机械通气仔猪肾小球滤过率的透皮测量

TGFR提供肾功能的实时评估。与传统标志物相比，TGFR可以多次监测同一动物的肾功能变化。此外，该技术不需要任何血液或尿液收集。

随着异种移植的最新进展，将使用猪模型进行更多的研究。因此，我们相信这个工具对于转化研究至关重要，并且在未来几年更有可能在临床上使用。该实验在三到七天大的仔猪上进行。

这些动物容易出现体温过低、血容量不足和其他手术引起的并发症。因此，需要在整个过程中进行密切监测。此外，该方法需要实践，因为它涉及气管切开术和血管插管。

在动物准备好手术后，使用手术刀片创建一个五到六厘米的左副正中垂直切口，因为猪的盲肠位于左腰旁窝。解剖腹壁层，避免损伤浅表上腹部血管。一旦腹膜层被切开，使用牵开器来改善腹内结构的通道，并确定腹部左上象限的螺旋结肠。

要定位盲肠，请追踪尾部和背侧螺旋结肠。盲肠底部的螺旋结肠与髂骨相连。将盲肠结扎在回盲部交界处的远端。

使用 18 号针头，在盲肠中穿刺 7 次，然后将粪便挤出到腹膜区域。用3/0丝线缝合腹层，使用简单的中断或连续缝合。如果有的话，也可以使用吻合器来闭合皮肤层。

盲肠结扎 8 小时后，开始透皮 GFR 测量。使用 MB 服务软件版本 3.0 调整 GFR 设备上的采样率。使用 USB 连接器，将透皮 GFR 设备连接到计算机。

打开 MB 服务软件。单击连接并将计时调整为 4， 000 毫秒。单击写入以保存设置，然后单击断开连接。

将带有透明窗口的双面粘性贴片连接到设备的一侧。将电池连接到设备，确保发光二极管覆盖透明窗口，以便进行示踪检测。连接电池后，立即将粘性贴片与设备粘合到位。

确保它得到很好的保护。由于仔猪被深度麻醉，因此可能不需要胶带将设备固定到位。用盐水制备每毫升50毫克FITC-sintristrin溶液，并将适当剂量吸入注射器中。

将装有药物的注射器连接到三通旋塞阀的一侧，并在旋塞阀的另一侧使用盐水冲洗。推动FITC-sinistrin，然后立即推注五毫升盐水，然后关闭仔猪静脉的三向旋塞阀。将设备固定在仔猪上四个小时。

为避免在此期间出现运动伪影，请按照手稿中的说明将仔猪置于麻醉状态。四个小时结束后，取出设备并立即断开电池连接。使用供应商提供的 USB 连接器将透皮 GFR 设备连接到计算机。

打开 MB 实验室软件以从设备检索数据。要保存原始数据，请单击连接并选择读取。然后，等待设备完成读取。

单击重命名，最后单击保存。根据手册的说明在分析软件中处理和评估保存的数据。简而言之，打开 MB 工作室并单击加载以导入保存的数据。

使用自动标记调整偏移、开始和停止位置。如有必要，请删除项目。选择三室模型并单击拟合以获得在几分钟内显示FITC-sinistrin清除率的读数，并使用此公式计算TGFR。

假动物和败血症动物的体重相当。脓毒症 12 小时后，在脓毒症组中观察到血清 C 反应蛋白（脓毒症标志物）水平升高。显示假仔猪和败血症仔猪术后12小时的FITC-sinistrin清除曲线。

肾功能受损的化脓性猪表现出曲线下面积增加。脓毒症仔猪的FITC-sinistrin清除率受损，提示急性肾损伤。假手术组和脓毒症组中FITC-sininstrin的平均半衰期分别为114和537分钟。

假手术组的平均GFR显著高于脓毒症组。假手术组0小时和12小时时的血清肌酐水平相似。然而，12小时后，化脓猪的肌酐水平显着升高。

确保电池正确连接到仔猪。如果电池脱落，设备将无法工作。尝试在一次液体推注中注射FITC-sinistrin，以防止多个峰。

此外，确保设备正确连接到仔猪，以防止运动伪影。通过实时测量GFR，我们可以正确评估肾功能以检测早期AKI，并可能评估正在研究的治疗药物。