该协议描述了使用斑马鱼胚胎进行基于辐射的筛选实验的详细步骤，以及一些评估不同药物和辐射治疗的观察方法。这将有助于读者设置一个半高通量药物筛选，包括使用斑马鱼胚胎的X射线暴露，这将指导评估放射毒性和所用不同药物的有效性。该程序可用于筛选和验证或评估不同的药物作为潜在的放射增敏剂或保护剂，可以进一步探索或用于癌症放射治疗或放射生物学领域。
首先，在解剖显微镜下监测生长中的胚胎。确定适当的阶段并去除任何死亡或不健康的胚胎。确保足够的胚胎分期是辐射，并在特定的原肠胚形成阶段给予药物剂量。
在开始实验之前，在巴斯德移液管的帮助下小心地将健康胚胎分布在实验板中。对于每个实验组，取 15 到 20 个胚胎。在设置辐射实验时，包括非辐照对照组和仅辐射组。
如果辐射防护罩可以覆盖并保护额外的孔免受辐射，而其他孔暴露于特定的辐射剂量，则将胚胎分布在孔板中。否则，使用单个板或圆盘来观察每个辐射剂量的胚胎。打开 X 射线辐照器机器并启动机器初始化和预热。
将实验板放在机器内部的辐照器下方的中心，确保板位于 X 射线源的正下方。然后设定剂量并开始X射线检查。照射完成后，取出板，关闭机器程序，关闭机器，放疗后立即在显微镜下检查板。
取出死去的胚胎，并在解剖显微镜下评估后记录它们的数量。将板放回 28.5 摄氏度的培养箱中。在给予辐射后，以预定的时间间隔收集数据。
记录所有可能的观察结果，例如存活率、孵化效率、发育阶段、心跳次数、身体和尾部弯曲、心包水肿和卵黄囊扩展、小头畸形、鱼鳔发育、一般运动或活动等。要捕获图像，请在干净的载玻片上选择具有代表性的胚胎。在显微镜下检查胚胎，将它们定向到特定方向。
受精后6小时照射的胚胎的存活曲线表明，在对照组和暴露于2灰色和5灰色的胚胎中，胚胎没有明显的死亡。每分钟心跳次数计数表明，随着 X 射线辐射剂量的增加，心率会大幅下降。在对照组中，每隔 24 小时间隔一次，心率就会增加。
暴露于15灰度和20灰度辐射的胚胎被怀疑为严重的心血管变形，因为心跳急剧下降。描述和评估了在不同时间点暴露于不同剂量辐射的胚胎的不同表型和发育缺陷。还对脊柱或尾巴弯曲、头部畸形和小头畸形、发育缺陷、心包水肿、卵黄囊畸形、鱼鳔畸形和眼睛结构变化进行了形态学观察对于我们已经证明的方案，选择健康的胚胎，将胚胎正确放置在辐照器中以及正确评估交叉异常是该过程的关键。
