。

从腹主动脉收集全血，以1， 500×g旋转15分钟，以分离血清进行血清学检查。收集胰腺和肺组织进行组织学评估。将胰腺浸入4%多聚甲醛溶液中24小时。

在一系列酒精浓度下脱水并嵌入石蜡中。使用切片机准备5微厚的胰腺组织切片。进行H&E染色以评估胰腺的组织学。

与术前相比，小鼠略微不活动，并且在术后24小时体重减轻。对照组和SAP小鼠在术后72小时的存活率分别为100%和72.7%。根据胰腺切片的H&E染色结果，可以在SAP小鼠中观察到胰腺组织的髓质坏死，而在对照组中未发现显着变化。

此外，与对照组相比，SAP小鼠的淀粉酶，脂肪酶，胰腺和肺MPO活性水平显着增加。此外，还发现肝脏和肾脏指数水平显着升高，包括ALT，AST，BUN和肌酐。使用逆行注射牛磺胆酸钠到胆胰管中，可以在小鼠中诱导严重的急性胰腺炎。

良好的胆胰管暴露，以确保成功穿刺。在穿刺过程中，确保适当的角度和力，以避免穿刺胆胰管。这里描述的TC诱导的SAP模型是研究严重急性胰腺炎机制的合适模型。

这是一种使用较便宜试剂的经济模型，此视频有助于更快地培训新手外科医生。