تجميع وتشغيل مرحلة التبريد لشل حركة C. elegans على لوحات الاستزراع الخاصة بهم

نحن نعمل على تطوير نهج بسيط يمكنه شل حركة جميع سكان Caenorhabditis elegans مباشرة على أطباق الزراعة. تعمل هذه الاستراتيجية على تسريع التجارب المتعلقة بالتصوير بشكل كبير. إن تثبيت أزيد الصوديوم المستخدم عادة للتصوير عالي الدقة لسكان C.elegans كثيف العمالة للغاية ، ويتطلب تركيب الحيوانات الفردية والتعامل معها.

يمكن أن تقلل هذه الطريقة أيضا من عمر الحيوان وقدرته على البقاء ، مما قد يؤدي إلى إرباك البيانات. تستخدم طريقة التبريد التقليدية درجات حرارة منخفضة نسبيا من درجتين إلى أربع درجات مئوية من السوائل الدقيقة المستخدمة ، الأمر الذي يتطلب تدريبا مكثفا للمستخدم. وجدنا أنه مع مرحلة التبريد ، فإن درجات الحرارة الدافئة مثل ست درجات مئوية ، تشل حركة الحيوانات بقوة أكبر لتصوير الثورة العالية.

لا يتم استخدام تجميد تبريد C.elegans على نطاق واسع ولكن عند استخدامه ، عادة ما يتم دمجه مع الموائع الدقيقة المعقدة التي تتطلب تدريبا كبيرا للمستخدم. نظرا لقصور منهجية التثبيت النموذجية ، فإن تحسيننا لتعبئة التبريد وإمكانية الوصول يتيح إنتاجية عالية وتصويرا عالي الدقة للباحثين. بالمقارنة مع التركيب كثيف العمالة وتخدير الحيوانات الفردية ، يمكن لنهج التبريد لدينا أن يجمد بشكل عكسي مجموعات كبيرة من C.elegans ، مما يلغي 98٪ من وقت المعالجة.

كما يقلل نقص التخدير الكيميائي من التعرض الضار للحيوانات والباحثين. تسمح مرحلة التبريد بإنتاجية عالية وتصوير عالي الدقة مباشرة على ألواح الزراعة. تمكن بساطة هذا التصميم الباحثين الآخرين من بناء أجهزتهم الخاصة بسهولة ودمجها في إعداداتهم الحالية ، لإحداث ثورة في نطاق ووتيرة دراساتهم البيولوجية.

سيقوم مختبرنا بتكييف مرحلة التبريد لتكوينات المجهر المختلفة. ستعمل التصميمات المختلفة مع المجاهر المقلوبة والمجاهر المستقيمة المركبة بالإضافة إلى منصات التصوير المختلفة.