这是有史以来第一个被验证为对情感状态变化敏感的小鼠判断偏差任务，换句话说，情绪或情绪。它可用于研究任何变量对鼠标影响的影响。该协议使用行为学设计，使小鼠易于学习，并且对福利友好，因为该任务避免了使用惩罚或负强化。
这项任务可以评估饲养或实验程序对小鼠情感状态的影响，使其在动物福利研究或模拟人类情感障碍等不同领域都很有价值。假设研究人员已经对非厌恶性处理方法感到满意，我们的主要建议是在训练前使用飞行员来识别适当的气味混合物，换句话说，小鼠认为模棱两可的气味混合物。这种行为测试是一项基于气味的go-go挖掘任务，其中鼠标必须挖掘以获得高价值或低价值的食物奖励。
实验装置包括一个带有两个臂的矩形竞技场。一只手臂总是居中并标有正或负的歧视性刺激气味，另一只手臂总是没有气味。挖掘罐包括一个可接近和不可接近的隔间，由穿孔塑料屏障隔开。
设备中的两个罐子始终包含高价值和低价值的食物，但根据手臂和试验类型，零食是可以获得的。在积极的训练试验中，老鼠可以选择探索和挖掘有香味的手臂，其中包含一个标有积极鉴别刺激气味的锅和埋藏的高价值食物奖励。老鼠还可以选择挖无味的手臂，这是用蒸馏水标记的，并含有低价值的食物奖励。
在负训练试验期间，老鼠可以再次选择有香味的手臂，它现在包含一个标有负面判别刺激气味且没有可访问的食物奖励的锅，或者无味的手臂，它再次用蒸馏水标记并包含低价值的食物奖励。然后，在阳性和阴性非强化试验中对小鼠进行测试，其中没有食物奖励，那些已经学会了这项任务的人将接受一个不强化的模糊试验。在模棱两可的试验中，有香味的手臂包含一个锅，上面标有正面和负面鉴别刺激气味线索的混合物，使气味模糊，而无味的手臂则像往常一样只用蒸馏水标记。
老鼠在这场模棱两可的试验中揭示了他们的判断偏见。对于实验制备，使用一毫升注射器或微量移液管，将薄荷和香草提取物加入标记的离心管中。用蒸馏水以1:4稀释提取物，并通过倒置几次混合。
每天制作这些，并在使用前反复倒置，以确保混合物新鲜且一致。对于气味模糊的混合物，在薄荷和香草香精被稀释后，向离心管中加入等体积的离心管，制成稀释香精的1:1混合物。接下来，在强化试验期间，对于正判别刺激气味罐，将一块食物放在难以接近的隔间中，并将一块香蕉片埋在锅的可进入区域。
对于负判别刺激气味锅，将一块食物和一块香蕉片放在难以接近的隔间中。然后，用三厘米的玉米棒垫料填充锅。此锅的可访问区域不提供食物奖励。
对于没有香味的锅，将一块香蕉片放在难以接近的隔间中，然后将一块面包埋在锅的可触及区域。在所有未经强化的试验测试中，将一块食物和一块香蕉片放在难以接近的隔间中。然后，用三厘米的玉米棒垫料填充锅。
此锅的可访问区域不提供食物奖励。装满花盆后，使用注射器或微量移液器吸取100微升的适当气味混合物或蒸馏水，并以圆周运动将其直接注射到玉米芯的顶部。接下来，要准备香味分配器，将一块化妆棉片放在纸巾盒的底部。
然后，使用一毫升注射器或微量移液器，吸取100微升适当的气味混合物或蒸馏水并将其注入棉片上。用盖子盖住纸巾盒，以包裹有香味的棉花，并创建一个香味分配器。将挖掘锅放在竞技场手臂的末端，将香味分配器放在每个手臂的开头。
将可拆卸门插入盒式磁带插槽之前，以阻止进入竞技场臂并创建启动隔间。在鼠标的黑暗和活动阶段，在红灯下执行所有训练和测试课程。在每次训练或测试之前，通过从料斗中取出食物，将小鼠在笼子里禁食一小时。
在挖掘训练的第一天，将食物奖励放在三厘米长的玉米芯垫料上，而不是埋在下面。在接下来的四天里，逐渐将奖励埋在玉米棒下更深处，直到它们在第五天位于三厘米垫料的底部。要开始训练试验，请将鼠标从运输笼移动到竞技场的起始舱。
取下起跑门，立即将有机玻璃盖放在竞技场上方，然后启动五分钟的试用计时器。然后，将挖掘延迟记录为观察到第一次发生挖掘的时间，将进食延迟记录为观察到第一次进食发生的时间。对于歧视培训，在第一天到第五天进行一次积极的强化试验，然后进行一次消极的强化试验。
在第6天至第10天，伪随机化试验顺序，以便每只小鼠每天进行两次阳性试验和两次阴性试验。在测试阶段，每天对每只小鼠进行一次阳性或阴性非强化测试试验，直到满足学习标准。每天，在视频记录的测试试验之前以随机顺序进行一次阳性和一次阴性强化试验，并在测试试验后进行另一次阳性和阴性强化试验。
确保阳性和阴性测试试验在几天内交替进行。要执行视频录制的未强化测试试验，请将鼠标从运输笼移动到竞技场的起始隔间。然后，在三脚架上设置摄像机，以便手臂末端的两个锅都在视野中并开始录制。
确保在视频评分期间使用鼠标盲码和试用类型记录提示卡。取下起跑门，立即将有机玻璃盖放在竞技场上方，然后启动两分钟的试验计时器。测试后，将鼠标放回其运输笼中。
在测试当天对阳性和阴性测试试验视频进行评分，以评估小鼠是否符合学习标准。确保当天的视频评分，因为符合学习标准的动物将在第二天接受模棱两可的测试。使用事件记录软件或秒表，让对治疗视而不见的研究人员记录每只小鼠在阳性和阴性测试试验的第一分钟内在每个罐中挖掘和挖掘的延迟。
将挖掘延迟记录为观察到第一次挖掘的时间，并将挖掘持续时间记录为鼠标进行挖掘的总时间。比较正负试验之间在香味锅中的挖掘持续时间，以确定小鼠是否可以区分任务。如果在测试的第一分钟，正判别刺激气味罐中的挖掘持续时间至少是负判别刺激气味罐的两倍，则满足学习标准。
对于符合学习标准的小鼠，测试对模糊气味混合物的反应。以随机顺序进行一次阳性和一次阴性强化试验。然后，使用模糊的气味混合物进行一次视频记录的测试试验。
对于数据分析，绘制每种试验类型中延迟的最小二乘均值，以确认所呈现的模糊提示被解释为中间值。在评估一分钟和两分钟测试中的判断偏差时，通过正判别刺激 - 气味相互作用的试验类型是显着的。这表明，以薄荷为正鉴别刺激的小鼠出人意料地将模棱两可的气味混合物解释为阳性，而以香草为正鉴别刺激的小鼠则将相同的模糊气味混合物视为中间体。
这一发现表明，只有以香草为正判别刺激的小鼠才符合将气味混合物作为正负判别刺激之间的中间体的技术要求。因此，以薄荷为积极鉴别刺激的小鼠被排除在随后的判断偏倚分析之外。在以香草为积极鉴别刺激的小鼠中，住房影响了挖掘潜伏期，传统饲养的动物在模糊试验中的挖掘速度比环境丰富的小鼠慢，但不适用于阳性或阴性试验。
这些对传统饲养的小鼠的模糊线索的悲观解释反映了表明负面影响的负面判断偏差。在执行此协议时，满足技术标准非常重要。小鼠应该满足学习标准，表明它们能够区分线索，并将模棱两可的线索解释为中间线索。
这种新的判断偏倚任务的发展为测试有关小鼠情感状态的重要假设打开了大门，这些假设具有动物福利和临床意义。
