TMEV模型是首批允许研究中枢神经系统感染导致癫痫发作发展的机制的实验平台之一。中枢神经系统感染显著增加癫痫的风险。这些模型有助于为有风险的患者确定潜在的治疗靶点和化合物。
实验者应该接受与小鼠一起工作的培训。通过将染料注射到死去的动物中，可以很好地进行病毒注射，以达到足够的精度和常规。演示该程序的将是我实验室的研究生劳拉·贝尔（Laura Bell）。
首先，取下胰岛素注射器的盖子，并在针头周围添加聚乙烯管作为套圈，以确保足够的注射深度为2.5毫米。然后将注射器浸入乙醇中30分钟，并将注射器置于紫外线下30分钟。接下来，将盖子放回针头上，并将注射器包裹在消毒袋中。
用胶带将袋子封住，并贴上准备日期的标签。要进行病毒注射，请从零下 80 摄氏度的冰箱中获取丹尼尔斯 TMEV 菌株的等分试样。解冻病毒并将其保存在冰上。
然后将病毒悬浮液装入注射器。之后，用消毒剂清洁工作台并在烟雾吸收器下工作。将麻醉小鼠从引擎盖下的麻醉盒中转移，并通过进行脚趾捏来检查手术耐受性。
然后用酒精垫清洁动物的头部，并将小鼠的头部稍微向左倾斜，使注射部位指向上方。将皮肤向后拉一点，然后将针插入头部。接下来，在右半球的颞区脐带内注射20微升至2.5毫米的深度。
将注射器留在原位 5 到 15 秒，检查注射是否有任何泄漏或是否看到气泡，然后准备一个新的注射器。小心地将注射器拉出时，稍微旋转。然后将动物转移到一个新的笼子中，在麻醉恢复期间半开半关放在加热垫上。
并且在动物恢复足够的意识以维持胸骨卧位之前，不要让动物无人看管。首先，将所有笼子带到长凳上，并在轻度阶段每天两次观察动物的癫痫发作。通过修改后的赛车量表对癫痫发作活动进行评分，并报告癫痫发作的次数和强度。
接下来，将围栏滑过笼子以发出一些声音，然后将每只动物转移到另一个盒子中并返回。对于没有自发抓住或在笼子轻轻摇晃后抓住的动物，通过更激烈的处理来触发癫痫发作，同时小心地通过从左到右翻转鼠标的尾巴来翻转鼠标。再次观察每只动物的癫痫发作行为，并对随后的笼子重复该过程。
如果行为癫痫发作发生在药物注射期间或随后的癫痫发作处理监测期间，则记录行为癫痫发作。观察到的数据以热图的形式呈现，该热图是通过用不同颜色描绘癫痫发作阶段而创建的。通过记录脑电图，可以在感染TMEV几个月后的慢性期识别各种癫痫事件。
与对照组相比，海马变性和癫痫性TMEV感染小鼠的定量显示海马面积显着减少，TMEV小鼠的心室面积相应增加。免疫组织学分析可以提供有关各种参数的信息，例如炎症细胞的存在。在这种情况下，含有海马体的切片用标记T淋巴细胞的抗体染色。
模拟感染的动物没有显示T细胞浸润，而在大多数TMEV感染的小鼠中观察到中度浸润。一些受感染的小鼠显示出T淋巴细胞的严重浸润。并非所有动物在每个观察期内都有癫痫发作。
此外，癫痫发作的最高发生率发生在接种后的第五天和第六天。我们使用TMEV模型来测试新型抗癫痫药物对感染诱发的癫痫发作的疗效。还可以评估调查共病行为改变和电生理改变的测定。
TMEV模型为癫痫研究界提供了第一个CNS感染诱导的颞叶癫痫模型，从而可以研究感染后癫痫发生的潜在机制。
