Bu videonun genel amacı, biliopankreatik kanala sodyum taurocholate retrograd enjeksiyonu yoluyla akut pankreatit fare modeli oluşturmaktır. Hayvanları içeren tüm deneyler Soochow Üniversitesi Hayvan Etik Kurulu tarafından onaylandı. Tüm cerrahi işlemler tam anestezi altında yapıldı.
Analjezikler, önceki literatürler tarafından kanıtlanan ve Soochow Üniversitesi Hayvan Etik Kurulu tarafından onaylanan hastalığın doğal seyrine müdahale etmemek için kullanılmadı. Ameliyattan 8 ila 12 saat önce fareyi hızlı bir şekilde oruç tut. %5 sodyum taurokolat çözelti filtrelerini 0,22 mikro filtre ile hazırlayın.
Cerrahi aletleri ve malzemeleri, mantoları, makası, bıçak tutucuyu, iğne tutucuyu, hemostatik klipsi, damar kelepçelerini ve steril perdeleri de dahil olmak üzere otoklavlayın. Mikro şırınga ışınlama yoluyla sterilize edildi. Fare ile, kilogram başına 50 miligram dozajda% 1 pentobarbital sodyum çözeltisinin intraperitoneal enjeksiyonu ile genel bir anesteziye neden olabilir.
Fareyi bantla ışınlanmış köpük düz bir plaka üzerinde sırtüstü pozisyonda sabitleyin. Bir farenin kürkünü, xiphoid işlem seviyesinden, sol ve sağ tarafları ön aksiller çizgiye paralel olarak, bilateral ön üst iliyak omurganın bağlantı çizgisine kadar bir depilasyon kremi ile çıkarın. Cildi% 0.5 iodophor ile iki ila üç kez silin ve her seferinde bir ila iki dakika kurumaya bırakın.
Fareyi steril perdelerle örtün. Açık cilt tabakasını kesin ve ardından deri altı olarak açın. Yaklaşık iki ila üç santimetre uzunluğunda ortanca karın kesiği yapın.
Duodenumu mide boyunca soldan sağa doğru bulun. Pankreası, biliopankreatik kanalı ve duodenal papillayı açığa çıkarmak için cerrahi tokmaklar ve dezenfektanla ıslatılmış pamuklu çubuk kullanarak duodenumu yavaşça dışarı ve sol tarafa çekin. 8-0 kullan papillanın etrafındaki duodenum ve pankreas arasındaki bağlantıdan geçmek için dikişler, duodenumu sabitlemek için dikişi fare gövdesinin sol tarafına çekin.
Cildi ve karaciğerin alt kenarını yavaşça kenara çekin. Ortak hepatik kanalı kelepçeleyin. Mikroenjektörü distal biliopankreatik kanala geriye dönük olarak delin.
İğne ucunu duodenal papillanın yakınına bir kelepçe ile sabitleyin. Biliopankreatik kanala dakikada 5 mikrolitre hızında 10 mikrolitre% 5 sodyum taurocholate aşıleyin. Sabit bir basınç elde etmek için biliopankreatik kanalı 5 dakika kapalı tutun.
Kelepçeleri çıkarın. Mikroenjektörü çıkarın, diğer kelepçeyi çıkarın ve dikişi sabitleyin. Duodenumu orijinal anatomik konuma getirin ve kanamayı kontrol edin.
Yarayı 6-0 dikişle kapatın. Steril örtünün çıkarın. Kesiği% 0.5 iodophor ile dezenfekte edin.
Hayvanları 37 santigrat derecelik bir termal ped üzerinde anesteziden kurtarın. Sıvı takviyesi için 0.8 mililitre %0.9 salin deri altından yönetin. Ameliyattan sonra 24 saat, aynı doz ve enjeksiyon rotasını kullanarak fareyi pentobarbital sodyum ile uyuşturun.
Tüm kanı abdominal aorttan toplayın ve serumu serolojik test için izole etmek için 15 dakika boyunca 1,500 x g'da döndürün. Histoloji değerlendirmesi için pankreası ve akciğer dokularını toplayın. Pankreası 24 saat boyunca% 4 paraformaldehit çözeltisine daldırın.
Bir dizi alkol konsantrasyonunda susuz kalsın ve parafin içine gömün. 5 mikro kalın pankreas dokusu bölümleri hazırlamak için bir mikrotom kullanın. Pankreasın histolojik değerlendirmesi için H&E lekeleme gerçekleştirin.
Fareler hafif hareketsizdi ve ameliyat öncesi ile karşılaştırıldığında operasyon sonrası 24 saatte kilo verdi. Operasyon sonrası 72 saatte kontrol ve SAP farelerinin sağkalım oranları sırasıyla %100 ve %72,7 idi. Pankreas bölümlerinden elde edilen H&E boyama sonuçlarına göre, kontrol farelerinde önemli bir değişiklik bulunmazken SAP farelerinde pankreas dokusunun pulpal nekrozu gözlenebilirdi.
Ayrıca SAP farelerinde kontrol farelerine kıyasla önemli ölçüde artmış amilaz, lipaz, pankreas ve akciğer MPO aktivitesi bulunmuştur. Ayrıca ALT, AST, BUN ve kreatinin dahil olmak üzere karaciğer ve böbrek indekslerinde önemli ölçüde yüksek seviyeler bulunmuştur. Sodyum taurocholate'nin biliopankreatik kanala retrograd enjeksiyonu kullanılarak, farelerde şiddetli akut pankreatit indüklenebilir.
Başarılı delinmeyi sağlamak için biliopankreatik kanalın iyi pozlaması. Delinme sırasında, biliopankreatik kanalın delinmesini önlemek için uygun açıyı ve kuvveti sağlayın. Burada descried TC indüklenmiş SAP modeli şiddetli akut pankreatit ile ilgili mekanizmaları incelemek için uygun bir modeldir.
Daha ucuz reaktifler kullanan ekonomik bir modeldir ve bu video acemi cerrahın daha hızlı eğitülmesine yardımcı olur.
