小鼠心脏移植模型有助于研究心脏同种异体移植物的免疫学和矢状旁排斥机制。这种理解将有助于开发一种独特的方法来改善患者的长期生存率。这种宫颈移植手术是使用袖带方法在没有缝合的情况下进行的。
因此,它降低了血管吻合的复杂性,避免了对下半身血液供应和静脉反流的干扰。演示该程序的将是来自我们实验室的外科医生Xin Mao博士。首先,将受体鼠标放在手术台的加热垫上,并在手术区域剃掉头发。
对手术区域进行消毒后,从右下颌角到尾端,做一个平行于颈椎中线的1.5至2厘米切口。使用电凝器和微钳解剖约1厘米的右颈外静脉。用无神经微血管钳夹住近端的静脉,并在远端结扎。
将静脉的远端穿过带有斜端和浅凹槽的 22 号聚氨酯倒钩袖带。使用微血管夹用袖带的手柄固定静脉。删除 8-0在远端进行结扎缝合,将内腔翻过由浅表倒钩住的袖带,并用10-0手术缝合线将其固定在表面的凹槽中。
切除右舌下腺,形成用于植入心脏移植物的窝,并保留上颌下腺的右叶和右胸锁乳突。使用微钳解剖右颈总动脉约 1 厘米,并在近端用无创伤微血管钳夹夹住动脉。结扎并切断动脉。
将动脉的远端穿过带有斜端和表面凹槽的 26 号聚氨酯倒钩袖带。使用微血管夹用袖带的手柄固定动脉。取下远端的结扎缝合线,将腔内翻在袖带上,并用浅表倒钩和凹槽用 10-0 手术缝合线固定。
准备好接受者的血管后,在血管上滴100国际单位每毫升肝素盐水以防止血栓形成。用湿盐水纱布覆盖宫颈切口,以便随后植入。使用电动剃须刀剃掉腹毛。
对手术区域进行消毒后,沿耻骨联合到剑突下中线切开腹部,并用牵开器扩大切口区域。使用电凝器和微型镊子解剖腹主动脉和下腔静脉1厘米,并通过下腔静脉注射1毫升生理盐水,每毫升肝素补充250国际单位进行肝素化。切除腹主动脉和下腔静脉。
用手术剪刀将胸壁分开,沿两侧腋前线切除胸部,然后以 8-0 的比分结扎上腔静脉手术缝合。在上胸下腔静脉插入头皮针。然后从上麻痹下腔静脉通过头皮针注射补充每毫升肝素100单位的冰冷生理盐水,以丰富供体心脏,直到血色褪色。
从主动脉弓向供体心脏再灌注两到三毫升冰冷的组氨酸-色氨酸-酮戊二酸溶液,以保护供体心肌。用5-0手术缝合上静脉和下腔静脉以及肺静脉。在分支之前解剖并切断供体主动脉和肺动脉。
然后分割上腔静脉和下腔静脉和肺静脉,以切除供体的心脏。将供体心脏以倒置位置植入受体小鼠的颈椎袋中。将带有外翻的颈静脉袖带拉入供体肺动脉腔,以进行端到端吻合术。
使用表面上的凹槽通过 10-0 手术缝合线结扎袖带以固定吻合口。采用类似的程序进行供体主动脉与受体颈动脉的端到端吻合术。松开颈静脉的无创伤微血管钳夹,然后松开颈动脉,重新灌注供体的心脏。
固定心脏移植物并正确缝合以防止移植物扭曲。使用5-0聚酰胺单丝缝合线用连续缝合线关闭宫颈切口。使用该小鼠宫颈异位心脏移植模型,受体小鼠的存活率约为95.2%,所有心脏同种异体移植物在移植后8天内丢失。
相比之下,所有同基因心脏移植存活超过四周。凹槽和袖带可更好地固定外翻的血管,避免反复操作血管。该手术中用于血管吻合术的改良袖带法也适用于不同器官移植动物模型中的另一种吻合术。