我们正在开发一种简单的方法,可以将整个秀丽隐杆线虫种群直接固定在培养板上。这种策略显著加快了成像相关实验的速度。通常用于秀丽隐杆线虫种群高分辨率成像的叠氮化钠固定是非常劳动密集型的,需要个体动物的安装和处理。
这种方法还会降低动物的寿命和活力,从而混淆数据。传统的冷却方法使用相对较低的温度,采用2至4摄氏度的微流体,这需要大量的用户培训。我们发现,随着冷却阶段,温暖的温度像六摄氏度,更强烈地固定动物进行高转速成像。
秀丽隐杆线虫的冷却固定化并未广泛使用,但在使用时,它通常与需要大量用户培训的复杂微流体相结合。由于典型固定方法的缺点,我们对冷却动员和可及性的改进为研究人员提供了高通量和更高分辨率的成像。与劳动密集型的单个动物安装和麻醉相比,我们的冷却方法可以可逆地固定大型秀丽隐杆线虫种群,从而节省 98% 的处理时间。
缺乏化学麻醉剂也最大限度地减少了对动物和研究人员的有害接触。冷却阶段允许直接在培养板上进行高通量和高分辨率成像。这种设计的简单性使其他研究人员能够轻松构建自己的设备并将其集成到现有设置中,从而彻底改变其生物学研究的范围和速度。
我们的实验室将调整冷却阶段以适应各种显微镜配置。不同的设计将适用于倒置显微镜、复合正置显微镜以及不同的成像平台。