TGFR, böbrek fonksiyonlarının gerçek zamanlı bir değerlendirmesini sunar. Geleneksel belirteçlerle karşılaştırıldığında, TGFR aynı hayvanlarda böbrek fonksiyonlarındaki değişiklikleri birçok kez izleyebilir. Ek olarak, teknik herhangi bir kan veya idrar toplama gerektirmez.
Ksenotransplantasyondaki son gelişmelerle birlikte, domuz modeli kullanılarak daha fazla araştırma yapılacaktır. Bu nedenle, bu aracın translasyonel araştırmalar için gerekli olacağına inanıyoruz ve önümüzdeki yıllarda klinik olarak kullanılması daha olasıdır. Deney üç ila yedi günlük domuz yavruları üzerinde gerçekleştirilir.
Hayvanlar hipotermi, hipovolemi ve ameliyattan kaynaklanan diğer komplikasyonlara eğilimlidir. Bu nedenle, prosedür boyunca yakın izleme gereklidir. Ayrıca, metodoloji trakeostomi ve damar kanülasyonlarını içerdiği için pratik gerektirir.
Hayvanı prosedüre hazırladıktan sonra, domuzlardaki çekum sol paralomber fossada bulunduğundan, beş ila altı santimetrelik bir sol paramedian dikey insizyon oluşturmak için cerrahi bir bıçak kullanın. Karın duvarı tabakalarını disseke edin, yüzeysel epigastrik damarların yaralanmasını önleyin. Periton tabakası kesildikten sonra, karın içi yapılara erişimi iyileştirmek ve karnın sol üst kadranındaki spiral kolonu tanımlamak için bir retraktör kullanın.
Çekumu bulmak için, spiral kolonu kaudal ve dorsal olarak izleyin. Çekumun tabanındaki spiral kolon iliuma birleştirilir. Çekumu ileoçekal kavşağa sadece distal olarak bağlayın.
18 gauge iğne kullanarak, çekumda yedi delik açın ve dışkıyı periton bölgesine ekstrüzyon yapın. Karın katmanlarını 3/0 ipek dikişle, basit kesilmiş veya sürekli dikişler kullanarak kapatın. Varsa cilt tabakasını kapatmak için bir zımba da kullanılabilir.
Sekiz saatlik çekal ligasyondan sonra, transdermal GFR ölçümünü başlatın. GFR cihazındaki örnekleme hızını ayarlamak için MB Service yazılım sürümü 3.0'ı kullanın. USB konektörünü kullanarak, transdermal GFR aygıtını bilgisayara bağlayın.
MB Hizmeti yazılımını açın. Bağlan'a tıklayın ve zamanlamayı 4.000 milisaniye olarak ayarlayın. Ayarları kaydetmek için yaz'ı tıklatın ve ardından bağlantıyı kes'i tıklatın.
Çift taraflı yapışkan yamaları şeffaf bir pencereyle cihazın bir tarafına takın. Pili cihaza bağlayın ve ışık yayan diyotun, izleyici algılamasına izin vermek için şeffaf pencerenin üzerine oturduğundan emin olun. Pil takıldıktan sonra, yapışkan yamayı cihaz yerine hemen yapıştırın.
İyi korunduğundan emin olun. Domuz yavruları derinlemesine uyuşturulduğundan, bant cihazı yerinde tutmak için gereksiz olabilir. Tuzlu su ile mililitre FITC-sinistrin çözeltisi başına 50 miligram hazırlayın ve bir şırıngaya uygun dozu çekin.
Şırıngayı ilaçla üç yönlü bir stopcock'un bir tarafına ve stopcock'un diğer tarafına bir salin flush ile takın. FITC-sinistrin'i, hemen ardından üç yönlü stopcock'u domuz yavrusu damarına kapatmadan önce beş mililitre salin bolusu itin. Cihazı dört saat boyunca domuz yavrusuna bağlı tutun.
Bu süre zarfında hareket artefaktlarından kaçınmak için, domuz yavrusunu el yazmasında açıklandığı gibi anestezi altında tutun. Dört saatin sonunda, cihazı çıkarın ve hemen pilin bağlantısını kesin. Transdermal GFR aygıtını, tedarikçi tarafından sağlanan USB konektörünü kullanarak bilgisayara bağlayın.
Cihazdan veri almak için MB laboratuvar yazılımını açın. Ham verileri kaydetmek için bağlan'ı tıklatın ve oku'yu seçin. Ardından, cihazın okumayı bitirmesini bekleyin.
Yeniden adlandır'ı tıklatın ve son olarak Kaydet'i tıklatın. Analiz yazılımında kayıtlı verileri kılavuzun talimatlarına göre işleyin ve değerlendirin. Kısaca, MB stüdyosunu açın ve kaydedilen verileri içe aktarmak için yükle'ye tıklayın.
Otomatik işaretleyicileri kullanarak ofset, başlangıç ve durdurma konumlarını ayarlayın. Gerekirse yapıları kaldırın. Üç bölmeli modeli seçin ve FITC-sinistrin boşluğunu dakikalar içinde gösteren bir okuma almak için sığdır'a tıklayın ve bu denklemi kullanarak TGFR'yi hesaplayın.
Hem sahte hem de sepsis hayvanları karşılaştırılabilir ağırlıklara sahipti. 12 saatlik sepsis sonrasında, sepsis grubunda sepsis için bir belirteç olan C-reaktif proteinin serum düzeylerinde artış gözlendi. FITC-sinistrin klirens eğrileri, ameliyattan 12 saat sonra sahte ve septik domuz yavruları için gösterilmiştir.
Böbrek fonksiyon bozukluğu olan septik domuzlar, eğrinin altında artmış bir alan gösterdi. Sepsisli domuz yavruları, akut böbrek hasarını gösteren FITC-sinistrin klirensinin bozulduğunu gösterdi. Sahte ve sepsis gruplarında FITC-sinistrin için ortalama yarı ömür sırasıyla 114 ve 537 dakika idi.
Sahte gruptaki ortalama GFR, sepsis grubuna göre anlamlı olarak daha yüksekti. Sıfır ve 12 saatteki serum kreatinin seviyesi sahte grupta benzerdi. Bununla birlikte, 12 saat sonra septik domuzlarda kreatinin seviyesinde önemli bir artış gözlenmiştir.
Pilin domuz yavrularına düzgün bir şekilde bağlandığından emin olun. Piller yerinden çıkarsa, cihaz çalışmaz. Birden fazla tepe noktasını önlemek için FITC-sinistrini tek bir sıvı bolusa enjekte etmeye çalışın.
Ayrıca, hareket artefaktlarını önlemek için cihazın domuz yavrularına düzgün bir şekilde bağlandığından emin olun. GFR'nin gerçek zamanlı ölçümü ile, erken evre AKI'yı tespit etmek ve muhtemelen araştırılan terapötik ajanları değerlendirmek için böbrek fonksiyonunu doğru bir şekilde değerlendirebiliriz.
