Сборка и эксплуатация ступени охлаждения для иммобилизации C. elegans на их культуральных пластинах

Мы разрабатываем простой подход, который может обездвижить всю популяцию Caenorhabditis elegans непосредственно на пластинах для выращивания. Эта стратегия значительно ускоряет эксперименты, связанные с визуализацией. Иммобилизация азида натрия, обычно используемая для визуализации популяции C.elegans с высоким разрешением, чрезвычайно трудоемка, требует индивидуальной установки и обработки животных.

Этот метод также может сократить продолжительность жизни и жизнеспособность животных, что может исказить данные. В традиционном методе охлаждения используются относительно низкие температуры от двух до четырех градусов Цельсия используемой микрожидкости, что требует обширной подготовки пользователя. Мы обнаружили, что на стадии охлаждения теплые температуры, такие как шесть градусов по Цельсию, сильнее обездвиживают животных для визуализации с высокой скоростью вращения.

Охлаждающая иммобилизация C.elegans широко не используется, но при использовании она обычно сочетается со сложной микрофлюидикой, требующей значительной подготовки пользователя. Из-за недостатка типичной методологии иммобилизации наше улучшение мобилизации и доступности охлаждения обеспечивает высокую пропускную способность и изображение с более высоким разрешением для исследователей. По сравнению с трудоемкой установкой и обезболиванием отдельных животных, наш подход к охлаждению может обратимо обездвижить большие популяции C.elegans, сокращая 98% времени обработки.

Отсутствие химических анестетиков также сводит к минимуму вредное воздействие на животных и исследователей. Ступень охлаждения обеспечивает высокую пропускную способность и высокое разрешение непосредственно на пластинах для выращивания. Простота этой конструкции позволяет другим исследователям легко создавать свои собственные устройства и интегрировать их в существующие установки, чтобы произвести революцию в масштабах и темпах своих биологических исследований.

Наша лаборатория адаптирует ступень охлаждения для различных конфигураций микроскопа. Различные конструкции будут работать с инвертированными микроскопами, составными вертикальными микроскопами, а также с различными платформами визуализации.