登革热病毒诱发急性病毒性脑炎样疾病的鼠害模型

这个疾病模型的协议，你看到登革热病毒感染在大脑中成为一个体内平台，筛选病毒和宿主载体相关的神经病变。与以前的模型不同，我们的模型使用低病毒滴度感染工具，感染免疫能力研究所癌症研究所吸吮小鼠进行脑病样疾病生育诱导。演示这个程序的将是我实验室的博士生沈晶。

在启动感染程序之前，稀释不适应的登革热病毒两种，以每40微升PMRI 1640中浓度形成1倍10至第五斑块形成单位。接下来，加载一个0.3毫升注射器，配备30量针，10微升稀释病毒。一个0.3毫升注射器，配备30针，每个动物30微升病毒。

对于病毒的间向传递，按拇指和食指之间的预言家，轻轻地将一只七天大的吸吮癌症研究所的小鼠抑制在易发位置，并在松胶和羔羊缝合的交汇处将10微升的稀释病毒注入羔羊区。间体注射后，用拇指和食指将鼠标抱在一个超量位置，并轻轻内插，将30微升体积的稀释病毒注射到鼠皮腹部。为了对疾病进展进行评分，根据急性病毒性脑炎样疾病的等级，每天给每只接种的小鼠分配0到5分，并使用每组每日测试分数的标准差来绘制每天的分数。

与模拟测量的体重变化相比，只有接种的小鼠，登革热病毒接种的动物在试验的每个时间点都表现出体重下降。此外，与模拟接种动物表现出的症状相比，感染登革热病毒的动物表现出的驼背姿势、边缘性癫痫发作、边缘无力、瘫痪和死亡显著增加。事实上，登革热感染小鼠表现出在模拟接种动物中未观察到的受时间依赖性降低存活率，这证实了在中枢神经系统内建立了登革热病毒的传染性模型，表明小鼠急性病毒性脑炎样疾病的进展。

穿刺错误部位可能会导致针头阻塞的分数和病毒溶液在头部外溢出，导致注射失败和感染失败。按照这个程序，可以采集大脑样本进行病理损伤、免疫细胞渗透、病毒复制分析，分别通过血氧林和eosin染色流细胞学和斑块形成测定。我们的免疫功能性喃喃模型为探索登革热病毒感染的致病机制、开发登革热病毒疫苗或抗登革热病毒药物提供了一个平台。

登革热病毒是一种生物安全二级病原体，因此，该病毒的所有实验都应在合格的动物生物安全二级实验室完成。