用于心脏评估的循环死亡后捐献和正常区域灌注的大型动物模型

该方案描述了循环死亡后进行胸腹正常热区域灌注的大型动物模型，该模型精确地模拟了临床心脏移植。这可用于评估转化研究中的潜在策略。该方案的主要优点是，鉴于公猪和人类心脏之间的解剖学和手术技术相似性，它为心脏移植提供了合适的临床前模型。

首先使用烧灼笔对麻醉动物从颈椎中部区域到剑突进行中线切口。然后，使用电灼术沿中线逐层分割皮下脂肪以到达胸骨周围。在胸骨切口周围切割后，用手指从胸骨下方缩回并扫除软组织。

用骨锯打开胸骨，确保胸骨完全分开，同时小心胸骨上部下方的静脉。然后，烧灼胸骨或涂抹骨蜡以确保足够的止血。接下来，使用电烙术，通过将胸腺从心包中提起来解剖和去除胸腺，并烧灼从主动脉和上腔静脉供应胸腺的血管以防止出血。

小心地用烧灼术切开心包。切割时，将手指插入心包下方以避免伤害心脏。然后，静脉注射每公斤肝素 300 单位以实现全身抗凝。

如果测试可用，请确保激活的凝血时间超过 300 秒。静脉推注每公斤丙泊酚3毫克。然后，停止机械通气并断开气管插管。

监测动脉压和外周血氧饱和度。当收缩压低于 50 毫米汞柱时，开始功能性暖缺血时间。当心脏停搏和无动脉搏动时建立循环停止。

在停止维持生命的治疗并确认死亡后，右心室流出道下部收缩，肺动脉向左，主动脉向右。然后，使用烧灼术仔细解剖主动脉肺间隙。在主动脉上血管上应用大的交叉钳，以避免和排除脑灌注。

接下来，使用梅岑鲍姆和直角镊子，在上腔静脉和无名动脉之间以及下腔静脉和心包之间精细地解剖。并使用脐带或简单的零丝缝线绕上腔静脉和下腔静脉，并用止血带固定它们。使用 3-0 缝合线，将两条同心钱包线缝合在远端升主动脉外膜上，避免全层缝合。

然后，在用止血带固定所有缝合线之前，将钱包绳缝合线放在右心房。接下来，建立并启动常温区域灌注系统。然后，使用 17 至 21 根法式动脉插管插管主动脉，并通过收紧止血带，握住钱包绳缝合线将其固定到位。

在右心房的钱包绳中心创建一个五毫米的切口，并使用小角度的仪器（如直角或卡扣）将其扩张。用手指盖住切口，以避免出血过多。接下来，使用双级静脉插管插管右心房。

然后，使用止血带收紧钱包绳缝合线来固定套管。使用半到三个超过八英寸的连接器将插管连接到正常热区域灌注回路的静脉管路，确保完全脱气以避免系统中的气闸。确保从宣布死亡到开始正常区域灌注之间至少经过 15 分钟，以涵盖临床实践准备、悬垂和进入心脏所需的时间。

开始功能性暖缺血时间后15分钟，启动常温区域灌注并逐步调整流速，以达到每平方米2.5升/分钟的灌注指数。用 50% 的吸入氧和每公斤潮气量 6 毫升重新开始机械通气。当符合断奶标准时，停止正常热能区域灌注。

从右心房取下套管，迅速收紧钱包绳缝合线，以尽量减少失血。用结固定缝合线。然后按照相同的程序移除主动脉套管。

使用标准经食管探头和直接放置在心脏上的经胸探头通过超声心动图分析心脏功能。心脏功能的代表性结果显示，循环死亡后捐献后心脏功能明显下降。然而，与传统移植的心脏相比，这些器官在移植后表现出相似的功能恢复。

在夹住主动脉上血管的正常热能区域灌注期间的脑血氧饱和度测量证实缺乏足够的脑灌注，而正常区域灌注期间和脱离支持后，肺顺应性测量显示与基线相比没有显着变化。该技术的发展引入了在循环死亡和正常区域灌注后的捐赠背景下评估其他器官（如肺，肾脏和肝脏）的可移植性的重要性。